食品安全快速检测技术--农药残留检测专题

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项目二 农药残留快速检测
开机：插上电源，打 开仪器背面绿色电源 开关，仪器显示开机 画面，按画面提示操 作，按下回车键，仪 器开始自检，时间约 1min
时取100μL，4℃冰箱保存；或取1瓶底物加2.5mL蒸馏水或 纯净水溶解 ，使用时取20μL，4℃冰箱保存。 2.4、 胆碱酯酶：酶制剂无需配制，可直接取用，使用时取 100μL，4℃冰箱保存。
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项目二 农药残留快速检测
3、样品提取 取2g果蔬样品（块茎类取4g)，叶菜剪成25px左右见方的碎
片，块茎类取横截面样品或取其表皮，放入三角瓶中，加 入10mL缓冲液，振荡1～2min ，倒出提取液，静置2min， 待测
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4、 测试 1）对照测试：2.5mL缓冲液——加入100μL酶液——显色
剂——混匀，静置10min——加入100μL（或20μL）底物 ——摇匀，立即倒入比色杯中。 及时放入仪器的测量室第1通道，合上盖。按〈B〉键，显 示屏下方延迟10s后，测量时间开始倒计时，计时完毕，显 示屏显示吸光度增量(ΔC)及抑制率。在进行对照测试时， 2～8通道可同时进行样品测试。
食品安全快速检测技术及应用
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项目二 农药残留快速检测 回顾上节课内容 1.样品制备 2.农药、农药残留的概念
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酶抑制率法
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注意事项
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项目二 农药残留快速检测
实验二、蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检 测GB/T 5009.199-2003 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测
自检完毕后，仪器进 入待机检测状态
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2、试剂配制 2.1、缓冲液：取1包缓冲剂加入500mL蒸馏水或纯净水中，搅
拌溶解制成磷酸缓冲液（pH7.6）, 常温保存。 2.2、显色剂：取1瓶显色剂加25mL缓冲液溶解，使用时取
100μL，4℃冰箱保存。 2.3、底 物：取1瓶底物加12.5mL蒸馏水或纯净水溶解，使用
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4、 测试 2）样品测试：2.5mL待测液——加入100μL酶液和显色剂
，混匀——静置10min——加入100μL（或20μL）底物， 摇匀并立即倒入比色杯中。 及时放入仪器的测量室通道，合上盖。按〈M〉键，显示屏 下方延迟10s后，测量时间开始倒计时，计时完毕，显示屏 显示吸光度增量（ΔS)及抑制率。数据自动保存，如有需 要按〈P〉键打印
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实验 试剂
• 固化有胆碱脂酶和 靛酚乙酸脂试纸卡
• 磷酸盐缓冲液 • 快速检测仪
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快速检测试纸法
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四、速测卡测定农药残留的主要步骤 1）整体测定法 ① 剪成1cm碎片，取5g放入带盖瓶，加入10ml缓冲液，振摇50
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次，静置2min。 ② 取1片速测片，用白色药品蘸取提取液，放置10min以上进
行预反应 ③ 速测卡对折，用手捏3min或用恒温3min，使红色药片与白
色药片叠合反应，每批设定一个空白
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四.速测卡测定农药残留的主要步骤 2）表面测定法（粗筛法） ① 滴2-3滴缓冲液溶液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液处轻
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说明
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知识扩展1
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第二法： 酶抑制率分光光度法
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一、实验目的： 学习快速卡法测定有机磷农 残快速检验 法及熟悉检验结果评定
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实 验
原 理
• 胆碱脂酶可催化靛酚乙酸脂 （红色）水解为乙酸与靛酚 （蓝色），有机磷或氨基甲酸 脂类农药对胆碱脂酶有抑制作 用，使催化、水解、变色的过 程发生改变，由此可判断出样 品中是否有高剂量有机磷或氨 基甲酸脂类农药的存在
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六、
1、结果判断 结果以酶被有机磷或氨基甲酸脂类农药抑 （为阳性）、未抑制（阴性）表示。
与空白对照卡比较：白色药片不变色或略有浅蓝色均为阳 性结果。白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同为阴性 结果。

。
2、样品检测结果记录并对检测结果进行评价。
轻摩擦 ② 取1片速测卡，将蔬菜上的液滴滴在白色药片上 ③ 放置10min以上，进行预反应 ④ 将速测卡对折，用手捏3min或用恒温装置恒温3min，使红
色药片与白色药片叠合反应。 ⑤ 每批测定设一个空白对照
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请注意
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项目二 农药残留快速检测
五、速测卡测定农药残留的注意事项 1）空白对照 2）次生物质 3）预反应温度 4）反应时间 5）滴加溶液的数量 6）预反应时间一致 7）观察结果时间1min