生物工程概论复习重点

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生物技术:应用自然科学及工程学的原理,依靠微生物、动物、植物体作为反应器将物料进行加工以提供产品来为社会服务的技术。

限制性内切酶:一类在细菌中发现的,能在特定位置上切割DNA分子的酶蛋白分子,存在于细菌细胞内。

发酵工程:在人工控制的条件下,通过微生物的生命活动来获得人们所需要物质的技术过程。

细胞工程:是指应用细胞生物学和分子生物学的方法,通过类似于工程学的步骤,在细胞整体水平或细胞器水平上,按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质以获得新型生物或特种细胞产品的一门综合性科学技术。

酶固定化技术:将酶固定在载体上,制备固定化酶的技术

人工种子:最外面包裹一层有机薄膜的植物胚状体。

细胞融合:将不同来源的原生质体相融合并使之分化再生、形成新物种或新品种的技术。

基因:具有遗传效应的DNA片段

基因重组:控制不同性状的基因重新组合

愈伤组织:由外植体组织增生的细胞产生的一团不定型的疏散排列的薄壁细胞。

看护培养:用一块活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞,使其持续分裂和增殖的一种培养方法。

蛋白质工程:在研究蛋白质分子结构及其与生物功能之间关系的基础上,对编码蛋白质的基因进行有目的的设计和改造,并通过基因工程等手段进行表达和分离,最终获得性能比自然界中存在的蛋白质更优良、更加符合人类社会需要的新型蛋白质。

酶工程:利用生物有机体内酶所具有的特异催化功能,借助固定化生物反应器和生物传感器等技术、装置,高效优质地生产特定产品的技术。

克隆载体:携带目的基因进入宿主细胞,并在宿主细胞内进行扩增、表达的一种工具。

质粒载体:在由限制性核酸内切酶修饰过的质粒DNA序列中插入外源的目的基因,以质粒为载体,将目的基因通过转化或转导的方法导进宿主细胞,进行重组、筛选、扩增的过程。

转化:将质粒、噬菌体DNA或以它们为载体构建的重组体导入宿主细胞,从而使宿主细胞获得新表型的过程。

转染:病毒、噬菌体或以其构建的重组体侵染进入宿主细胞的过程。

基因组文库:包含有该基因组全部DNA的克隆组,其中一个克隆是含有该基因组的一个小片段的重组子的宿主细胞。

酶分子修饰:通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变,从而改变酶的某些特性和功能的技术过程。组织工程:应用细胞生物学和工程学原理,将人体某部分的组织细胞种植和吸附在一种生物材料的支架上进行人工培养繁殖、扩增,然后移植到人体内所需要的部位,从而达到器官修复或再造的治疗目的的一种技术

胚胎工程:在动物胚胎发育过程中所进行的体外受精卵子切割、性别控制、嵌合体制作、细胞核移植、转基因操作等定向控制、改造和创造成新遗传性状的技术。

胚胎融合:将两枚或两枚以上的胚胎(同种或异种动物)的部分或全部细胞融合在一起,使之发育成一个胚胎,然后移植到受体母畜体内让其继续发育形成。

种质保存:利用天然环境或人工创造的适宜环境来保存种质资源,使个体所含有的遗传物质保存其遗传完整性,且具有高的生命活力,并能通过繁殖将其遗传特性传递下去。

基因工程:在体外将核酸分子插入病毒、质粒或其它载体分子,构成遗传物质的新组合,并使之参入

到原先没有这类分子的寄主细胞中内,而能持续稳定的繁殖。

Biotechnology:is technology based on biology, especially when used in agriculture, food science, medicine, and environment.

Plasmid:a small, circular double-stranded DNA molecule capable of independent replication within the cell

1.基因重组载体类型及各自特点

①质粒载体:大小从1kb到500kb;在细菌中的拷贝数从1个到100个;根据各不同质粒是否能共存于一个细菌细胞内,分成互不相容组;②入-噬菌体载体:线性双链DNA,全长48kb,两端各有两个碱基的单链突出末端,是天然的黏性末端,称为COS区③柯斯质粒:具有抗药性和复制起始点;具有MCS;带有cos位点,只有两个cos位点之间的DNA序列长度为野生型入-DNA大小的75%~105%时,才能被包装成具有侵染力的噬菌体。该载体本身很小,因此可携带大片段的外源基因;④丝状噬菌体载体——M13:具有丝状的蛋白质外壳,其基因为单链正链DNA

2.固定化酶的制备:吸附法,利用各种固体吸附剂将酶吸附在其表面上,而使其固定化;包埋发,将酶包埋在各种多孔载体中,使其固定化;结合法,选择适宜的载体,使之通过共价键或离子键与酶结合在一起;交联法,借助双功能试剂使酶分子之间发生交联作用,制成网状结构的固定化酶;热处理法,将含酶细胞在一定温度下加热处理一段时间,使酶固定在菌体内,而制备得到固定化菌体

3.简述发酵工程的基本过程:发酵原料的选择及预处理、微生物菌种的选育及扩大培养、发酵设备选择及工艺条件控制、发酵产物的分离提取、废弃物物的回收和利用

4.动物细胞培养的方式:悬滴培养法、旋转管培养法、灌注小室培养法、培养瓶培养法、培养板培养法

5.细胞融合的方法并举例:生物法——仙台病毒法、化学法——PEG结合高Ca2+、pH诱导法、物理法——电融合诱导法

6.生物工程和生物技术的区别:科学---探讨是什么,发现自然规律,认识自然。技术---解决如何做。工程---根据科学原理和有关技术,组合出高效、合理的一定结构的技术系统

7.基因重组操作过程:1、目的基因的制备2、载体的选择与制备3、目的基因与载体的连接,形成重组子4、将重组DNA分子导入受体细胞5、培养已转化细胞,使目的基因在其中进行复制、扩增,并将其整合到受体细胞的基因中6、重组子的筛选与鉴定

8.优良产酶菌种应具备的特点:酶的产量高、容易培养和管理、产酶稳定性好、利于酶的分离纯化、安全可靠,无毒性

9.酶分子改造的必要性:提高酶的活力、增强酶的稳定性、降低或消除酶的抗原性、研究和了解酶分子中主链、侧链、组成单位、金属离子和各种物理因素对酶分子空间构象的影响

10.植物天然抗病机制:非寄主抗性、结构屏障、防卫反应

11.植物组织脱毒方法:茎尖培养脱毒法、热处理脱毒法、微体嫁接离体培养脱毒法、珠心组织培养脱毒法

12.基因特点:不同基因具有相同的物质基础、基因是可以切割的、基因是可以转移的、多肽与基因之间存在对应关系、遗传密码是通用的、基因可以通过复制把遗传信息传递给下一代

13.现代生物生物技术的技术特征、技术内容及产品。

技术特征:以重组DNA技术为核心的一个高技术综合体系

技术内容:重组DNA及转化基因技术、细胞和原生质体融合技术、酶或细胞的固定化技术、植物脱毒和快速繁殖技术、动物和植物细胞的大量培养、动物胚胎工程技术、现代微生物发酵、现代生物反应工程和分离工程技术、蛋白质工程、海洋生物技术

产品:基因工程药物、疫苗和注射用单克隆抗体、转基因:抗虫、草病等农作物产品

14.生物技术的主要内容

基因工程:核酸的分离、提取、体外剪切、拼接重组以及扩增与表达等技术。细胞工程:细胞的离体培养、繁殖、再生、融合,细胞核、质、器的移植改建。酶工程:利用酶的特异催化功能,借助固定

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