核酸类药物的分析

检查
• Baidu Nhomakorabea.盐 取本品0.25g，加水25mL，振摇5分钟，滤过，滤液加稀盐
酸1mL与氯化钡试液2mL，摇匀后，不得发生浑浊。 • 2. 6-羟基嘌呤
取含量测定项下的供试品溶液，照紫外-可见分光光度法 测定，在255nm与325nm处光度比值不得过0.06。 • 3. 水分
取本品，照水分测定法（通则0832第一法），含水分应 10.0%~12.0%。 • 4. 重金属
含量测定
• 用高效液相色谱法（通则0512）测定。
• 取本品约40mg，精密称定，置100mL容量瓶中 ，加 0.01mol/L氢氧化钠溶液溶解并稀释至刻 度，摇匀，精密量取10mL，置100mL容量瓶中 ，用流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取10μL ，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取硫鸟嘌 呤对照品，同法测定。按外标法以峰面积计算 ，即得。
• RNA中戊糖为D-核糖，碱基为腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧 啶和尿嘧啶。约90%的RNA在细胞质中，在细胞核内 含量约占10％，它直接参与体内蛋白质的合成。
核酸的理化性质
（一）形态 （二）溶解性 （三）粘度 （四）两性解离 （五）化学反应 （六）紫外吸收性质
第二节 嘌呤类核苷酸药物分析
主要是通过典型的化学基团反应，在适当条件下产 生颜色、荧光，沉淀或气体等来进行鉴别； 可以利用嘌呤碱基中的共轭双键在紫外区260nm处
取本品1.0g，依法检查（通则0821第二法），含重金属不 得过百万分之十。
含量测定
取本品，精密称定，加0.1mol/L盐酸溶液溶解 并定量稀释制成每1mL约含5μg的溶液，作为供试 品溶液，照紫外-可见分光光度法（通则0401）， 在325nm处测定吸光度，按C5H4N4S 的吸收系数 （ E1cm1%) 1265计算，即得。
二、硫鸟嘌呤
•淡黄色结晶性粉末，无臭或几乎无臭，在水 、乙醇或三氯甲烷中不溶，在氢氧化钠试液 中易溶。
•2-氨基嘌呤- 6（1H）硫酮，按干燥品计算， 含C5H5N5S不得少于97.0%。
S HN H2N N
H N
nH2O N
鉴别
• 1. 取本品约10mg，加等量甲酸钠混匀，缓缓加 热，所产生的气体能使湿润的醋酸铅试纸显黑 色或灰色。
• 2. 含磷物质
取本品50mg，置10mL凯氏烧瓶中，加50%硫酸溶 液1mL，加热约3分钟，冷却，滴加硝酸3滴～4滴， 继续加热至溶液几乎无色后，冷却转移至纳氏比色 管中，用水10mL分次洗涤烧瓶，洗液并入比色管中 ，加钼酸铵硫酸试液2.5mL与1-氨基-2-萘酚-4-磺酸溶 液1mL，用水稀释至 25mL，摇匀。如显色，与标准 磷酸盐溶液1.5mL，加水10mL，再加钼酸铵硫酸试液 2.5mL与1-氨基-2-萘酚-4-磺酸溶液1mL，用水稀释使 成25mL，摇匀制成的对照液比较，不得更深（0.03% ）。
SH N
N
H N
H2O N
鉴别
1.取本品约20mg，加乙醇20mL，微热使溶解，加1% 乙酸铅的乙醇溶液1mL，生成黄色沉淀。 2. 取本品约20mg，加硝酸数滴，置水浴上蒸干，遗 留物为黄色，放冷后，加氢氧化钠试液1滴～2滴， 即变为黄棕色。 3. 取本品约10mg，加氨试液10mL，应溶解澄清；加 入硝酸银试液1mL，即生成白色絮状沉淀；加硝酸 共热，沉淀不溶解。 4. 本品的红外光谱吸收图谱应与对照的图谱一致。
有最高吸收峰，230nm处有最低吸收峰这一性质来 鉴别； 嘌呤类核苷酸药物具有特殊的分子结构，可借助 于红外光谱，进行鉴别； 常见的嘌呤类药物有巯嘌呤、硫唑嘌呤、硫鸟嘌 呤和肌苷等。
巯嘌呤
• 黄色结品性粉末，无臭 ，在水或乙醇中极 微溶解，在乙醚几乎不溶。
• 巯嘌呤为6-嘌呤硫醇一水合物。按无水物计 算，含C5H4N4S应97.0%~103.0%。
• 2. 取本品约10mg，用2mol/L盐酸溶液溶解 并稀释至100mL，摇匀，取5mL溶液，用水 稀释至50mL，摇匀，照紫外-可见分光光度 法（通则0401）测定，在280nm波长处有最 大紫外光吸收。
• 3. 本品的红外光谱吸收图谱应与对照的图 谱（光谱集478图）一致。
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第十二章 核酸类药物的分析
• 核酸的基本结构单位是核苷酸，核苷酸由核苷和磷酸 组成，核苷由碱基和戊糖组成。根据分子中所含戊糖 的种类核酸可分为核糖核酸（RNA）和脱氧核糖核酸 （DNA）。
• DNA中的戊糖为D-2-脱氧核糖，碱基为腺嘌呤、鸟嘌 呤、胞嘧啶和胸腺嘧啶；DNA主要存在于细胞核和线 粒体内，是生物遗传的主要物质基础，承担体内遗传 信息的贮存和发布。
• 2.取本品约20mg，用0.1mol/L氢氧化钠溶液 10mL溶解后用水稀释至100mL，摇匀，取2mL 置于100mL容量瓶中，用盐酸溶液（9→1000） 稀释至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法（ 通则0401）测定其吸光度，257nm与348nm的 波长处有最大吸收。
检查
• 1. 氮
取本品约0.1g，精密称定，照氮测定法（通则0704 第一法）测定，按干燥品计算，含氮应为40.6%～ 43.1%。
三、硫唑嘌呤
•2-[5-(1-甲基-4-硝基-1H-咪唑基)硫代]-1H-嘌呤。 按干燥品计算，含C5H7N7O2S不得少于98.0%。
CH3 N N
S
NO2
HN
N
NN
性状
•淡黄色粉末或结晶 性粉末，无臭，味 微苦。在乙醇中极 微溶解，在水中几 乎不溶，在氨试液 中易溶。
鉴别
• 1. 取本品约0.5mg，加盐酸（1→2）1mL溶 解后，加碘试液数滴，即产生棕色沉淀。
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—适用于制药类专业
第一章 绪论 第二章 药物分析基本知识 第三章 生物药物的检查法 第四章 生物检定法 第五章 免疫分析法 第六章 电泳分析法 第七章 色谱法 第八章 酶分析法
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第九章 氨基酸、肽类、蛋白质类药物的分析 第十章 抗生素类药物的分析 第十一章 维生素类药物的分析 第十二章 核酸类药物的分析 第十三章 甾体激素类药物的分析 第十四章 药物制剂及工艺用水的分析 第十五章 基因工程药物分析 第十六章 体内药物分析常用方法与应用