离体家兔肠肌运动

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离体家兔肠肌运动

一、实验摘要

1.目的:观察乙酰胆碱、肾上腺素、NaOH 、HCl对肠道平滑肌收缩运动

的影响并探究其原理和机制。

2.方法:分别给予离体家兔肠肌标本乙酰胆碱、肾上腺素、NaOH 、HCl

刺激,完成每次刺激并出现明显现象后用37℃台氏液冲洗肠肌标本,

并用生物信号采集处理系统记录其在不同因素作用下的张力曲线,观

察其张力活动的特点并记录。

3.结果:实验结果显示当滴加乙酰胆碱、NaOH刺激离体肠肌时,张力曲

线明显上升,且频率加快,当用肾上腺素、HCl条件刺激离体肠肌时,

张力曲线则下降,且频率减慢。

4.结论:乙酰胆碱和NaOH可增强离体肠肌的运动,肾上腺素和HCl可

抑制离体肠肌的运动。

二、关键词:肠肌、张力、肾上腺素、乙酰胆碱

三、引言:消化道平滑肌与骨骼肌、心肌一样具有肌肉组织共有的特性,消化道细胞间的缝隙连接可使电信号在细胞间传递,如兴奋性、传导性和收缩性等。给予离体肠肌以接近在体情况的适宜环境,消化道平滑肌仍可保持良好的生理特性。离体肠段虽然失去外来神经的支配,但肠壁神经丛仍存在,在适宜的条件下,仍能保持平滑肌收缩的特性及肠壁神经丛的作用。本次实验在肠段表面依次给予乙酰胆碱、肾上腺素、NaOH、HCl的因素刺激,观察、记录其对小肠收缩情况的影响。

四、材料和方法

1.实验对象:家兔的十二指肠段

2.实验仪器:麦氏浴槽、超级恒温箱、张力换能器、生物信号采集处理

系统电脑、生物信号采集处理系统、木槌、手术器械

3.实验药品和试剂:乙酰胆碱、肾上腺素、NaOH、HCl、台氏液

4.实验方法:

1)在麦氏浴槽中加15ml台氏液,调节超级恒温箱的温度,使麦氏

浴槽内温度稳定在37℃。通气管连接95%O2+5%CO2混合气体通道,

用螺旋夹调节气体管道的气体流量,调节至浴槽中有气泡出来。

2)RM6240系统:点击“实验”菜单中的“肠肌记录”,仪器参数:

通道时间常数为直流,滤波频率10HZ,灵敏度3g,采样频率200HZ,

扫描述度1s/div。

3)MedLab系统:点击“实验”菜单中的“肠肌收缩记录”,仪器参

数:通道放大倍数200-500,通道时间常数为直流,采样间隔5ms。

4)取家兔一只,用木槌击其头部至晕,立即剖开腹腔,取出十二指

肠台氏液中,用注射器取台氏液将肠内容物冲洗干净,然后将十

二指肠剪成1~2cm数小段。取一段十二指肠的置于盛有台氏液手

术盘中,在其两端对角处,分别用缝针穿线打好结,再在其中一

端的打结时留一个圈。

5)在充满台式液的37℃麦氏浴槽中,将十二指肠肠管一端的弄好的

圈套于浴槽中的固定钩上,将另一端连接在张力换能器的悬梁壁

上。

6)实验观察:

①离体回肠在麦氏浴槽中稳定一段时间后,记录一段正常张力曲

线后,加入乙酰胆碱2~4滴,观察并记录其张力曲线并用程序添加Ach 的标签。待张力曲线稳定后,用台式液冲洗2遍(即打开下面的止水夹),直至张力恢复到正常的水平。

②继续记录一段正常水平的张力曲线,加入2~4滴肾上腺素溶液,

观察并记录其张力曲线并用程序添加E的标签。待张力曲线稳定后,用台式液冲洗2遍,直至张力恢复到正常的水平。

③继续记录一段正常水平的张力曲线,滴加2~4滴NaOH溶液,观

察并记录其张力曲线。待张力曲线稳定后,用台式液冲洗2遍,直至张力恢复到正常的水平。

④继续记录一段正常水平的张力曲线, 滴加2~4滴HCl溶液,观

察并记录其张力曲线并用程序添加HCl的标签。待张力曲线稳定后,用台式液冲洗2遍,直至张力恢复到正常的水平。

7)利用电脑中的图画和word软件来整理获取的张力曲线,得到比较

直观的图像获得实验的结果。

五、实验结果

1.在正常情况下离体肠肌张力曲线较稳定,没有明显的变化。

2.加入乙酰胆碱后,离体肠肌张力曲线上升,幅度增大大,频率加快。

3.加入肾上腺素后,离体肠肌张力曲线下降,幅度减小,频率变慢。

4.加入NaON后,肠段张力曲线上升,振幅增大,频率加快。

5.加入HCl后,肠段张力曲线下降,振幅减小,频率变慢。

六、实验讨论

1.在恒温通气的情况下,离体小肠平滑肌能自发地有节律地进行收缩,其

收缩的幅度、频率、张力、时间及间隔都相对稳定,波形没有明显的变化。

2.加入乙酰胆碱(ACh)可明显兴奋胃肠道平滑肌,使其收缩幅度、张力、

蠕动增加。其作用机理如下:Ach 作用于回肠M受体,使得平滑肌Ca2+通道开放,Ca2+内流,Ca2+胞浆浓度增加,平滑肌收缩加快加强,表现为收缩力变大,频率增强。

3.加入肾上腺素,肾上腺素是肾上腺髓质的主要激素,外源性肾上腺素能

和肠道平滑肌上的肾上腺素能受体(α受体和β受体)结合,α受体又分为α抑制型受体和α兴奋型受体有关。肾上腺素作用于α抑制型受体,引起肠肌膜上一种特异性受体活化,使K+外流增多,细胞膜发生超极化,肠肌兴奋性降低,肌张力下降。同时,肾上腺素还作用于β受体,它能激活引起肠肌细胞膜中的CAMP合成增多,CAMP激活肠肌膜及肌浆网上Ca2+泵活动,使肌浆中Ca2+浓度降低,亦使肌张力降低;β受体激活后还促使K+及Ca2+外流增加,加速膜的超极化,促进了肠肌肌张力的减低。故加入肾上腺素后,可见离体肠管活动减弱,收缩频率变慢,幅度减小。

4.滴加氢氧化钠溶液,NaOH为碱性成分,正常机体胃肠内有胰腺小导管细

胞分泌的HCO3—可起到中和胃酸的作用,使小肠液pH值升高,甚至偏碱性,有利于小肠内各种酶发挥作用,所以肠管活动增强。但要注意适当的PH值收缩效果最好,PH值过高或过低,收缩幅度及张力都会降低。

5.滴加盐酸溶液后,由于细胞外H+浓度升高,Ca2+通道的活性受到抑制,

使得Ca2+内流减少,兴奋性下降;H+升高亦能干扰肌肉的代谢和肌丝滑行的生化过程:H+能与Ca2+竞争钙调蛋白的结合位点而使肌球蛋白ATP 酶活性降低,使肌原纤维对Ca2+的敏感性和 Ca2+从肌质网的释放量减少。故加人盐酸溶液后,离体肠管活动减弱,描记曲线出现收缩幅度降低,频率变慢。

七、实验结论:

一定浓度乙酰胆碱、NaOH 可促进肠肌的运动;一定浓度的肾上腺素、HCl 可以抑制肠肌的运动。

参考文献:

[1]陆源、林国华、杨午鸣主编《机能学实验教程》朱大年、王庭槐第8版《生理学》

[2]朱大年、王庭槐第8版《生理学》

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