水溶性偶氮苯化合物的合成及表征

水溶性偶氮苯的合成及表征

王洋

（大连民族学院生命科学学院，辽宁大连 116600）

摘要：肽/蛋白构象的光控制可以是一个强大的工具，用来探索在一系列的生化系统中蛋白质的功能。发色团,如偶氮苯,进行可逆的顺-反式光异构化,原则上可用于蛋白质和其他生物分子的可逆构象控制。以前,我们报道一种可逆控制螺旋稳定的手段,涉及组成的光敏异构化偶氮苯交联试剂为一个工程肽系统。

关键词：水溶性偶氮苯，合成，表征

我们设计并合成了一种水溶性、磺化版本的基础偶氮苯硫醇反应交联剂这种物质可导入多肽和蛋白质并可作为一个构象的光电开关。在一个模型肽螺旋系统中磺化物显示产生了构象控制的相似度,作为其磺酸盐类配对物,却可以不需要任何有机助溶剂。光控制可以应用于偶氮苯的磺化交联剂从而扩大蛋白质的范围。

1 材料与方法

1.1仪器与试剂

DF-101S集热式恒温磁力搅拌器（河南巩义市英峪予华仪器厂）；

SHZ-D(Ⅲ)循环水式真空泵（河南巩义市英峪予华仪器厂）；

DHG-9070型电热恒温鼓风干燥箱（上海精宏实验设备厂）；

HR-200电子天平（OHAUS Adventurer）；

Mercury Vx 300核磁共振仪（300HZ）；

IWAKI ASAHI REN-1旋转蒸发仪。

试剂均为市售的化学纯或分析纯。

1.2

（1）2-乙酰氨基-5-氨基苯磺酸的合成（3）

在10ml圆底烧瓶中，将1.294g（6.88mmol）的2,5-二氨基苯磺酸（2）溶于10ml冰醋酸中加热至94℃，将0.8ml（超过1.23mmol）的醋酸酐逐滴加入几分钟，混合物回流搅拌2h。冷却后，过滤产品，用热醋酸和乙醚洗涤，再进行真空干燥。固体用热乙醇重结晶，过滤可得580mg浅紫色固体。

（2）Synthesis of Sodium 3,3'-Bis(sulfonato)-4,4'-bis-(acetamido)azobenzene (4).

3.3-二磺酸钠-

4.4-乙酰氨基联苯胺

在50ml圆底烧瓶中，将1.725g（7mmol）得到（3）溶于18ml的二次重蒸水中，用碳酸钠调节PH值到8-9（溶液变成棕黑色）。溶液在冰盐浴中冷却到-5℃，滴加氯酸钠19ml超过6分钟。反应溶液在0℃下搅拌2h，并在4℃下放置2-3天。橙黄色沉淀析出，用热乙醇洗涤得到橙色固体130mg的（4）

（3）Synthesis of Sodium 3,3'-Bis(sulfonato)-4,4'-bis-(amino)azobenzene (5).

在25ml圆底烧瓶中，加0.55ml浓盐酸和2.75ml水于15mg（0.033mmol）的（4）中。回流搅拌2.5小时然后冷却至室温结晶析出粉色固体。用8ml水重结晶，并用氢氧化钠将PH值调节到8.5。真空干燥得到红棕色固体16.2mg的（5）。

（4）Synthesis of 3,3'-Bis(sulfo)-4,4'-bis(chloroacetamido)azobenzene (6).

化合物5（82.3mg）氯乙酸（528mg，24当量）和氯乙酸酐（946mg，24当量）被混合在5ml 圆底烧瓶中。固体混合物加热到87°C(即,高于其熔化温度),在此温度下搅拌7.5 h。

冷却至室温，用二氯甲烷洗，真空干燥得110mg的（6）

2 结果与讨论

2.1核磁共振波谱分析