紫外可见光光谱

化合物的鉴定
• 利用紫外光谱可以推导有机化合物的分子骨架中是否含有共 轭结构体系，如C＝C－C＝C、C＝C－C＝O、苯环等。 • （1）如果一个化合物在紫外区是透明的，则说明分子中不存 在共轭体系，不含有醛基、酮基或溴和碘。可能是脂肪族碳 氢化合物、胺、腈、醇等不含双键或环状共轭体系的化合物。 • （2）如果在210～250nm有强吸收，表示有K吸收带，则可 能含有两个双键的共轭体系，如共轭二烯或α，β-不饱和酮等。 同样在260，300，330nm处有高强度K吸收带，在表示有三 个、四个和五个共轭体系存在。 • （3）如果在260～300nm有中强吸收（ε＝200～1 000）， 则表示有B带吸收，体系中可能有苯环存在。如果苯环上有共 轭的生色基团存在时，则ε可以大于10 000。 • （4）如果在250～300nm有弱吸收带（R吸收带），则可能 含有简单的非共轭并含有n电子的生色基团，如羰基等。
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紫外可见光谱法测定蔬菜中的亚硝酸盐的含量
• 将绿色蔬菜（茄子与芹菜）分别经过处理后，蔬菜中所含有的亚 硝酸根与中性红指示剂在酸性介质中发生亚硝化反应，可在近紫 外区产生灵敏吸收，最大吸收波长为 360 nm。 • 分别准确移取一定量的亚硝酸根标准溶液于一系列50mL容量瓶 中，分别加入准确不同体积的10.00μg./mL亚硝酸根的标准溶液， 依次准确加入 1mL 中性红溶液，2 mL 盐酸溶液，用水稀释至刻 度，摇匀静置10min在360nm波长处，以试剂空白作参比，测定 吸光度。 • 称取 40.0 g 蔬菜 芹菜和茄子样品，经过压榨处理后，过滤后加 入少量氯仿萃取 取上层清液用去离子水稀释到100mL容量瓶中， 从中取10.0 mL于50mL容量瓶中，加1mL 中性红溶液和2 mL 盐 酸溶液 ，去离子水稀释至刻度摇匀10 min 后 在360 nm 处测其 吸光度。 • 按照实验方法，以试剂空白为参比，在不同波长处分别测定亚硝 化产物的吸光度。经测定，最大吸收波长处是 360 nm。
紫外可见分光光度法测定苯酚
• 苯酚在紫外光区的最大吸收波长λmax=270nm。对苯酚 溶液进行扫描时，在270nm处有较强的吸收峰。 • 定性分析时，可在相同的条件下，对标准样品和未知样品 进行波长扫描，通过比较未知样品和标准样品的光谱图对 未知样进行鉴定。在没有标准样品的情况下，可根据标准 谱图或有关的电子光谱数据表进行比较。 • 定量分析是在270nm处测定不同浓度苯酚的标准样品的 吸光值，并自动绘制标准曲线。再在相同的条件下测定未 知样品的吸光度值，根据标准曲线可得出未知样中苯酚的 含量。
紫外-可见吸收光谱是分子内电子跃迁的结果，它反映了分子
中价电子跃迁时的能量变化与化合物所含发色基团之间的关
系。不同的化合物由于分子结构不同，电子跃迁的类型就不 同，所以紫外-可见吸收光谱会具有不同特征的吸收峰，其吸 A
收峰的波长和强度与分子中价电子的类型有关。
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波长范围：100～800 nm.00nm
紫外可见吸收光谱法研究钻超氧化物 歧化酶活性中心钻与组氨酸的相互作用
• 应用紫外可见吸收光谱研 究了钻超氧化物歧化酶在 缓冲溶液中与组氨酸的相 互作用。发现酶活性中心 的 Co(Ⅱ)在缓冲溶液中可 以与外部物质进行交换相 互作用。Co(Ⅱ)与组氨酸 形成络合物并在活性中心 与络合物间达成动态平衡。
紫外可见吸收光谱法现场监测聚苯胺的电化 学降解
采用紫外2可见吸收光谱法 , 现场测定苯胺电解液在循环 伏安聚合过程中吸光度的变 化 , 根据吸光度随时的变化曲 线 , 直接观察 PAn膜在电位 扫描条件下的降解过程 ,探讨 阳极电位、 酸度以及单体浓 度对降解过程的影响 , 并与 PAn膜在空白溶液中用循环 伏安降解时氧化峰峰电流随 时间变化的曲线作了比较。
谢谢
紫外可见吸收光谱应用于宝石检测 的进展
• 通过扫描对比天然宝石和人工优化处理宝石或人工合成宝 石的紫外-可见吸收光谱,可以发现由于致色机理和致色元 素不同, 吸收光谱都有明显差异, 并可以此作为真伪鉴别的 依据。 • 以空气作空白参比,让样品光束直接照射到宝石样品上,光 度计自动比较计算两束光的强度,并转换为吸光度作为波 长函数记录下来。由于宝石样品大多具有一定的厚度,透 明度较差,且有些已经镶嵌在不透明物品上, 使得光束不能 透过, 从而大大限制了紫外-可见吸收光谱的应用范围。 一般多用于宝石磨片后的有损检测,作为科学研究使用。
紫外－可见光谱法
基于物质对200-800nm光谱区辐射的吸收特性 而建立起来的分析测定方法称为紫外-可见吸收光 谱法或紫外-可见分光光度法。它属于分子光谱法， 是由于分子内电子跃迁而产生的光谱。 特点：1）灵敏度高 2）准确度较高
3）仪器价格较低，操作简便、快速
4）应用范围广
紫外－可见光谱法的基本原理
最大吸收峰
肩峰 次峰
末端吸收 波谷 λ max λ min λ /nm
分子轨道：成键轨道－反键轨道。 当外层电子吸收紫外或可见辐射 后，就从基态向激发态（反键轨 道）跃迁。主要涉及两种类型的
*
*
E
K E,B
R
电子跃迁：1）成键轨道和反键轨
道间的跃迁； 2)非键电子激发到 反键轨道的跃迁。这四种跃迁所 需能量ΔE 大小顺序为：
(2) 近紫外光区: 200～400nm (3) 可见光区: 400～800nm
250 3 300 350 λ 400nm
在紫外可见吸收光谱中常以吸收谱带最大吸收位置波长 λmax和该波长下的摩尔吸光系数εmax来表示化合物的吸收
特征。紫外可见吸收光谱反应了物质在不同波长光的吸收能
力。吸收带的形状，λmax和εmax与吸光分子的结构有密切 的关系。
紫外2可见吸收光谱法研究细胞色素 C 活性中心铁离子与微量元素的相互作用
• 应用紫外2可见吸收光谱法研究 细胞色素C(Fecyt2C)活性中心 铁离子在pH 711 的磷酸缓冲液 中与4种微量元素 M( Ⅱ)的直接 相互作用。结果表明 ,细胞色素 C( Fecyt2C)活性中心 Fe ( Ⅱ) 离子可被微量元素 M( Ⅱ)部分 取代 ,形成部分的细胞色素 C衍 生物(Mcyt2C) ,溶液的吸收光谱 的 Soret 带最大吸收峰发生蓝 移 ,且α带与β带最大吸收峰相对 峰强减弱。