两种沙门氏菌显色培养基实际应用效果比较
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两种沙门氏菌显色培养基实际应用效果比较
【摘要】目的比较海博沙门氏菌显色培养基(第二代)和chromager沙门氏菌显色培养基的实际应用效果。
方法两两配对按照国标(gb4789.4-2010)进行检验。
结果在海博和chromager两种显色培养基上,沙门氏菌均呈现紫色菌落;通过对166份鸡蛋的检测,海博检出阳性率为8.43%,chromager检出阳性率为9.64%,二者无显著性差异;对于沙门氏菌显色培养基而言,两种培养基假阳性率一致。
结论海博沙门氏菌显色培养基(第二代)和chromager 沙门氏菌显色培养基在鸡蛋的实际检测中具有相同的检测效果。
【关键词】沙门氏菌显色培养基;实际应用;效果比较
doi:10.3969/j.issn.1004-7484(s).2013.08.739 文章编号:1004-7484(2013)-08-4721-02
沙门氏菌(salmonella lignieres)属肠杆菌科,革兰氏阴性肠道杆菌,沙门氏菌病是指由各种类型沙门氏菌所引起的对人类、家畜以及野生禽兽不同形式的总称[1]。
蛋、家禽和肉类产品是沙门氏菌病的主要传播媒介,感染主要取决于沙门氏菌的血清型和食用者的身体状况。
为有效控制沙门氏菌污染发生和扩散,准确及时的检测手段是关键。
目前沙门氏菌检测以传统方法为主,在检验中选择性平板是分离菌落最重要的培养基,但是大肠菌群等优势肠道菌在这些平板上也能生长旺盛,对挑选典型的沙门氏菌菌落增加了难度。
利用显色培养基鉴定微生物是近年来开发的新型快速检测技术,
直接根据菌落颜色就可以对菌种做出初步鉴定[2],减少干扰因素,大大提高了检测效率,目前海博沙门氏菌显色培养基(第二代)和chromager沙门氏菌显色培养基为市场上较为常见的产品。
本实验室将海博和chromager沙门氏菌显色培养基就实际应用效果进行了比较研究,现说明如下:
1 材料与方法
1.1 培养基及试剂法国科玛嘉沙门氏菌显色培养基购于郑州博赛生物科技有限公司,海博沙门氏菌显色培养基(第二代)、bpw、sc、tsi、营养琼脂、沙门氏菌生化鉴定管、a-f多价诊断血清等购于(青岛海博生物技术有限公司),法国生物梅里埃api生化试剂条购于(广东环凯微生物科技有限公司)。
1.2 主要仪器设备生物安全柜、超净工作台、恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器、电子天平、显微镜、冰箱、接种环、培养皿、三角瓶、试管、移液管、剪刀。
1.3 样品从菜市场采集鸡蛋共166份。
1.4 检验方法将鸡蛋打碎均质,以无菌操作取样品25g,加入225mlbpw,均质混匀,于36℃培养18h;移取1ml转种10mlsc中,于36℃培养24h;分别取一环增菌液接种chromager沙门氏菌显色平板和海博沙门氏菌显色平板,36℃培养24h,做革兰氏染色镜检、接种tsi和营养琼脂平板36℃培养24h;疑似菌落采用api20e生化鉴定试剂盒,结合传统生化方法鉴定后,进行血清学实验,报告结果[3]。
2 结果
2.1 同种培养基沙门氏菌生长状况比较在海博沙门氏菌显色平板上,可疑沙门氏菌菌落呈圆形、表面光滑的紫色小菌落。
在chromager沙门氏菌显色平板上,可疑沙门氏菌菌落圆形、中等大小的紫色菌落,颜色比海博沙门氏菌显色平板上长得偏紫。
2.2 两种培养基沙门氏菌阳性率比较两种培养基对样品中沙门氏菌阳性率,见表1。
2.3 两种培养基出现可疑菌落的假阳性情况比较在应用chromager沙门氏菌显色培养基和海博沙门氏菌显色培养基对166份样品的检验中,在显色培养基上出现了疑似菌落的样品而最终均鉴定为沙门氏菌的,chromager沙门氏菌显色培养基是疑似菌落19份,最终鉴定阳性份数18份,假阳性份数1份;海博沙门氏菌显色培养基是疑似菌落15份,最终鉴定阳性份数14份,假阳性份数1份,可见两种培养基检验结果中,对于沙门氏菌显色培养基疑似阳性而言,其假阳性率一致。
3 讨论
显色培养基方法的原理是使用适当的显色底物,在细菌特异性的作用下,发色基团游离于菌落上,使菌落显示一定的颜色[2]。
好的显色培养基应菌落颜色易识别、不同种微生物差别较大以及比较稳定等,显色培养基的实用性还与样品中细菌的种类和数量有关,样本中细菌的种类繁杂,非目的菌数量庞大会影响目的菌的检出,所以在显色培养基中加入一些特殊的抑菌剂,可抑制样本中杂菌的
生长而不影响目的菌的生长,从而提高检出率。
鉴于显色培养基快速、灵敏、高效等诸多优点,其作为一种新的微生物快速检测技术已经得到了广泛的认可。
在gb4789.4-2010中的,沙门氏菌显色培养基已经被作为选择性平板之一。
本研究中,两种沙门氏菌显色平板上,沙门氏菌均呈现特殊的紫色菌落,大肠杆菌和大肠菌群呈现蓝色,其他细菌呈现黄色或者无色。
从表1可以看出,对于166份实际样品,chromager沙门氏菌显色培养基和海博沙门氏菌显色培养基的检出水平一致;对于沙门氏菌显色培养基的疑似假阳性率而言,其假阳性率一致。
根据gb4789.4-2010培养基使用方法,可以使用chromager沙门氏菌显色培养基或海博沙门氏菌显色培养基作为沙门氏菌检验的分离培养基。
参考文献
[1] 郁庆福,主编.现代卫生微生物学[m].北京:人民卫生出版社,1995.
[2] 农生洲.微生物病原体快速检测技术进展[j].am tholgy of medicine,2001,20:520-522.
[3] gb4789.4-2010.食品安全国家标准食品微生物学检验-沙门氏菌检验[s].北京:中国标准出版社,2010:5-1.。