生化基础知识比色法
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
吸光度定义： A lg T lg t lg 0
I0 It
11
T、A与颜色的关系
－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－
透光率（T）
吸光度（A）
－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－
1
0.000
0.75
0.125
0.5
0.301
0.25
0.602
0.17
0.770
0.1
1.？000
0.05
8
☺ 现在知道她的秘密了吗？
9
脑筋急转弯 1、红光照射红色溶液，看透过什么色？
2、红光照射绿色溶液，看透过什么色？
10
透光度 （透射比）Transmittance
透光度定义：
T
It I0
全部吸收 T = 0.0 % 全部透过 T = 100.0 %
T 取值为0.0 % ~ 100.0
I I %
19
➢比色定量——与标准浓度物质溶液比较
20
目视比色法
观察方向
空白
c1
c2
c3
c4
21
比色计或分光光度计
22
比色法成立的基础
A. 有色或有吸收 B. 单色光
23
比色法
郎伯-比尔定律
物质的选择性光吸收
光
美丽的大自然
24
比色法原理
(分光光度法)
1
多么美丽五彩斑斓的春天啊
2
为什么上述溶液呈现不同的颜色？
3
➢ 自然光-赤橙黄绿青蓝紫
4
➢ 波长决定颜色
5
➢ 光谱-连续不同波长光的集合
6
➢来自百度文库物质对不同波长光的选择性吸收
7
☺ 由于物质对不同波长光的选择性吸收而引
起，物质呈现的是被吸收颜色的互补色。
单色光 互补光 复色光
1.301
0.01
2.000
0.001
3.000
－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－
12
➢ 测量物质光吸收的装置-比色计
13
比色计或分光光 度计
14
➢ 物质的光吸收曲线-定性分 析
15
➢ 吸光度与光径的关系
16
➢ 吸光度与浓度的关系
17
朗伯-比尔定律： A=-lgT=KCL
18
✓ 透光度（transmittance，T，透射率）
✓
T＝It / I0
✓ 吸光度（absorbance，A）
✓ 光密度（optical density，D或OD）
✓
A ＝-lgT ＝ lg I0/It
✓ Lamb-beer定律：A＝KCL ✓ K为吸光系数，C为浓度，L为光径cm
✓ 摩尔吸光系数ε:当C＝1mol/L，L＝1cm，A= ε
I0 It
11
T、A与颜色的关系
－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－
透光率（T）
吸光度（A）
－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－
1
0.000
0.75
0.125
0.5
0.301
0.25
0.602
0.17
0.770
0.1
1.？000
0.05
8
☺ 现在知道她的秘密了吗？
9
脑筋急转弯 1、红光照射红色溶液，看透过什么色？
2、红光照射绿色溶液，看透过什么色？
10
透光度 （透射比）Transmittance
透光度定义：
T
It I0
全部吸收 T = 0.0 % 全部透过 T = 100.0 %
T 取值为0.0 % ~ 100.0
I I %
19
➢比色定量——与标准浓度物质溶液比较
20
目视比色法
观察方向
空白
c1
c2
c3
c4
21
比色计或分光光度计
22
比色法成立的基础
A. 有色或有吸收 B. 单色光
23
比色法
郎伯-比尔定律
物质的选择性光吸收
光
美丽的大自然
24
比色法原理
(分光光度法)
1
多么美丽五彩斑斓的春天啊
2
为什么上述溶液呈现不同的颜色？
3
➢ 自然光-赤橙黄绿青蓝紫
4
➢ 波长决定颜色
5
➢ 光谱-连续不同波长光的集合
6
➢来自百度文库物质对不同波长光的选择性吸收
7
☺ 由于物质对不同波长光的选择性吸收而引
起，物质呈现的是被吸收颜色的互补色。
单色光 互补光 复色光
1.301
0.01
2.000
0.001
3.000
－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－
12
➢ 测量物质光吸收的装置-比色计
13
比色计或分光光 度计
14
➢ 物质的光吸收曲线-定性分 析
15
➢ 吸光度与光径的关系
16
➢ 吸光度与浓度的关系
17
朗伯-比尔定律： A=-lgT=KCL
18
✓ 透光度（transmittance，T，透射率）
✓
T＝It / I0
✓ 吸光度（absorbance，A）
✓ 光密度（optical density，D或OD）
✓
A ＝-lgT ＝ lg I0/It
✓ Lamb-beer定律：A＝KCL ✓ K为吸光系数，C为浓度，L为光径cm
✓ 摩尔吸光系数ε:当C＝1mol/L，L＝1cm，A= ε