酶的高效性与专一性

三、材料、器材和试剂




1、材料：约0.5 cm的马铃薯方块（生、熟）。 2、器材： 恒温水浴锅、试管、移液管或吸量管、量 筒；白瓷板 3、试剂 （1）铁粉 （2）2%过氧化氢H2O2 （3）唾液淀粉酶:先用蒸馏水漱口，再含10ml左右蒸 馏水，轻轻漱口，数分钟后吐出收集在烧杯中，用数 层纱布或棉花过滤，所得清澈的唾液淀粉酶原液。根 据酶活高低稀释50-100倍，即为唾液淀粉酶溶液。 （4）蔗糖酶溶液：取1g 鲜酵母或干酵母放入研钵中， 加入少量石英砂和水研磨，再加入50ml蒸馏水，静 置片刻，过滤即得。
《食品化学》
云南农业大学热带作物学院
一、实验目的
1、学习并理解酶促反应的高效性和专一 性 2、掌握酶的高效性实和专一性实验设计 思路和操作

二、实验原理
酶是由活细胞产生的，能在体内或体外起同样 催化作用的一类具有活性中心和特殊构象的生 物大分子，主要为蛋白质（少数为核酸），是 生物催化剂。生物体内的化学反应基本上都是 在酶催化下进行的。 酶的高效性 酶的催化效率比一般催化剂高出107-1013 倍。专一性实验以过氧化氢酶为例，过氧化氢 酶的广泛分布于生物体内，能将代谢中产生的 过氧化氢H2O2 分解成H2O 和 O2 。其催化效 率比无机催化剂铁粉高10个数量级，反应速率 可观察O2 产生的情况。
（5） 2% 蔗糖溶液：用分析纯蔗糖现用现配 （6）1%淀粉溶液： 1 g淀粉和0.3g NaCl ,用5 ml 蒸馏水悬浮，慢慢加入60ml煮沸的蒸馏水中，煮沸 1min，冷却至室温，加水到100ml，冰箱贮存。 （7） 0.1%淀粉溶液：0. 1 g淀粉,用5 ml蒸馏水悬 浮，慢慢加入60ml煮沸的蒸馏水中，煮沸1min，冷 却至室温，加水到100ml，冰箱贮存。 （8）班奈德(Benedict)试剂: 17.3g硫酸铜(CuSO4.5H2O)加100ml蒸馏水，加热 溶解，冷却；173g柠檬酸钠和100g碳酸钠，以 600ml蒸馏水加热溶解，冷却后将硫酸铜溶液慢慢 加到柠檬酸钠-碳酸钠溶液中，边加边搅匀，最后定 容至1000ml。如有沉淀可过滤除去。


酶催化的专一性 酶与一般催化剂相比，最显著的区别之一 是酶具有高度的专一性，专一性又称特异性，是 指一种酶只作用于一类化合物或一定的化学键， 以促进一定的化学变化，并生成一定产物。本实 验中唾液淀粉酶只能使淀粉水解成麦芽糖而不能 使蔗糖水解成葡萄糖和果糖，相反蔗糖酶只能使 蔗糖水解成葡萄糖和果糖而不能使淀粉水解成麦 芽糖，由此证明酶的专一性。 判断淀粉或蔗糖是否水解，是利用水解后 产生的麦芽糖、葡萄糖和果糖具有还原性，可使 班奈德试剂中的Cu2+还原Cu+ 而出现棕红色沉淀； 相反不被水解的淀粉、蔗糖没有还原性，不出现 棕红色沉淀。

观测、记录各试管的反应现象、并对实验 现象做出相应解析
六、思考题
1、酶作为一种生物催化剂，其催化特性 除了高效性与专一性外，还有哪些特点？ 2.在本次试验中为何用到马铃薯有生熟之 分？


四、实验步骤

1、酶催化的高效性 ：取4支试管，按下表操 作 操作项目 试管编号
2%H2O2 /ml 生马铃薯块 熟马铃薯块
1 3
2 0
2 3
0 2
3 3
0 0
4 3
0 0
铁粉
现象
0
0
一小勺
0
解析实验现象
2、酶催化的专一性： 取6支干净的试管安下表操作
操作项目
1
试管编号 2 3 1 0 0 1 0 0 1 1 0 0
4
5
6
1% 淀粉 /ml 2%蔗糖/ml 唾液淀粉酶溶液/ml 蔗糖酶溶液/ml 蒸馏水/ml 酶促水解 班奈德试剂/ml 反应 现象 实验现象解析
1 0 1 0 0
0 1 0 1 0
1 0 0 0 1
0 1 0 0 1
摇匀，37℃ 水浴中保温10min
ห้องสมุดไป่ตู้
各 2ml 摇匀，沸水浴中加热5—10min
五.结果表示