丝氨酸蛋白酶抑制剂的研究进展教学提纲

家蚕丝腺特异高量表达丝氨酸蛋白酶抑制剂的研究的开题报告

家蚕丝腺特异高量表达丝氨酸蛋白酶抑制剂的研究的开题报告题目：家蚕丝腺特异高量表达丝氨酸蛋白酶抑制剂的研究研究背景：家蚕丝腺是家蚕产丝的重要器官，其中包含大量的丝素蛋白，需要通过蛋白酶的作用来将其加工成丝素纤维，在丝腺中引入大量的蛋白酶会加速丝素蛋白被加工成纤维的速度，从而提高丝的生产率。

然而，也存在一些丝素蛋白在蛋白酶的作用下被加工成不利于纺丝的短纤维，降低丝的质量和产量。

因此，研究对丝素蛋白加工具有抑制作用的蛋白酶抑制剂，对提高丝的质量和产量具有重要意义。

研究内容：本研究拟通过家蚕丝腺特异高量表达丝氨酸蛋白酶抑制剂的方式，探究其对蛋白酶加工丝素蛋白的影响。

具体研究内容包括：1. 设计丝氨酸蛋白酶抑制剂的序列，并在家蚕丝腺中进行高量表达。

2. 制备家蚕丝腺摘取液及其制备的酵素体系，通过酵素活性分析，探究丝氨酸蛋白酶抑制剂对蛋白酶活性的抑制作用。

3. 制备丝素蛋白，研究丝氨酸蛋白酶抑制剂对其加工成纤维的影响。

研究意义：本研究将通过表达丝氨酸蛋白酶抑制剂的方式，探究其对家蚕丝腺中蛋白酶加工丝素蛋白的影响，进一步了解丝素蛋白产量和质量的关系，为提高丝的质量和产量提供理论基础。

参考文献：1. Craig, C. L., Singh, S., & Tomer, K. B. (2009). Silk fibroin nanoparticle as a potential oral drug delivery vehicle. Nanotechnology Reviews, 2(1), 37-45.2. Kundu, B., Rajkhowa, R., Kundu, S. C., & Wang, X. (2013). Silk fibroin biomaterials for tissue regenerations. Advanced drug delivery reviews, 65(4), 457-470.3. Zhang, Y., Omenetto, F. G., Kaplan, D. L., Audi, J., & Galant, N. J. (2012). Sericin-derived proteinaceous films and capsules. Biomacromolecules, 13(11), 3618-3628.。

猪带绦虫丝氨酸蛋白酶抑制剂Ts-serpin-1对人巨噬细胞THP-1的免疫调节功能研究

中国兽医科学2021,51(02〉： 161-168Chinese Veterinary Science网络首发时间：2020-12-ll D01：10.16656/j.issn.l673-4696.2021.0024 中图分类号：S852.734 文献标志码：A文章编号：1673_4696(2021)02-016卜08猪带纟条虫丝氨酸蛋白酶抑制剂Ts-serpin-1对人巨噬细胞THP-1的免疫调节功能研究毕研丽\刘仲蓉'郭爱疆\张少华、王帅”，才学鹏(1.中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室，甘肃兰州730046;2.甘肃农业大学动物医学院，甘肃兰州730070;3.中国兽医药品监察所，北京100081)摘要：主要研究猪带绦虫丝氨酸蛋白酶抑制剂Ts-serpin-l(WormBase:TsM_000065700)对宿主THP-1 细胞的免疫调节作用通过设计特异性引物和RT-PCR扩增技术，获得Ts-serpin-1编码序列，用qRT-PCR 分析Ts-serpin-l基因在猜带線虫成虫和中綠期幼虫的表达情况；构建pCold-Ts-serpin-1原核表达栽体，诱导表达纯化重组蛋白Ts-serpin-1;用重组蛋白Ts-serpin-1处理THP-1细胞，采用qRT-PCR和ELISA方法检测Ts-serpin-1处理THP-1细胞后，各炎性细胞因子的变化情况，结果显示：获得的Ts-serpin-1目的基因长度为1149匕口，编码382个氨基酸，含有56卬丨11家族特有的反应中心环。

7^-36叩丨11-1基因在猪带绦虫成虫和中绦期幼虫均表达，且成虫表达量显著高于幼虫。

重组蛋白Ts-serpin-1的分子质量约为43 ku,可抑制THP-1细胞促炎性细胞因子IL-6、IL-10、IL- 12、TNF-a、丨FN-y和iNOS2的表达，促进抗炎性细胞因子 1L-10和TGF-y3的分泌表达。

丝氨酸蛋白酶抑制剂vaspin与炎症反应关系的研究进展

丝氨酸蛋白酶抑制剂vaspin与炎症反应关系的研究进展程应湘，马晓冬，刘晓田，郑永锋，邵东华江苏大学附属人民医院，江苏镇江212002摘要：丝氨酸蛋白酶抑制剂vaspin是近年发现的一种脂肪因子，主要由脂肪组织产生，能够调控机体的炎症反应、糖脂代谢和胰岛素抵抗等。

vaspin通过调节多种信号通路参与炎症反应并调控炎症因子的表达，并与动脉粥样硬化、2型糖尿病、银屑病等疾病的发生发展密切相关。

当机体患有动脉粥样硬化或糖尿病心肌病等疾病时，外源性vaspin减少炎症因子释放，减轻炎症反应，延缓疾病的进展。

深入了解vaspin及其介导的与炎症相关通路，分析vaspin与炎症反应的关系，有助于为临床治疗提供新的方向。

关键词：vaspin；丝氨酸蛋白酶抑制剂；炎症反应；信号通路；动脉粥样硬化；2型糖尿病；银屑病doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2021.02.027中图分类号：R364.5文献标志码：A文章编号：1002-266X（2021）02-0103-04脂肪组织不仅可以储存能量，也能分泌瘦素、内脂素、脂联素和网膜素等细胞因子。

研究表明，脂肪细胞因子在糖脂代谢、心血管功能和炎症等方面发挥重要作用。

起源于内脏脂肪组织的丝氨酸蛋白酶抑制剂（vaspin）是一种新型脂肪细胞因子，在人脂肪组织、肝脏、胃、胰腺、皮肤及小鼠棕色脂肪组织均有表达［1-3］。

vaspin属于丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族成员，具有潜在抗蛋白酶特性，可改善高脂食物喂养大鼠的胰岛素敏感性［4］。

研究发现，vaspin不仅与糖代谢异常有关，也与动脉粥样硬化（AS）、2型糖尿病、银屑病等炎症相关疾病的发生发展有关。

现将vaspin与炎症反应的研究进展综述如下。

1vaspin对炎症相关信号通路的调控作用vaspin的抗炎作用与多种信号通路有关，各个通路之间相互联系，共同调控机体炎症反应及细胞凋亡等反应。

1.1调控丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路MAPK信号通路存在于大多数细胞内，能将胞外信号传至胞内，调控炎症反应的多个方面，包括细胞黏附、脱颗粒、趋化以及免疫相关细胞因子的释放等。

丝氨酸蛋白酶抑制剂的研究进展

丝氨酸蛋白酶抑制剂的研究进展梁化亮（生物与食品工程学院，江苏常熟 215500）Progress on antimicrobial peptide[摘要]蛋白酶抑制剂（PIs）是一类能抑制蛋白酶水解酶的催化活性的蛋白或多肽，广泛存在于生物体内，在许多生命活动过程中发挥必不可少的作用。

根据活性位点氨基酸种类不同可将蛋白酶抑制剂分为四大类型:丝氨酸蛋白酶抑制剂、巯基蛋白酶抑制剂、天冬氨酸蛋白酶抑制剂和金属蛋白酶抑制剂。

其中尤以丝氨酸蛋白酶及其抑制剂在体内一些重要生理活动中起关键性的调控作用。

其能对蛋白酶活性进行精确调控，包括分子间蛋白降解，转录，细胞周期，细胞侵入，血液凝固，细胞凋亡，纤维蛋白溶解作用，补体激活中所起的作用。

[关键词]丝氨酸蛋白酶抑制剂分类临床应用防御1 丝氨酸蛋白酶抑制剂免疫系统是由组织，细胞，效应分子构成，并逐渐进化形成用于阻挠病原微生物的侵入攻击，限制它们扩散进入宿主内环境。

这其中起到主要作用的是宿主产生的蛋白酶抑制剂，广泛存在于生物体内的蛋白酶抑制剂在机体内与相应的蛋白酶形成一个动态的系统，在生物体系以及一系列的生理过程中起着调控作用[1]，是生物体内免疫系统的重要组成部分。

它不仅能使侵入体内的蛋白酶失活并且能将其清除，使附着在宿主表面的病原细菌无法附着生存。

其中丝氨酸蛋白酶及其抑制剂在体内一些重要生理活动中起关键性的调控作用[2]。

丝氨酸蛋白酶抑制剂（serine protease inhibitor）泛指具有抑制丝氨酸蛋白酶水解活性的一类物质，广泛存在于动物、植物、微生物体中[3]。

在动物体中，丝氨酸蛋白酶抑制剂是维持体内环境稳定的重要因素，一旦平衡失调即导致多种疾病，任何影响其活性的因素也会造成严重的病理性疾病。

它们最基本的功能是防止不必要的蛋白水解，调节丝氨酸蛋白酶的水解平衡。

作为调控物，丝氨酸蛋白酶抑制剂参与机体免疫反应，对生物体内的血液凝固、补体形成、纤溶、蛋白质折叠、细胞迁移、细胞分化、细胞基质重建、激素形成、激素转运、细胞内蛋白水解、血压调节、肿瘤抑制以及病毒或寄生虫致病性的形成等许多重要的生化反应和生理功能有重要的影响[4]。

丝氨酸蛋白酶抑制剂的研究进展

丝氨酸蛋白酶抑制剂的研究进展梁化亮（生物与食品工程学院，常熟 215500）Progress on antimicrobial peptide[摘要]蛋白酶抑制剂（PIs）是一类能抑制蛋白酶水解酶的催化活性的蛋白或多肽，广泛存在于生物体，在许多生命活动过程中发挥必不可少的作用。

根据活性位点氨基酸种类不同可将蛋白酶抑制剂分为四大类型:丝氨酸蛋白酶抑制剂、巯基蛋白酶抑制剂、天冬氨酸蛋白酶抑制剂和金属蛋白酶抑制剂。

其中尤以丝氨酸蛋白酶及其抑制剂在体一些重要生理活动中起关键性的调控作用。

其能对蛋白酶活性进行精确调控，包括分子间蛋白降解，转录，细胞周期，细胞侵入，血液凝固，细胞凋亡，纤维蛋白溶解作用，补体激活中所起的作用。

[关键词]丝氨酸蛋白酶抑制剂分类临床应用防御1 丝氨酸蛋白酶抑制剂免疫系统是由组织，细胞，效应分子构成，并逐渐进化形成用于阻挠病原微生物的侵入攻击，限制它们扩散进入宿主环境。

这其中起到主要作用的是宿主产生的蛋白酶抑制剂，广泛存在于生物体的蛋白酶抑制剂在机体与相应的蛋白酶形成一个动态的系统，在生物体系以及一系列的生理过程中起着调控作用[1]，是生物体免疫系统的重要组成部分。

它不仅能使侵入体的蛋白酶失活并且能将其清除，使附着在宿主表面的病原细菌无法附着生存。

其中丝氨酸蛋白酶及其抑制剂在体一些重要生理活动中起关键性的调控作用[2]。

丝氨酸蛋白酶抑制剂（serine protease inhibitor）泛指具有抑制丝氨酸蛋白酶水解活性的一类物质，广泛存在于动物、植物、微生物体中[3]。

在动物体中，丝氨酸蛋白酶抑制剂是维持体环境稳定的重要因素，一旦平衡失调即导致多种疾病，任何影响其活性的因素也会造成严重的病理性疾病。

它们最基本的功能是防止不必要的蛋白水解，调节丝氨酸蛋白酶的水解平衡。

作为调控物，丝氨酸蛋白酶抑制剂参与机体免疫反应，对生物体的血液凝固、补体形成、纤溶、蛋白质折叠、细胞迁移、细胞分化、细胞基质重建、激素形成、激素转运、细胞蛋白水解、血压调节、肿瘤抑制以及病毒或寄生虫致病性的形成等许多重要的生化反应和生理功能有重要的影响[4]。

顶复器门原虫丝氨酸蛋白酶抑制剂研究进展

动物医学进展，０１３（１：０ —０２１，２１）１５１７
ＰｒｒｓｎＶｅｅｉａｙＭｅｃｎｅｏｇｅｓｉｔｒｎｒｄｉｉ
顶复器门原虫丝氨酸蛋白酶抑制剂研究进展
李文超，有方，顾陈会良，光明，升和，登科，伟娜金李钟郭
个其Ｄ白质，泛存在于动物、物和微生物体内，自然形虫速殖子单倍体上只存在１拷贝，ｃＮＡ序广植是７ｐ编９界中种类最多、量最为丰富的蛋白酶抑制剂。它列长度为１３６ｂ，码一个长２４个氨基酸的蛋含通过与靶酶相互结合形成稳定的复合体，与调节参
蛋白酶抑制剂超家族的非典型Ｋａａ型蛋白家族基ｚｌ
因高度同源。其重组蛋白具有胰蛋白酶抑制活性，推测其可以使虫体免于宿主肠道蛋白酶的作用，参
与弓形虫侵入宿主细胞过程中由丝氨酸蛋白酶介导
些主要属于ＫｚｌＳｒｉ族的丝氨酸蛋白酶抑ａａ和ｅｐｎ家
白质，分子质量为３．９ｋ，Ｉ４８，１个长其０１ｕＰ为．６含
２３个氨基酸的信号肽。该蛋白质具有４个相似性的结构域，别位于３～６，１～１０１１１分０６１４５，８～２７和２７８４￣２３氨基酸残基处。４个结构域与属于丝氨酸

家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因表达及其与茧层率的相关性研究

ａｎｄｖａｒｉｅｔｉｅｓｏｆＢｏｍｂｙｘｍｏｒｉｗｅｒｅｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄｂｙＲＴ— ＰＣＲ，ＲｅａｌｔｉｍｅＰＣＲａｎｄＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ．Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ，ｔｈｅｃｏｃｏｏｎｓｈｅｌｌｒａｔｉｏｗａｓｍｅａｓｕｒｅｄ．ＩｔｗａｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔＳｐｉｌｇｅｎｅｂｅｇａｎｔｏｅｘｐｒｅｓｓ
ａｎｄＲｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｗｉｔｈＲａｔｉｌｏＯｏｆｉＣｏＯｃＣｏＯｏＯｎＳｈｅｌｌｉ。ｉｎ
Ｓｉｌｋｗｏｒｍ，Ｂｏｍｂｙｘｍｏｒｉ
ＧＡＮＬｉ — ｐｉｎｇ，ＬＩＵＲｅｎ — ｈｕａ，ＬＯＮＧＦｅｉ — ｆｅｉ。，ＺＨＡＮＧＪｉｎ。，ＳＩＭＡＹａｎｇ — ｈｕ，ＸＵＳｈｉ — ｑｉｎｇ
菲，张进，司马杨虎，徐世清。甘丽萍，刘仁华，龙菲
（１．重庆三峡学院生命科学与工程学院，重庆万州４０４１００；２．苏州大学现代丝绸国家工程实验室，江苏苏州２１５１２３）
ｔｏｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｏｆｓｉｌｋｓｙｎｔｈｅｓｉｓｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｍａｌｅａｎｄｆｅｍａｌｅｏｆＢｏｍｂｙｘｍｏｒｉ，ｔｈｅｍＲＮＡａｎｄｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆｓｅｒｉｎｅｐｒｏｔｅａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｇｅｎｅｉｎｌａｒｖａｅｓｉｌｋｇｌａｎｄｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｇｅｎｄｅｒｓ

蛋白酶抑制剂的设计及应用研究进展

Part Five
蛋白酶抑制剂的挑战与展望
克服耐药性问题
耐药性的危害：影响治疗效果，增加治疗成本
耐药性产生的原因：基因突变、药物滥用等
克服耐药性的方法：研发新型蛋白酶抑制剂，提高药物
选择性，联合用药等
展望：未来蛋白酶抑制剂的发展方向，如靶向治疗、个
性化治疗等
提高选择性及特异性
设计策略：优化分子结构，提高与靶标蛋白的结
抑制肿瘤细胞生长：通过抑制蛋白酶活性，阻止肿瘤细胞增殖诱导肿瘤细胞凋亡：通过抑制蛋白酶活性，诱导肿瘤细胞凋亡抑制肿瘤细胞转移：通过抑制蛋白酶活性，阻止肿瘤细胞转移提高化疗效果：通过抑制蛋白酶活性，提高化疗药物的疗效
在抗炎方面的应用
蛋白酶抑制剂在抗炎方面的作用机制
蛋白酶抑制剂在抗炎药物中的作用
蛋白酶抑制剂在抗炎治疗中的效果评价
蛋白酶抑制剂在抗炎治疗中的安全性评估
在其他疾病治疗方面的应用
蛋白酶抑制剂在癌症治疗中的应用
蛋白酶抑制剂在艾滋病治疗中的应用
蛋白酶抑制剂在阿尔茨海默病治疗中的应用
蛋白酶抑制剂在帕金森病治疗中的应用
蛋白酶抑制剂在糖尿病治疗中的应用
蛋白酶抑制剂在肥胖症治疗中的应用
损伤
应用领域：抗凝血、抗血栓、抗肿瘤、抗
感染等
研究进展：新型蛋白酶抑制剂的设计和开发，提高抑制剂的特
异性和稳定性
Part Three
蛋白酶抑制剂的设计方法
基于结构的药物设计
基于结构的药物设计可以预测蛋白质与药物的结合模式，从而设计出更有效的蛋白酶抑制剂
基于结构的药物设计是一种利用蛋白质结构信息来设计药物的方法

寄生蠕虫丝氨酸蛋白酶抑制剂的研究进展

寄生蠕虫丝氨酸蛋白酶抑制剂的研究进展
李晓璐;郭爱疆;王帅
【期刊名称】《中国预防兽医学报》
【年(卷),期】2024(46)2
【摘要】蛋白酶抑制剂存在于所有生物体内,它们可能通过抑制对自身细胞有害的多余蛋白酶而发挥重要作用^([1])。

1985年,Carrell命名的丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serine protease inhibitor,Serpin),其大部分成员具有抑制丝氨酸蛋白酶活性的作用^([2])。

【总页数】7页(P214-220)
【作者】李晓璐;郭爱疆;王帅
【作者单位】中国农业科学院兰州兽医研究所
【正文语种】中文
【中图分类】S855.9
【相关文献】
1.寄生性蠕虫丝氨酸蛋白酶抑制剂研究进展
2.丝氨酸蛋白酶抑制剂vaspin与炎症反应关系的研究进展
3.内脏脂肪型丝氨酸蛋白酶抑制剂与临床疾病关系的研究进展
4.外寄生虫丝氨酸蛋白酶抑制剂的研究进展
5.丝氨酸蛋白酶抑制剂E2的分子生物学研究进展
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旋毛虫成虫丝氨酸蛋白酶抑制剂的原核表达及免疫原性研究

李达，万悦，马静，孔令杰，路佳琦，武文浩，路义鑫
（东北农业大学动物医学学院，黑龙江哈尔滨１５００３０）摘要：以旋毛虫成虫的总ＲＮＡ为模板，应用ＲＴ — ＰＣＲ扩增获得旋毛虫成虫丝氨酸蛋白酶抑制剂（ＴｓＡｄＳＰＩ）基因。经克隆鉴定正确后，将ＴｓＡｄＳＰＩ基因连接到ｐＥＴ－２８ａ表达载体，转化至大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中进行ＩＰＴＧ诱导表达，并将纯化后的目的蛋白免疫新西兰大白兔，制备多克隆抗体。应用Ｗｅｓｔｅｒｎ — ｂｌｏｔ及ＥＬＩＳＡ方法对重组蛋白的免疫原性和抗体效价进行分析。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ结果显示，目的蛋白分子质量为４４ｋＤａ，以包涵体形式表达。经Ｗｅｓｔｅｒｎ — ｂｌｏｔ和ＥＬＩＳＡ方法分析，制备的多克隆抗体效价可高达１：５１２００，表明该蛋白具有较好免疫原性。表明ＴｓＡｄＳＰＩ蛋白可作为旋毛虫感染早
ｇｅｎｉｃｉｔｙｏｆｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｐｒｏｔｅｉｎａｎｄｖａｌｅｎｃｅｏｆａｎｔｉｂｏｄｙ．ＳＤＳ－ＰＡＧＥｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｍｏｌｅｃｕｌｒａｍａｓｓｏｆｐｒｏｔｅｉｎｉＳ４４ｋＤａ，ｅｘ・ｐｒｅｓｓｅｄｉｎｔｈｅｆｏｍｒｏｆｉｎｃｌｕｓｉｏｎｂｏｄｙ．ＢｙＷｅｓｔｅｎ— ｒｂｌｏｔａｎｄＥＬＩＳＡａｎａｌｙｓｉｓ，ＴｓＡｄＳＰＩｐｒｏｔｅｉｎｓｈｏｗｅｄｇｏｏｄｒｅａｃｔｉｏｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ，ｖａ — ｌｅｎｃｅｏｆａｎｔｉｂｏｄｙｏｆｐｏｌｙｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙｒｅａｃｈｅｄｕｐｔｏ１：５１２００，ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇｔｈａｔｔｈｅｐｒｏｔｅｉｎｈａｄｇｏｏｄｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ．Ａｓｔｈｅｒｅ・ｓｅｒｃａｈｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄ，ＴｓＡｄＳＰＩｐｒｏｔｅｉｎｃｏｕｌｄｂｅｕｓｅｄａｓａｎｅｒｌａｙｃａｎｄｉｄａｔｅａｎｔｉｇｅｎｏｆＴｉｃｒｈｉｎｅｌｌａｓｅｒｏｌｏｇｉｃａｌｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｍｅｔｈｏｄｓ，

鲤鱼卵中丝氨酸蛋白酶抑制剂活性的初步研究

鲤鱼卵中丝氨酸蛋白酶抑制剂活性的初步研究————————————————————————————————作者：————————————————————————————————日期：鲤鱼卵中丝氨酸蛋白酶抑制剂活性的初步研究-农学论文鲤鱼卵中丝氨酸蛋白酶抑制剂活性的初步研究杨书婷１，２，曾庆瑞１，２，梁化亮２，王梦娅２，尹壮壮２，韩曜平２（１．苏州大学基础医学与生物科学学院，江苏苏州２１５１２３；２．常熟理工学院生物与食品工程学院，江苏常熟２１５５００）摘要：利用凝胶层析法从鲤鱼（Ｃｙｐｒｉｎｕｓｃａｒｐｉｏ）卵中分离纯化得到一种丝氨酸蛋白酶抑制剂。

选择胰蛋白酶、弹性蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、凝血酶及其特异底物，建立比色法检测，对初步分离的丝氨酸蛋白酶抑制剂活性进行了分析。

结果表明，丝氨酸蛋白酶抑制除对胰凝乳蛋白酶无抑制作用外，对其他的蛋白酶均有抑制效果；当温度超过７０℃时，丝氨酸蛋白酶抑制剂失活，但在ｐＨ２～１１均保持活性，具有较强的酸碱稳定性。

关键词：丝氨酸蛋白酶抑制剂；比色法；酸碱稳定性中图分类号：Ｓ９１７．４；ＴＳ２５４．９文献标识码：Ａ文章编号：０４３９－８１１４（２０１５）１８－4556－０4ＤＯＩ：１０．１４０８８／ｊ．ｃｎｋｉ．ｉｓｓｎ０４３９－８１１４．２０１５．１８．０41ＰｒｅｌｉｍｉｎａｒｙＳｔｕｄｙｏｎＳｅｒｉｎｅＰｒｏｔｅａｓｅ－ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙＡｃｔｉｖｉｔｙｉｎＥｇｇｓｏｆCａｒｐ（Ｃｙｐｒｉｎｕｓｃａｒｐｉｏ）ＹＡＮＧＳｈｕ－ｔｉｎｇ１，２，ＺＥＮＧＱｉｎｇ－ｒｕｉ１，２，ＬＩＡＮＧＨｕａ－ｌｉａｎｇ２，ＷＡＮＧＭｅｎｇ－ｙａ２，ＹＩＮＧＺｈｕａｎｇ－ｚｈｕａｎｇ２，ＨＡＮＹａｏ－ｐｉｎｇ２（１．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＰｒｅｃｌｉｎｉｃａｌＭｅｄｉｃｉｎｅａｎｄＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅ，ＳｏｏｃｈｏｗＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｕｚｈｏｕ２１５１２３，Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｃｈｉｎａ；２．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＢｉｏｌｏｇｙａｎｄＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅ，ＣｈａｎｇｓｈｕＩｎｓｔｉｔｕｔｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｊｉａｎｇｓｕ２１５５００，Ｃｈａｎｇｓｈｕ，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｓｅｒｉｎｅｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｗａｓｐｕｒｉｆｉｅｄｆｒｏｍｃａｒｐ（Ｃｙｐｒｉｎｕｓｃａｒｐｉｏ）．Ｔｈｅｓｅｒｉｎｅｐｒｏｔｅａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｃａｒｐ（Ｃｙｐｒｉｎｕｓｃａｒｐｉｏ）ｗａｓｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄｕｓｉｎｇｆｉｖｅｓｅｒｉｎｅｐｒｏｔｅａｓｅ（ｔｒｙｐｓｉｎ，ｅｌａｓｔａｓｅ，ｓｕｂｔｉｌｉｓｉｎ，ｃｈｙｍｏｔｒｙｐｓｉｎａｎｄｔｈｒｏｍｂｉｎ）ａｎｄｓｐｅｃｉｆｉｃｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃｓｕｂｓｔｒａｔｅｓ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｔｒｙｐｓｉｎｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙｗａｓｄｅｃｒｅａｓｅｄａｓｆｏｌｌｏｗｉｎｇ：ｔｈｅｓｅｒｉｎｅｐｒｏｔｅａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙｈａｄｎｏｅｆｆｅｃｔｓｏｎｃｈｙｍｏｔｒｙｐｓｉｎ，ａｎｄｈａｄｓｏｍｅｅｆｆｅｃｔｓｏｎｏｔｈｅｒｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ；ｔｈｅｔｈｅｒｍａｌｓｔａｂｉｌｉｔｙｏｆｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓｈａｒｐｌｙｄｅｃｒｅａｓｅｄａｔｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｓｏｖｅｒ７０℃，ｂｕｔｒｅｖｅａｌａｗｉｄｅｒａｎｇｅｏｆｐＨｓｔａｂｉｌｉｔｙ（ｐ２～１１）．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｐｒｏｔｅａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙ；ｐｕｒｉｆｙ；ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｙ；ｔｈｅｒｍａｌｓｔａｂｉｌｉｔｙ；ｐＨｓｔａｂｉｌｉｔｙ收稿日期：２０１５－０１－２７作者简介：杨书婷（1990-），女，江苏盐城人，在读硕士研究生，研究方向为水生动物活性成分分离纯化、功能及基因克隆，（电话）１３６０１５７３４６２（电子信箱）ｙａｎｇｓｈｕｔｉｎｇ１９９００７＠１６３．ｃｏｍ；通信作者，韩曜平，陕西陇县人，教授，博士，硕士生导师，主要从事动物活性成分的分离纯化、功能与基因克隆的研究，（电子信箱）ｈａｎｙａｏｐ＠１６３．ｃｏｍ。

丝氨酸蛋白酶抑制剂

ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
• 典型的丝氨酸蛋白酶抑制剂
综述
• 非典型的丝氨酸蛋白酶抑制剂多来源于吸血生物，特异性地阻断参与凝血反应的酶，尤其是凝血酶和Xa因子。这类抑制剂通过N端与酶的酶切位点相互作用行使抑制功能。
3 功能作用
最基本的功能是防止不必要的蛋白水解，调节丝氨酸蛋白酶的水解平衡。作为调控物，丝氨酸蛋白酶抑制剂参与机体免疫反应，对生物体内的血液凝固、补体形成、纤溶、蛋白质折叠、细胞迁移、细胞分化、细胞基质重建、激素形成、激素转运、细胞内蛋白水解、血压调节、肿瘤抑制以及病毒或寄生虫致病性的形成等许多重要的生化反应和生理功能有重要的影响
综述
3、利用RT-PCR和RACE技术，获得了一条全长为1397bp，其中包括1233bp完整的开放阅读框的核酸序列，编码410 个氨基酸。对由核酸序列推测的氨基酸序列分析显示，在52-408处具有SERPIN结构域。经过BLAST比对，该蛋白与来源于动物脑膜液的CP9等serpins超家族的丝氨酸蛋白酶抑制剂具有高度同源性，并且在P1位置处为精氨酸（Arg），推测该蛋白属于Sepins超家族一员
1.2 种类、分布
• 分布：广泛存在于动物、植物、微生物体中。在动物体中。 • 种类：根据活性位点氨基酸种类不同可将蛋白酶抑制剂分为四大类型:丝氨酸蛋白酶抑制剂、巯基蛋白酶抑制剂、天冬氨酸蛋白酶抑制剂和金属蛋白酶抑制剂。其中尤以丝氨酸蛋白酶及其抑制剂在体内一些重要生理活动中起关键性的调控作用。
综述
3.1 研究的技术路线及方案
3 活性物质的研究方法及手段
材料收集及预处理
材料及原液收集
、处理
色谱层析、HPLC 分离
Trizol 法提取 RNA

SPINK1／Spink3的研究进展

SPINK1／Spink3的研究进展张婧;王军【摘要】Serine protease inhibitor Kazal type 1 ( SPINK1) is one of the main members of serine protease inhibitor fami-ly.SPINK1 can inhibit abnormal trypsinogen activation, so as to protect pancreatic tissue against the damage.It is believed that SPINK1 possibly plays an important role in the pathogenesis of pancreatitis.Moreover, recent research showed that SPINK1/Spink3( a mouse homolog gene of human SPINK1) act as the growth factor as well as negative regulator of autoph-agy.The mutationsof SPINK1 gene is probably one of the risk factors for the development of pancreatitis.Besides, SPINK1/Spink3 is likely associated with the occurrence, development and prognosis of cancer.The function-related sig-naling pathways of SPINK1/Spink3 still remain unclear.In this review, we summarize the roles of SPINK1/Spink3 based on the data obtained from the latest research.%丝氨酸蛋白酶抑制因子Kazal 1型（serine protease inhibitor Kazal type 1，SPINK1）是蛋白酶抑制剂家族中最主要的成员之一，它可抑制胰腺中胰蛋白酶原的非正常性激活，保护胰腺组织，在胰腺炎的发病过程中可能起着重要的作用。

蛋白酶抑制剂的研究进展

蛋白酶抑制剂的研究进展郭川微生物专业，200326031摘要：自然界共发现四大类蛋白酶抑制剂:丝氨酸蛋白酶抑制剂、巯基蛋白酶抑制剂、金属蛋白酶抑制剂和酸性蛋白酶抑制剂，本文就各大类蛋白酶抑制剂的结构特点，活性部位的研究概况及其在各领域应用的原理及进展。

关键词：蛋白酶抑制剂；结构；应用天然的蛋白酶抑制剂(ＰＩ)是对蛋白水解酶有抑制活性的一种小分子蛋白质,由于其分子量较小,所以在生物中普遍存在。

它能与蛋白酶的活性部位和变构部位结合,抑制酶的催化活性或阻止酶原转化有活性的酶。

在一系列重要的生理、病理过程中:如凝血、纤溶、补体活化、感染、细胞迁移等，PI发挥着关键性的调控作用,是生物体内免疫系统的重要组成部分。

从Ｋｕｎｉｔｚ等最早分离纯化出一种ＰＩ至今,已有多种ＰＩ被发现,根据其作用的蛋白酶主要分以下几类:抑制胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶等的丝氨酸蛋白酶抑制剂,抑制木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶等的巯基蛋白酶抑制剂,抑制胃蛋白酶、组织蛋白酶Ｄ等的羧基蛋白酶抑制剂、抑制胶原酶、氨肽酶等的金属蛋白酶抑制剂等。

而根据作用于酶的活性基团不同及其氨基酸序列的同源性,可将自然界发现的PI分为四大类:丝氨酸蛋白酶抑制剂、巯基蛋白酶抑制剂(半胱氨酸蛋白酶抑制剂)、金属蛋白酶抑制剂和酸性蛋白酶抑制剂[1]。

1 结构与功能1.1丝氨酸蛋白酶抑制剂（Serine Protease Inhibitor,Serpin）丝氨酸蛋白酶抑制剂是一族由古代抑制剂趋异进化5亿年演变而来的结构序列同源的蛋白酶抑制剂。

Sepin为单一肽链蛋白质。

各种serpin大约有30％的同源序列，疏水区同源性高达70％。

血浆中的serpin多被糖基化，糖链经天东酰胺的酰胺基与主链相连。

位于抑制性serpin表面、距C端30～40个氨基酸处的环状结构区RSL（reactive site loop）中，存在能被靶酶的底物识别位点识别的氨基酸P1[2]；近C端与P1相邻的氨基酸为P1’，依此类推，即肽链结构表示为N端-P15～P9～P1-P1’～P9’～P15’-C端。

丝氨酸蛋白酶抑制剂的结构和功能研究进展

丝氨酸蛋白酶抑制剂的结构和功能研究进展2. 鄂尔多斯市中心医院内蒙古鄂尔多斯市017000【摘要】在人体机能中，丝氨酸蛋白酶抑制剂能够对炎症、血液凝结、纤溶以及肿瘤等进行抑制，在致病性微生物浸染过程中，主动防御效果显著，同时在丝氨酸蛋白酶水解平衡调节当中，具有神经保护效果。

对于该类型的蛋白超家族成员来说，在遗传性结构与异常分泌中，容易发生许多疾病。

因此，在临床治疗当中，必须要加强生物学特性与结构、功能关系进行研究。

基于此，本文主要对丝氨酸蛋白酶抑制剂结构与功能研究进展进行分析，提出在小分子质量与高活性新型丝氨酸蛋白酶抑制剂的发展，可以更好的了解丝氨酸蛋白酶以质的作用机理。

【关键词】丝氨酸蛋白酶抑制剂；功能；结构在动物、植物、微生物体内广泛存在着丝氨酸蛋白酶抑制剂，作为一种丝氨酸蛋白酶活性调节剂，能够对生物体内的诸多生命过程进行调节，比如血凝、蛋白质折叠、细胞迁移、炎症反应等。

在蛋白结构与氨基酸序列的相似性分析过程中，可以将蛋白酶抑制剂分为四种类型，包括半胱氨酸类蛋白酶抑制、天冬氨酸类蛋白酶抑制剂、丝氨酸蛋白酶抑制剂以及非金属蛋白酶抑制剂等[1]。

其中最终的一类为丝氨酸蛋白酶抑制剂，同时也是现阶段研究工作中最广泛的类型。

丝氨酸蛋白酶抑制剂作为一种多功能同源蛋白，能够对生物的生理活动进行调节，目前在动物、植物以及病毒等中发现了超过1500类丝氨酸蛋白酶抑制剂，其中通常含有350-400个氨基酸残基，分子量大约在40-100kD[2]。

因此，本文主要针对丝氨酸蛋白酶抑制剂的功能与生理活性进行分析，研究其研究现状与前景，从而增进人们的了解，为国内抑制剂研究工作的开展提供可靠保障。

一、丝氨酸蛋白酶抑制剂分类在以往的研究当中，主要从脊椎动物角度出发，针对丝氨酸蛋白酶抑制剂进行研究，按照基因结构不同以及特征性氨基酸位点的差异，将脊椎动物的丝氨酸蛋白酶抑制剂进行了分类，主要包括6个亚家族。

从人体内的丝氨酸蛋白酶抑制剂而言，可以将其分为9个亚家族，其中家族最大的为α1AT家族与类卵清蛋白家族。

蜱丝氨酸蛋白酶抑制分子Serpin研究进展

心必有１个丝氨酸残基，所以被称为丝氨酸蛋白酶物被发现口。引。最近还报道了Ｈｙａｌｏｍｍａｇ３ｃｃａｖａ—
抑制分子。Ｓｅｒｐｉｎ是成员最多、分布最广、功能多样ｒｕｍ唾液组织中１Ｏ种不同的丝氨酸蛋白酶转录的蛋白酶抑制分子家族，目前在人类、动物、植物、细物ｌｌ，显示了其具有物种保守和特异性。Ｓｅｒｐｉｎ在
关键词：蜱；丝氨酸蛋白酶抑制分子；功能
中图分类号：￥８５２．７４６
文献标识码：Ａ
文章编号：１００７—５０３８（２０１８）０９—００６６—０７
地球上生活着１５０００多种吸血节肢动物，占总它们的活性部位都含有Ｈｉｓ、Ａｓｐ和Ｓｅｒ，具有相同
于蚊子的第二大媒介节肢动物。长期以来，蜱传病一直是困扰世界上众多国家和我国畜牧业发展的重大疾病。目前，蜱及蜱传病的控制主要依靠药物灭
是一旦与靶蛋白结合，Ｓｅｒｐｉｎ发生构像改变，与靶蛋白酶形成紧密复合物，两者均失活，且反应不可逆，因此Ｓｅｒｐｉｎ被称为“自杀性 ”抑制剂。
摘要：蜱及蜱传病不仅在兽医上十分重要，也是公共卫生面临的新问题。目前，蜱及蜱传病的控制主要依靠药物灭蜱，但随之出现的环境污染、食品安全和蜱的抗药性等问题，迫切需要寻找新的可持续控制策略。发现和鉴定具有重要生物学功能的蜱分子是埤和蜱传病新型防治策略的重要环节，而丝氨酸蛋白酶抑制分子（Ｓｅｒｐｉｎ）在包括食物消化、血液凝固、病原俸传播、炎症反应和免疫应答等多种生理过程中都发挥作用，论文将对蜱体内广泛存在并发挥重要功能的Ｓｅｒｐｉｎ进行综述，为相关研究提供参考。

丝氨酸蛋白酶研究进展

Abstract: T his paper r eview s the ser ine prot eases structures, f unctions, pr otein eng ineering, ex pression system,
and applications. Serine prot ease is a g ro up of pro teolytic enzymes that are impor tant for its po tent ial applications
1 丝氨酸蛋白酶的结构与功能
丝氨酸蛋白酶超家族的成员多而广, 它们的活性部位都含 Ser、H is、Asp, 并具有相同的催化机制, 但是它们与底物结合部位的差异决定了各自对底物的专一性。实际上, 正是由于丝氨酸蛋白酶在结构上的微小变化, 从而引起了其在功能上的进化。
1 1 结构域分析丝氨酸蛋白酶在结构上为全蛋白, 核心结构
All ser ine pr oteases have ser ine, histidine and aspar tic acid in their activ e do main, and same catalyt ic mechanism
T he members in the serine pr otease super family ser ve a wide r ang e of physiolog ical functions, especially in the
收稿日期: 2007- 07- 26 初稿; 2007- 08- 22 修改稿作者简介: 汪世华 ( 1976- ) , 男, 博士, 副教授, 主要从事微生物及分子生物学教学与科研工作 ( E m ail: w s hyyl@ sina com) 。基金项目: 国家自然科学基金项目 ( 30500325) ; 福建省青年科技人才创新项目 ( 2005J017 ) ; 福建省自然科学基金项目 ( B0610008,

外寄生虫丝氨酸蛋白酶抑制剂的研究进展

中国兽医科学 2021,51(02):219-225Chinese Veterinary Science网络首发时间：2020-11-30 D O I：10.16656/j.issn. 1673-4696.2021.0018 中图分类号：S852.74 文献标志码：A文章编号：1673-4696(2021)02-0219-07外寄生虫丝氨酸蛋白酶抑制剂的研究进展黄钰，潘保良*(中国农业大学动物医学院，北京100193)摘要：外寄生虫对人类以及动物的致病作用包括直接和间接两方面，如吸血、引起过敏、组织损伤和传播病原体等，因此具有重要的公共卫生意义。

为了能够更好的防治外寄生，有必要从分子水平了解其重要的生理活动:，serpin型丝氨酸蛋白酶抑制剂是一种多功能分子，在生物体中广泛分布，在寄生虫-宿主-病原体相互作用中发挥着重要作用，主要参与吸血、消化、繁殖和免疫应答等生理过程。

现就外寄生虫的serpin 型丝氨酸蛋白酶抑制剂的结构、作用机制、功能等方面的研究进展作一综述。

关键词：外寄生虫；serpin分子；功能；进展Research advances in serine proteinase inhibitor of ectoparasiteHUANG Yu，PAN Bao-liang*{C o lleg e o f V e te rin a r y M e d ic in e .C h in a A g r ic u ltu r a l U n iv e r sity .R e ijin g100\93 .C h in a)Abstract：The effects of ectoparasites on humans and animals include both direct and indirect aspects,such as blood-sucking,allergies,tissue damage,and transmission of pathogens. Therefore,they have important public health significance. Better control ectoparasites to depends on further understanding their important physiological activities at the molecular level. Serine protease inhibitors (Serpins) are multifunctional proteins distributed ubiquitously in organisms .mainly involve in blood feeding,digestion,reproduction and immune response etc,playing an crucial role in the intercation of parasite-host-pathogens. Here,we summarize the structure,mode of action and physiological function of ectoparasites' serpins.Key words：ectoparasite；serpin；function；advance* Corresponding author：PAN Ba〇-liang,E-raail ：baoliang@cau. edu. cn外寄生虫（ectoparasites)是指寄生于动物体表的节肢动物，这些节肢动物或吸血，或取食宿主体上的组织或体液，主要有蜱、螨、蚊、蝇、蚤等。

昆虫丝氨酸蛋白酶抑制剂在免疫调节中的作用

昆虫丝氨酸蛋白酶抑制剂在免疫调节中的作用摘要丝氨酸蛋白酶抑制剂是一类分布广泛的蛋白酶抑制剂超家族，能与体内参与各种调控作用的丝氨酸蛋白酶相互制约，形成一定的动态平衡，调节生物体内许多重要的生命活动。

该文就近几年来关于昆虫丝氨酸蛋白酶抑制剂在免疫调节中的研究进展进行综述。

Abstract Serine protease inhibitors（Serpins）are widely distributed protease inhibitor superfamily，which could restrict each other with serine proteases（SPs）mediating crucial physiological processes to form a dynamic and regulate many important life activities of the organism.In this paper，we mainly discussed the progress on immunomodulation of insect Serpins in recent years.Key words insect；serine protease inhibitors；immunomodulation丝氨酸蛋白酶抑制剂（serine protease inhibitors，Serpins）是一类丝氨酸蛋白酶活性调节剂，属于一类超家族蛋白质，能够抑制丝氨酸蛋白酶（serine proteases，SPs）或半胱氨酸蛋白酶（cysteine proteases，CPs）的活性，广泛存在于动物、植物、真菌、原核生物和病毒等生物体中[1]。

1 Serpins的结构、作用机制及生物学作用1.1 Serpins的结构与作用机制Serpins一般是由350～500个氨基酸残基折叠成一个保守的三维结构，蛋白分子量一般为40～50 kD；由8～9个a螺旋、3个β折叠（折叠A、B、C）和1个约有20个氨基酸组成的活性中心环（reactiveeentreloop，RCL）构成[2]。

丝氨酸蛋白酶的研究和应用

丝氨酸蛋白酶的研究和应用导言：蛋白，是一种重要的生物分子，是构成生物体各个组织器官的基本物质之一。

在细胞内，蛋白活跃地合成和分解，维持着生命体系的正常运转。

蛋白降解酶是细胞内分解蛋白质的重要类酶之一，具有极为重要的生理作用和药理学价值。

一、丝氨酸蛋白酶的生物学特性丝氨酸蛋白酶(SAPs)，是一类专一性较强的蛋白降解酶，广泛分布于真核生物体内。

它们特异地水解组蛋白中的丝氨酸残基，并呈现出酸性、中性或碱性效应。

目前已经发现的丝氨酸蛋白酶，有SS、SA、SP、SF、SE、SC等六种类别，每一种类别的丝氨酸蛋白酶其分子量、同工酶的个数、对底物的特异性、酸碱性和电荷性等都有所不同。

二、丝氨酸蛋白酶的研究进展对于丝氨酸蛋白酶的研究，主要从其结构、合成和调控、功能、分布等方面入手。

由于丝氨酸蛋白酶在生物学体系中的重要作用，其研究一直备受关注。

其结构和测序已经完全揭示，并在大体上知道了其基本的合成和调控机制，但对于不同类别之间及同一类别之间的特异性、生物存在意义等问题还需要深入探讨。

(一)丝氨酸蛋白酶在形成和病理过程中的作用大有可为分解被氧化的蛋白质是细胞调整对抗氧化应激最基本的机制之一。

目前，丝氨酸蛋白酶特别是SS型丝氨酸蛋白酶被发现在一些疾病的形成和发展过程中发挥着重要的作用。

比如，在多种动物实验性心肌损伤模型中，丝氨酸蛋白酶SS4的表达明显上升，活性增加。

这种酶的诱导显然与心肌斑块的形成有关，而对这种现象的深入研究将能够更好地为心肌疾病的诊断和治疗提供有力的帮助。

(二)丝氨酸蛋白酶在药物研发中的应用前景广阔现代药物研究中，探索和开发区分分子靶点的新型药物具有重要意义。

丝氨酸蛋白酶作为一种生物分解酶，其特异性和多样性使其成为药物研发领域的重要研究对象。

可以预计，丝氨酸蛋白酶在下一代药物的推广和应用等方面也将发挥越来越重要的作用。

三、丝氨酸蛋白酶的应用前景对于丝氨酸蛋白酶的研究和应用主要体现为两个方面:一是在基础研究方面，除了对丝氨酸蛋白酶认识的不断深入，还追踪了丝氨酸蛋白酶在一些人工合成组分的破坏过程、体内组织方向性修复过程及其在早期心肌损伤治疗当中的应用等；二是在新材料开发、医学生产等多个实际和实用领域寻找丝氨酸蛋白分解酶的适用场景。