【CN110106247A】质控品及其制备方法、试剂盒及检测胎儿21和18三体综合征的方法【专利】

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利申请

(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910222905.6

(22)申请日 2019.03.22

(71)申请人 朱琦

地址 215000 江苏省苏州市姑苏区西中市

100号2幢301室

(72)发明人 林文楚　朱琦　偶健　

(74)专利代理机构 苏州谨和知识产权代理事务

所(特殊普通合伙) 32295

代理人 叶栋

(51)Int.Cl.

C12Q 1/6883(2018.01)

C12Q 1/6806(2018.01)

C12Q 1/6851(2018.01)

(54)发明名称

质控品及其制备方法、试剂盒及检测胎儿21

和18三体综合征的方法

(57)摘要

本发明涉及一种质控品及其制备方法、试剂

盒及检测胎儿21和18三体综合征的方法，其使用

具有单分子检测灵敏度和绝对定量能力的数字

PCR技术，开发了一种简单有效的染色体非整倍

体的无创产前检测新方法。使用孕妇外周血，能

够对一个样本在约5小时完成无创产前检测。使

基于数字PCR的无创产前检测技术能实现准确、

快速、简便的产前筛查。且该检测试剂盒准确性

达到99％，成本仅需NIPT技术的1/5，检测时间5

个小时。权利要求书2页 说明书10页CN 110106247 A 2019.08.09

C N 110106247

A

权　利　要　求　书1/2页CN 110106247 A

1.一种质控品，其特征在于，所述质控品为用于检测胎儿21和18三体综合征的试剂盒的质控品，所述质控品含有阳性类参照品、阴性类参照品和检测限类参照品；

所述阳性类参照品包括由P21溶液和P18溶液组成的成套参考品，所述P21含有片段化的T21三体阳性细胞株系DNA溶液和正常未孕女性的离体血浆DNA溶液，所述P18溶液含有片段化的T18三体阳性细胞株系DNA溶液分别和正常未孕女性的离体血浆DNA溶液；

所述阴性类参照品包括由片段化的T13三体阳性细胞株系DNA溶液与正常未孕女性的离体血浆DNA溶液所混合组成的混合液，即NT13溶液；

所述检测限类参照品包括由PL21溶液和PL18溶液组成的成套参考品，所述PL21溶液含有所述片段化的T21三体阳性细胞株系DNA溶液和正常未孕女性的离体血浆DNA溶液，所述PL18溶液含有所述片段化的T18三体阳性细胞株系DNA溶液和正常未孕女性的离体血浆DNA 溶液。

2.如权利要求1所述的质控品，其特征在于，在所述P21溶液中，所述片段化的T21三体阳性细胞株系DNA溶液的含量为10～20％wt；在所述P18溶液中，所述片段化的T18三体阳性细胞株系DNA溶液的含量为10～20％wtt；在所述NT13溶液中，所述片段化的T13三体阳性细胞株系DNA溶液的含量为15％wt；在所述PL21溶液中，所述片段化的T21三体阳性细胞株系DNA溶液的含量为3～5％w；在所述PL18溶液中，所述片段化的T18三体阳性细胞株系DNA溶液的含量为3～5％w。

3.如权利要求2所述的质控品，其特征在于，所述PL21溶液包括PL21-1溶液和PL21-2溶液，所述PL21-1溶液中，所述片段化的T21三体阳性细胞株系DNA溶液的含量为3％wt，所述PL21-2溶液中，所述片段化的T21三体阳性细胞株系DNA溶液的含量为5％wt；所述PL18溶液包括PL18-1溶液和PL18-2溶液，所述PL18-1溶液中，所述片段化的T18三体阳性细胞株系DNA溶液的含量为3％wt，所述PL18-2溶液中，所述片段化的T18三体阳性细胞株系DNA溶液的含量为5％w。

4.如权利要求1至3中任一项所述的质控品，其特征在于，所述阳性类参照品、阴性类参照品和检测限类参照品中，所有DNA片段的大小为140～200bp。

5.一种制备如权利要求1至4中任一项所述的质控品的方法，其特征在于，包括以下步骤：

所述阳性类参照品的制备：

1)P21的制备

提取T21三体阳性细胞株系的细胞基因组DNA，超声打断，获得与母体血浆提取DNA以及母体血浆中胎儿游离DNA大小接近的片段化的T21三体阳性细胞株系DNA溶液，将所述片段化的T21三体阳性细胞株系DNA溶液与正常未孕女性的离体血浆DNA溶液混合得到所述P21溶液，其中，所述片段化的T21三体阳性细胞株系DNA溶液的含量为10～20％wt；

2)P18的制备

提取T18三体阳性细胞株系的细胞基因组DNA，超声打断，获得与母体血浆提取DNA以及母体血浆中胎儿游离DNA大小接近的片段化的T18三体阳性细胞株系DNA溶液，将所述片段化的T18三体阳性细胞株系DNA溶液与正常未孕女性的离体血浆DNA溶液混合得到所述P18溶液，其中，所述片段化的T18三体阳性细胞株系DNA溶液的含量为10～20％wt 所述阴性类参照品的制备：

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