微生物培养及药敏结果解读内容
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微生物培养、药敏试验得流程及意义
一、微生物培养及药敏试验得总述
微生物培养就就是使用体外试验得方法检测可能导致感染得病原菌,并给以药敏结果,为临床医生针对某一特定得临床感染提供依据。而药敏试验则就是承接微生物培养得一项工作,即对于培养得到得病原菌进行体外试验检测细菌对于抗菌药物得耐药性,来预测抗菌药物得临床治疗效果,从而为临床医生提供选用抗菌药物得依据来治疗感染。
对于检测到得可能得致病菌进行药敏试验时选择得药物就是参照美国得CLSI推荐得标准制定得。尤其,使用全自动微生物分析仪进行药敏试验时有固定得药敏组合,不就是人为可以随意添加或减少得。
(一)微生物得培养与药敏试验得流程基本为:
①将标本进行处理(不就是所有得标本都需要处理);
②将标本接种于不同得培养皿中在不同条件得培养箱中进行培养(不同得标本所含菌得种类不同,不同菌得生长条件不同,因此需要接种于不同得培养皿中);
③24h后观察培养皿中细菌得生长情况:
a、此时若无细菌培养,继续放回培养箱中培养24h,若仍然无细菌生长则判定为阴性结果,因此阴性结果出具得时间为48h以后。
b、若有细菌生长,要根据形态与气味等对细菌进行初步得判定,若能判定出细菌得种类,则进行相应得药敏试验。贴有药敏片得培养皿在培养箱中培养24h后进行药敏结果得解读,然后报告结果,这种微生物培养及药敏结果报告出具得时间就就是48h以后。
由于不同得细菌得生长得速度不同,有些细菌在培养24h后不能完全判定结果甚者24h培养后无法观察到明显得细菌生长得则需要继续培养24h,即连续培养48h后同样根据菌落得形态、气味等来观察判定细菌得种类然后进行药敏试验。这种微生物培养与药敏试验结果出具需要72h以后。
而血液、骨髓等标本则就是利用不同于上述培养方式得方法进行培养。它有专门得培养瓶与仪器。这种仪器会自动监测培养瓶中得变化来判定有无细菌生长,若有细菌生长仪器会发出警报。在培养5天内任何时间发出警报得培养瓶都要抽取瓶中得物质在培养皿中进行接种培养,同样在菌种鉴定后进行药敏试验;若在培养5天内不发出警报得培养瓶则视为阴性结果。因此血培养出具结果得时间为5~7天。
菌落得鉴定需要有雄厚得工作经验与熟练得相关基础知识。常规鉴定得方法有形态特征与理化特性。形态特征包括显微形态与培养特征;理化特性包括营养类型、碳氮源利用能力、各种代谢反应、酶反应与血清学反应。在微生物室学习时发现,很多时候在不太确定细菌得种类时,检验人员也会结合理化特性来判定细菌种类。
(二)革兰氏染色、应用及意义
由于微生物得生长有时间限定,因此微生物培养与药敏试验没有急查得说法。最快得结果也只能就是通过涂片来判定有无细菌生长与细菌染色后得颜色与形态,来给临床医生得用药提供依据。
革兰氏阳性菌与阴性菌因为细胞壁得结构不同,在革兰氏染色时染成不同得颜色。革兰氏阳性菌显示紫色、革兰氏阴性菌显红色或粉色。由于细胞壁得结构不同,导致这两类细菌在染色性、抗原性、毒性、对某些药物得敏感性等方面均有较大差异。一般情况下,大多数化脓性球菌都属于革兰氏阳性菌,它们能产生外毒素使人致病,而大多数肠道菌多属于革兰氏阴性菌,它们差生内毒素,靠内毒素使人致病。
在治疗上,大多数革兰氏阳性菌对青霉素敏感(结核杆菌对青霉素不敏感),革兰氏阴性菌对青霉素不敏感(但奈瑟氏菌中德流行性脑膜炎双球菌与淋病双球菌对青霉素敏感),而对链霉素、氯霉素等敏感。所以区分病原菌就是G+、G-,在选择抗菌药物方面意义重大。
常见得G+有:葡萄球菌、链球菌、肺炎双球菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、破伤风杆菌等;常见得G-:大肠杆菌、变形杆菌、痢疾杆菌、肺炎杆菌、布氏杆菌、流感(嗜血)杆菌、卡她(摩拉)菌、不动杆菌属、那尔森菌属、嗜肺军
团菌、百日咳杆菌、副百日咳杆菌、志贺菌属、巴斯德菌属、霍乱弧菌、副溶血性杆菌、类志贺吡邻单胞菌等。
涂片得原理就就是将标本固定于玻璃片上,并进行革兰氏染色,然后在显微镜下观察染色情况与细菌得形态。就是若有细菌生长,也只能判定就是革兰氏阳性菌或者就是革兰氏阴性菌。涂片就是一种粗略得、快速得细菌鉴定得途径。经常被辅助用于细菌种类得鉴定,虽然通过这种方法无法给予具体得细菌得种类及药物耐药性。但就是对于临床医生用药可以提供一个大致得方向。
微生物标本有带菌体液与无菌体液两种类型。带菌体液包括:痰、鼻咽拭子、尿液、粪便等;无菌体液包括血液、骨髓、脑脊液、关节腔积液、心包积液、胸腔积液、鞘膜积液、胸腹水等。在排除采集标本或其她操作过程污染之后从患者血液等无菌体液中检出得细菌一般都应视为病原菌。
二、药敏试验结果得解读
药敏试验为临床抗菌药物得选择有指导意义,正确地解读药敏报告单将会帮助我们更好地利用药敏结果来选择合理得药物及合适得剂量等。
不同细菌进行药敏试验时选用得抗菌药物就是根据美国CLSI标准来配备得。不同得药物会使用不同得药物组合,但总体上该标准将所选药物分为以下几类:
--A组:首选,常规试验与报告
--B组:首选抗生素,在下列情况下选择使用
–细菌对A组抗生素耐药
–病人对A组抗生素xx
–严重感染或多部位、多种细菌混合感染
–控制传染病流行
--C组:备选抗生素,在下列情况下使用
–对一个或多个首选药耐药得地区流行株感染
–对不常见菌感染得治疗
–控制传染病得流行
--U组:包含某些仅用于或首选治疗泌尿道感染得抗菌药物
因此,同一张药敏报告单中包含得药物有A组、B组甚至可以有C组与U 组;不同得标本检出同样得细菌,药敏报告单中得药物也不会相同。关于药敏报告单得解读,常见得问题及答案如下:
1、我们想用得药物在药敏试验中没有做?
①可能就是天然耐药
②可能就是药物得敏感性被其她药物所预报
2、为什么有得菌报告很多种药物,有得仅报告几种药物?
报告得药物种类根据细菌种类得不同而有所不同,如铜绿假单胞菌报告得药物较多,而嗜麦芽窄食单胞菌报告得药敏较少。
3、就是否能将所用得药都做药敏试验?
①没有必要:通过耐药机制与标志性药物可以预测其她抗菌药物得敏感性
②没有可能:不就是所用药物都可以做药敏试验(需要药物在体外稳定,需要有操作标准与解释标准)
4、在药敏试验报告中MIC越小得抗菌药物效果越好吗?如何根据MIC联合用药?①感染菌对同一种药物得MIC越小,效果越好;
②不同种抗菌药物之间MIC无可比性;
③目前很多仪器报告得就是检测折点,而不就是真正得MIC。
5、培养阳性得细菌都需要用抗菌药物治疗吗?
①不就是得;