科玛嘉大肠埃希菌显色培养基的临床应用评价

科玛嘉大肠埃希菌显色培养基的临床应

用评价

（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）

作者：吴庆，陈栎江，黎丽，周铁丽

【摘要】目的：评价科玛嘉大肠埃希菌显色培养基在大肠埃希菌鉴定中的临床应用价值。方法：用科玛嘉大肠埃希菌显色培养基和VITEK-GNI卡鉴定267株革兰阴性杆菌，比较两者鉴定大肠埃希菌的符合程度，并评价显色培养基对大肠埃希菌的鉴定效率。结果：两种方法对大肠埃希菌的鉴定符合率差异无显著性;科玛嘉大肠埃希菌显色培养基鉴定大肠埃希菌的特异性为100%，灵敏度为96.2%;6 h、9 h为70.2%和85.5%。结论：科玛嘉大肠埃希菌显色培养基具有快速、准确鉴定大肠埃希菌的功能。

【关键词】大肠埃希菌;科玛嘉大肠埃希菌显色培养基;VITEK-GNI 卡

大肠埃希菌栖居于人和动物的肠道中，为条件致病菌，一定条件下，可通过各种途径引起机体多部位感染，导致尿道炎、创伤感染、败血症等，并使免疫力低下的住院病人并发肺炎和新生儿脑膜炎[1]，因而大肠埃希菌的快速鉴定对临床及时诊断和治疗十分重要。科玛嘉大

肠埃希菌显色培养基是通过菌落的显色反应对大肠埃希菌进行快速鉴定的一种选择性显色培养基，为了全面评价这一培养基在临床中的应用价值，我们对267株临床分离的革兰阴性杆菌同时用科玛嘉大肠埃希菌显色培养基和VITEK-GNI卡鉴定，以评价科玛嘉大肠埃希菌显色培养基在临床大肠埃希菌鉴定中的价值。

1 材料和方法

1.1 菌株来源 267株革兰阴性杆菌分离于本院2007年11月至2008年9月住院和门诊患者送检的各类标本，包括尿液(147株)、痰液(42株)、脓液(32株)、血液(18株)、胆汁(15株)、胸腹水(8株)和创面渗液(5株)。

1.2 培养基科玛嘉大肠埃希菌显色培养基购自郑州博赛生物技术有限公司，按说明书进行配制。

1.3 仪器 VITEK细菌鉴定仪和GNI鉴定卡为法国梅里埃公司的产品。

1.4 培养方法标本按常规划线接种科玛嘉大肠埃希菌显色培养基，培养3～24 h，观察结果。

1.5 鉴定

1.5.1 VITEK-GNI卡鉴定：血平板上生长的菌落经革兰染色及菌落形态确认为革兰阴性杆菌后，挑取单个菌落用生理盐水调节到1.0麦氏浊度后，将菌液冲入GNI鉴定卡并用VITEK鉴定仪鉴定。

1.5.2 科玛嘉大肠埃希菌显色培养基鉴定：按说明书操作和判断结果，在培养基上菌落呈蓝色的为大肠埃希菌。

2 结果

267株革兰阴性杆菌在科玛嘉大肠埃希菌显色培养基上117株呈蓝色菌落，9株呈白色带蓝菌落，4株为红色菌落，其余137株为白色菌落。经VITEK-GNI卡鉴定117株呈蓝色菌落和9株呈白色带蓝菌落的细菌均为大肠埃希菌，4株红色菌落的细菌为黏质沙雷菌，137株呈白色菌落的细菌，5株为大肠埃希菌，其余132株中，114株为肠杆菌科细菌，包括肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌、黏质沙雷菌及产气肠杆菌等;18株为非发酵革兰阴性杆菌，包括铜绿假单孢菌、鲍曼不动杆菌等，科玛嘉大肠埃希菌显色培养基鉴定大肠埃希菌的特异性为100%(126/126)，灵敏度为96.2%(126/131)。科玛嘉大肠埃希菌显色培养基对革兰阴性杆菌显色结果见表1。

267株革兰阴性杆菌中，经VITEK-GNI卡鉴定，131株为大肠埃希菌，大肠埃希菌显色培养基显色鉴定结果与VITEK-GNI卡鉴定结果比较两者鉴定结果差异无显著性(P 0.05)，见表2。

为了了解大肠埃希菌显色培养基在快速鉴定方面的作用，我们对不同时间大肠埃希菌在显色培养基上检出比率进行观察统计，结果见表3。

3 讨论

大肠埃希菌是肠杆菌科中最常见的细菌，为人和动物肠道正常菌群，主要引起肠道外感染，以泌尿系统感染最常见。泌尿系统感染是临床上的常见病、多发病，常因不能及时得到准确的治疗而拖延病情至慢性，约90%门诊患者和50%住院患者泌尿系统感染病原菌是大肠

埃希菌[2]。大肠埃希菌亦可引起腹膜炎、胆道感染、肺炎、手术创口感染等，严重者可引起败血症。因而对大肠埃希菌的快速鉴定甚为重要。

传统大肠埃希菌鉴定采用手工法，该法操作繁琐，鉴定时间长，且生化结果的判定比较含糊，易出错;自动化鉴定仪虽能将菌株鉴定到种，但必需等细菌分离纯化后才能鉴定，费时长，且需特殊设备，操作繁琐，价格昂贵。

科玛嘉显色培养基[3-4]主要由产色基团和微生物可代谢物质如糖苷类、氨基酸或肽类两部分组成，通常情况下底物为无色，在特异性酶(β-葡苷酸酶[5])作用下，游离出产色基团显示一定颜色，直接观察菌落颜色即可对菌种作出快速鉴定，它是一种新型分离培养基，其配置简单，操作简便，划线接种，37 ℃培养，3～24 h出结果，检测成本低。表3结果显示，科玛嘉显色培养基6 h内对大肠埃希菌的准确鉴定比率达70%以上，因些在日常工作中，对于大肠埃希菌感染率比较高的标本如尿液、血液、脓液等，除了接种普通血琼脂平板外，可同时加种一个科玛嘉大肠埃希菌显色培养基平板，对于大部分大肠埃希菌可在送检当日作出鉴定。另有研究认为该培养基上生长的菌落对药敏试验结果没有影响，因此，还可直接挑取蓝色菌落进行药敏试验。对于少数白色菌落，再继续纯化，用手工法或仪器法进行进一步的鉴定。可以大大缩短鉴定时间，减低成本，并节省劳动力。

实验结果表明，科玛嘉大肠埃希菌显色培养法对大肠埃希菌检出率灵敏度和特异度分别为96.2%和100%，与VITEK鉴定法比较两者差

异无显著性(P 0.05)，因此科玛嘉大肠埃希菌显色培养法可以应用于大肠埃希菌的检测。但显色培养基中仍有9株大肠埃希菌呈白色中带蓝菌落，有5株大肠埃希菌呈白色菌落而未被检出，可能是这些大肠埃希菌产生的β-葡苷酸酶含量较少或活性较弱，不足以游离出足够的产色基团而使菌落显色，亦可能是这些大肠埃希菌在此显色培养基中有影响β-葡苷酸酶活性的物质产生，从而干扰显色效果。

【参考文献】

[1] 李伟.大肠埃希菌临床分离株耐药性变迁[J].中国热带医学,

2007,7(6):1010-1011.

[2] 潘高辉,毛彩萍.科玛嘉尿道定位显色培养基的应用评价[J].

中华微生物学杂志,2006,18(2):140.

[3] 许宏涛,张秀珍.科玛嘉念珠菌显色培养基的应用[J].中华医

学检验杂志,2000,23(5):298.