DNA固定在纳米颗粒表面的方法

巯基-羧基
巯基-羟基
异氰酸脂在水溶液中很容易水解，所以最好用有机溶剂如DMSO、DMF等。 如在水相中，则要使用pH8.5的碱性缓冲溶液，避免使用含羟基的缓冲液如 tris缓冲液，且要注意含羟基的分子不能有氨基和巯基，因为pH＞7.5顺丁烯 二酰亚胺失去对巯基的特异性，会同时与氨基和巯基发生反应。
磷酸化的 DNA Biotin-DNA 炔基修饰的 DNA 巯基修饰的 DNA 氨基修饰的 DNA
金银纳米颗粒 碳纳米管、石墨烯 二氧化硅纳米颗粒
量子点
上转换纳米颗粒
磷酸化的DNA与TiO2
π-π堆积，如单链DNA与石墨烯， 碳纳米管 静电吸附
1、Biotin-DNA
2、炔基修饰的DNA及其他生物分子
DMSO or DMF
9）SMPB (succinimidyl 4-[p-maleimidophenyl]butyrate) DMSO or DMF
10）Sulfo-SMPB (sulfosuccinimidyl 4-[p-maleimidophenyl]butyrate) Water
11）Sulfo-LC-SPDP, LC-SPDP, SPDP
巯基-巯基
pH6.5-7.5
表征：
1、定性（红外表征，如交联剂的特征峰；测颗粒的在260纳米处的紫 外吸收，跑电泳，电位，粒径变化）
2、定量（测颗粒或上清的紫外吸收，荧光，热重力分析）
3）DSS (disuccinimidyl suberate) Water
4）BSOCOES (bis[2-(succinimidyloxycarbonyloxy)ethyl]sulfone) Water
5）DSG (disuccinimidyl glutarate) DMSO or DMF
6）DTSSP (3,3´-Dithiobis[sulfosuccinimidylpropionate])
3、NH2-DNA
氨基 羧基 氨基 氨基
氨基 羧基
氨基 羧基
1）EDC和NHS
For best results in two-step reactions, perform the first reaction in MES buffer (or other non-amine, non-carboxylate buffer) at pH 5-6, then raise the pH to 7.2-7.5 with phosphate buffer (or other non-amine buffer) immediately before reaction to the amine-containing molecule
DCC（N,N′-Dicyclohexylcarbodiimide）
氨基-氨基
NHS esters:pH 7-9
1）BS(PEG)n PEG Crosslinkers - Amine Reactive
Water
源自文库
2）TSAT (Tris-succinimidyl aminotriacetate)
Water
1）AMAS (N-[α-maleimidoacetoxy] succinimide ester) DMSO or DMF 2）BMPS (N-[β-maleimidopropyloxy] succinimide ester) DMSO or DMF
3）EMCS (N-[ε-maleimidocaproyloxy]succinimide ester) DMSO or DMF 4）Sulfo-EMCS (N-[ε-maleimidocaproyloxy]sulfosuccinimide ester) Water
10）Sulfo-EGS [ethylene glycolbis(sulfosuccinimidylsuccinate)] Water
4、巯基化的DNA
1 Au-S Ag-S 2 巯基 氨基 3 巯基 羧基 4 巯基 羟基
5 巯基 巯基
巯基-氨基
NHS esters:pH 7-9；Maleimides:pH 6.5-7.5；Usually 7.2-7.5。Two steps reaction
Water
7）DST (disuccinimidyl tartrate) DMSO or DMF
8）BS³(Bis[sulfosuccinimidyl] suberate) Water
9）EGS [ethylene glycolbis(succinimidylsuccinate)] DMSO or DMF
5）GMBS (N-[γ-maleimidobutyryloxy]succinimide ester) DMSO or DMF 6）Sulfo-GMBS (N-[γ-maleimidobutyryloxy]sulfosuccinimide ester) Water
7）BMPA (N-β-maleimidopropionic acid) EDC，0.1mol MES pH4.7 Maleimides react with sulfhydryls (–SH) at pH 6.5-7.5 8）LC-SMCC (Succinimidyl-4-[N-maleimidomethyl]cyclohexane-1-carboxy-[6amidocaproate])