辣根过氧化物酶
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第三步,复合物Ⅱ被还原,释放出酶:
复合物Ⅱ+AH K1 HRP+A+2H2O
在一定程度上复合物Ⅱ可自发地分解成HRP和产物(P),亦可与过
量的பைடு நூலகம்氧化氢形成无活性的复合物Ⅲ。
五、辣根过氧化酶的应用
1. 神经生物学研究:作为工具酶使用,研究不同 核团和神经元之间的相互联系。
2. 环境生物修复的应用:HRP具有极强的催化苯 酚及其衍生化合物的氧化的能力。
二、辣根过氧化酶(HRP)
1、HRP广泛分布于植物界,它是由无色的酶蛋 白和棕色的铁卟林结合而成的糖蛋白,在过氧 化氢存在时能催化苯酚、苯胺及其取代物聚合。
2、HRP的同工酶种类极多。 3、虽然它们都是以铁卟林为辅机的血红素蛋白,
但是彼此间在分子量、含糖量和等电点等方面 却不太相同。
同工酶
1、同工酶:指能催化相同化学反应,但酶本身的分 子结构组成、理化性质、免疫功能和调控特性等 方面有所不同的一组酶。
2、同工酶不仅存在于同一个体的不同组织中,也存 在于同一组织、同一细胞的不同亚细胞结构中, 甚至存在于不同发育期的组织中。
三、辣根过氧化物酶同工酶C
其中以中性辣根过氧化物酶同工酶C的含量颇为丰富, 也是应用最广泛的一种 。
HRP C单肽链是由308个氨基酸构成的,肽链上 存有二硫键(4个由两分子Cys组成的),还含有
3. 广泛用于临床化学和食品工业等领域。
4. 用于废水处理、生物传感和酶联免疫吸附分析。
酶联免疫吸附分析(ELISA)
ELISA中酶 标记抗体或抗 原上的标记酶 是整个免疫分 析体系中催化 底物,提供可 检测信号的成 分。
HRP作为免疫标记酶的检测方法
化学发光法
参考文献
[1]田婧.辣根过氧化物酶HRP-DL性质及其在环境检测中的应 用[D].2012,6.
[2]洪伟杰,张朝晖,芦国营.辣根过氧化物酶的结构与作用机 制[J].生命的化学,2005,25(1):33-36.
[3]姜子涛.辣根过氧化物酶在食品分析中的应用[D].2007,4. [4]冯春梁,赵新,王汉,李言,韩玉花. 辣根过氧化物酶H2O2
的响应[J]. 辽宁师范大学学报. 2011(04) [5]张四方,王春涛,张亚媛,安小花. 辣根过氧化物酶活性
网状为血红素; 球型为钙 原子; 螺旋型为α 螺旋; 尖头所指为β 折叠。
四、辣根过氧化物酶的作用机理
辣根过氧化物酶的作用机理可分以下几步:
第一步,形成有活性的酶一底物复合物Ⅰ:
HRP + H2O2 →
复合物Ⅰ
第二步,复合物Ⅰ转变成有活性的复合物Ⅱ:
复合物Ⅰ+AH →复合物Ⅱ+A(AH:表示还原型 氢供体)
一个盐桥(是Arg123和Asp99构成)。
HRP C二级结构
HRP C 含有两个 不同的金属中心:血 红素和两个钙原子。 血红素中铁原子的一 个轴向结合点与肽链 上His170侧链的N原 子结合, 使血红素垂 直连接在His170上。
HRP C三级结构
酶的结构总体上 看来大部分是α -螺 旋,但其中也包含一 些小的β -折叠。
辣根过氧化物酶催 化机理及应用
目录
辣根过氧化物酶的来源 辣根过氧化物酶(HRP)简介 其同工酶——HRP C 辣根过氧化物酶的催化机制 辣根过氧化物酶的应用
一、辣根过氧化酶的来源
辣根是十字花科多 年生草本植物,它 的根有辛辣味,可 用作调味品或烹饪 食用,根同时还含 有一种含量丰富的 过氧化物酶——辣 根过氧化物酶。
研究[J]. 太原师范学院学报. 2010(04)
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