极性物质液相方法开发策略-HILIC
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极性物质液相方法开发 策略-HILIC
刘思光 2017-11-21
极性物质液相方法开发策略-HILIC
1 极性物质色谱分析难点及策略 2 亲水作用色谱（HILIC）原理 3 亲水作用色谱柱的化学性质 4 亲水作用色谱方法开发
一、极性物质色谱分析难点及策略
极 性
1、反相色谱保留弱
物
质
反
相
色
谱
行 为
离子作用 作用，表现为离子交换形式。
吸附、氢键、偶极-偶极相互作用力。.
其他作用力
二、亲水作用色谱（HILIC）原理
三、亲水作用色谱柱的化学性质
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三、亲水作用色谱柱的化学性质
硅胶柱：可离子化， 增强阳离子保留， 减弱阴离子
HILIC色谱柱
两性离子柱： 季胺根和磺酸 根
酰胺柱：低pH下呈 阳离子特性，减弱 阳离子保留，增强阴 离子保留
二醇基柱：中低pH 下不解离，基本没 有离子作用
四、如何进行亲水作用色谱方法开发
Company LOGO
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四、如何进行亲水作用色谱方法开发
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
A great way to investigate HILIC
方 法 策 略 二
separations is to run a 5 – 40% aqueous gradient using a diol type phase with 10 mM buffer (constant ionic strength) at pH 2.5, 4, and 6 and assess the results obtained for any adjustments to pH or buffer strength that might be required to
四、如何进行亲水作用色谱方法开发
四、如何进行亲水作用色谱方法开发
四、如何进行亲水作用色谱方法开发
四、如何进行亲水作用色谱方法开发
五、HILIC方法技术障碍
平衡时间长 作用机理难以预测
样品溶解性
HILIC方法 技术障碍
谢谢
企业宗旨：造福社会 创造美好生活
创新引领 服务推动
http://lunan.com.cn
obtained suitable retention selectivity or
resolution.
四、如何进行亲水作用色谱方法开发
四、如何进行亲水作用色谱方法开发
四、如何进行亲水作用色谱方法开发
四、如何进行亲水作用色谱方法开发
缓冲盐作用
增加反离子， 改善色谱峰形
增强固定相表 面极性层的极 性，促进分析 物与极性层作 用，增加保留。
2、反相色谱不保留
一、极性物质色谱分析难点及策略
离子对色谱
亲水作用色谱
离子交换色谱
分析策略
正相色谱
二、亲水作用色谱（HILIC）原理
二、亲水作用色谱（HILIC）原理
二、亲水作用色谱（HILIC）原理
分析物在流动相和固定相表面吸附水层的溶
液液分配 解度差异。
表面硅醇基离子化与带电分析物之间的相互
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刘思光 2017-11-21
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1 极性物质色谱分析难点及策略 2 亲水作用色谱（HILIC）原理 3 亲水作用色谱柱的化学性质 4 亲水作用色谱方法开发
一、极性物质色谱分析难点及策略
极 性
1、反相色谱保留弱
物
质
反
相
色
谱
行 为
离子作用 作用，表现为离子交换形式。
吸附、氢键、偶极-偶极相互作用力。.
其他作用力
二、亲水作用色谱（HILIC）原理
三、亲水作用色谱柱的化学性质
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三、亲水作用色谱柱的化学性质
硅胶柱：可离子化， 增强阳离子保留， 减弱阴离子
HILIC色谱柱
两性离子柱： 季胺根和磺酸 根
酰胺柱：低pH下呈 阳离子特性，减弱 阳离子保留，增强阴 离子保留
二醇基柱：中低pH 下不解离，基本没 有离子作用
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四、如何进行亲水作用色谱方法开发
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五、HILIC方法技术障碍
平衡时间长 作用机理难以预测
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缓冲盐作用
增加反离子， 改善色谱峰形
增强固定相表 面极性层的极 性，促进分析 物与极性层作 用，增加保留。
2、反相色谱不保留
一、极性物质色谱分析难点及策略
离子对色谱
亲水作用色谱
离子交换色谱
分析策略
正相色谱
二、亲水作用色谱（HILIC）原理
二、亲水作用色谱（HILIC）原理
二、亲水作用色谱（HILIC）原理
分析物在流动相和固定相表面吸附水层的溶
液液分配 解度差异。
表面硅醇基离子化与带电分析物之间的相互
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