粪便检验
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类”，其发病急，病程进展快，因此要求快速、准确报告。临床 上往往根据霍乱弧菌在革兰氏染色中的形态及特殊的“鱼群样” 排列，在暗视野下的快速运动及相应抗血清的制动实验等进行快 速的初步报告，再进行分离培养、鉴定来确诊。 2．其他致病菌分离培养。目前已认识到的能从粪便中发现的病原微 生物达数十种之多，如沙门氏菌属、志贺氏菌属、酵母菌以及致 病性大肠杆菌和绿脓杆菌等。要从大便标本的大量菌群中分离这 几十种致病菌，检验科一般采用选择性培养基如SS琼脂、GN增菌 液、麦康凯琼脂等。但是目前没有一种能用于所有致病菌的选择 培养基（事实上很难或不可能作到），因此临床上往往采用多种 选择性培养基联用以提高检出率。
（二）胃肠道出血的锝标的红细胞法定位诊断
1.原理：
当胃肠道出血时,锝标的红细胞或胶体随血液进入胃 肠道。
2.方法
静脉注射显像剂后以2-5分钟一帧的速度连续显像0.51小时,必要时延迟显像。但胶体不能进行延迟显像。
3.临床应用
适应于活动胃肠道出血的诊断和大致定位。急性活动 出血用锝标胶体显像,间歇出血者用锝标RBC显像。诊 断准确率在80%左右,能够探测出血率高于每分钟0.1ml 的消化道出血。 尽管同位素方法的灵敏度和特异性无可非议，甚至 还可以对出血点进行准确的定位，但临床很难接受将 一种应用放射性同位素的、操作复杂的、需要特殊仪 器的方法普遍用来进行一个没有特异性的指标的检验。
一、粪便基因筛检的分子生物学 基础
肿瘤的产生是多能干细胞向正常细胞增殖、 分化的过程中，受环境因素和遗传因素的影响， 相关基因发生改变的结果。 肿瘤细胞的基因与基因表达与正常细胞有显 著区别，因此如能检出这种基因改变就能为肿 瘤的诊断和预防提供条件。 肿瘤不是单基因疾病，肿瘤的发生发展是肿 瘤相关基因的多阶段积累的改变过程，涉及到 多种癌基因激活和多种抑癌基因失活。如能在 早期检出基因突变信息，就可以获得细胞癌变 的信号，从而对肿瘤的早期诊断和预防带来积 极意义。
粪便检验及进展
粪便常规检验方法回顾
一、目视检查
在某些疾病情况下，粪便的颜色、性状等有特定的显著 改变，这些肉眼可见的显著变化具有一定的诊断意义。 1.在胆道梗阻时，粪便因缺乏胆色素而呈白陶土样灰白 色； 2.上消化道出血时，大便可呈柏油样黑而具有特殊光泽； 3.霍乱、副霍乱时，大便呈米泔水样； 4.阿米巴肠炎时，大便往往带有果酱样的脓血； 5.肿瘤等导致下消化道出血或痔疮出血时，大便往往带 有鲜血。另外，消化不良时，粪便含较多未消化的食 物残渣； 6.蛔虫、绦虫等寄生虫感染时，有时能从粪便中看见虫 体
二、免疫学方法
免疫学方法以其特异性和灵敏度而广受临床 检验的欢迎。基于免疫反应的隐血实验方法是 当前发展最快也最有临床实用价值的隐血实验 方法。应用免疫学方法的隐血实验具有很好的 灵敏度，一般血红蛋白为0.2mg/L或0.03mg/g 粪便就可得到阳性结果，且有很高的特异性， 各种动物血血红蛋白在500mg/L、辣根过氧化 物酶在2000mg/L时不会出现干扰，因而不需控 制饮食。
• 通过电子显微镜，还可以检出粪便标本中的某 些病毒体。
三、粪便的化学检查
化学检验主要包括粪便隐血实验和胆 红素及其衍生物检验。 1.隐血实验主要用于消化道出血的诊断。 2.胆红素及其衍生物检验可用于严重腹泻、 消化道菌群大量抑制、胆道梗阻以及溶 血性疾病的辅助诊断实验。
四、大便致病菌检验
人类的肠道中有大量种类繁多的微生物，其中绝大 部分是不致病的如：各种厌氧菌、大肠埃希氏菌和肠 球菌等，只有少部分为致病微生物。大便的细菌学检 验常规的目的就是从这些大量的微生物中分离出致病 菌。 1．霍乱弧菌检验。霍乱在我国《急性传染病管理条例》中列为“甲
五、其他大便检验
1．大便的病毒检验
目前研究最多的是轮状病毒和甲型肝炎病毒的检验。 轮状病毒是我国婴幼儿秋冬季节流行性腹泻的主要致 病病原，由于这种腹泻没有特征性的病变指标，从大 便中检出轮状病毒就是重要的诊断依据。 而粪便中甲肝病毒的检出则是该病人具有传染性的 可靠依据。由于病毒体积微小、生命形式不完善，这 使得普通显微镜和无生命培养基在病毒检验中无用武 之地。 常用检验方法有：血清学方法、电镜观察与分离培 养（用动物接种、组织培养、细胞培养等）等。临床 上往往采用免疫学方法进行快速诊断，且准确性和灵 敏度都较高。电子显微镜或分离培养的方法比较费时、 费事，往往在研究中采用。
抗人血红蛋白法或抗人红细胞基质的隐血试 验目前被认为是对大肠癌普查最适用的试验。 为了使免疫学方法在检测粪便潜血时尽可能简 便，以适应大规模大肠癌普查的需要和临床快 速报告的要求.特别是消化道癌肿患者87%便隐 血为阳性。正常人24小时胃肠道生理性失血量 为0.6ml，由于免疫学方法的高度敏感性，在 某些正常人特别是服用刺激备用肠道药物后或 处于应急反应状态时也可能造成假阳性。
一、同位素方法
（一）铬（51Cr）法测定大便隐血量
1．原理：
51Cr-红细胞经静脉注射后,正常不进入消化道,消 化道出血时则进入并不被吸收,随大便排出。将大便中 的放射性与每毫升血液中放射性比较计算可求出胃肠 道出血量。
2．方法
静脉注射51Cr-RBC 7.4Mபைடு நூலகம்q后,收集72小时大便,称 重测放射性,并在开始时和收集大便结束时抽静脉血测 每毫升放射性计数。按公式计算结果。 72H出血量(ml)=大便总放射性/每毫升血放射性
包含APC基因和MCC基因的5q等位基因的缺失 占散发性大肠癌的35%。这些基因的特异性改 变可成为诊断肿瘤的标记。 应用分子生物学技术检测粪便中的相关基因 突变，则不受粪便其他物质的影响，且可以批 量筛查，可望称为大肠癌的筛选和早期诊断的 一种敏感而有效的方法。
二、粪便基因突变检测方法
目前检测粪便基因突变的方法主要有： 1.免疫组织化学检测（IHC）； 2.Southern印迹杂交； 3.DNA直接测序； 4.PCR产物单链DNA泳动变位技术和错配 PCR技术。
粪便基因检验的研究进展
近年来，大肠癌发病率有上升趋势，全世界 每年新增病例高达57万，占全部确诊癌症的4%。 大肠癌的症状体征均无特异性，致使临床上 确诊的大肠癌大部分为中、晚期，临床治疗效 果差，5年生存率极低。如能早期诊断出大肠 癌，可使90%以上的患者得到治愈。因此，大 肠癌的筛选诊断工作非常重要。 既往应用最普遍的筛选检查是大便潜血实验， 潜血在筛选大肠癌方面取得一些进展，但有很 高的假阳性率和假阴性率。纤维结肠镜检查是 检出大肠癌的可靠方法，但该方法为侵入性且 需要一定的设备和仪器，操作要求也较高，目 前尚不能用于大范围人群筛选普查。
目前认为一种肿瘤的产生需要4～5个相关癌基因的 改变；与大肠癌相关的癌基因主要有ras、c-myc、erb2等，与大肠癌相关的抑癌基因主要有APC/MCC、 DCC、p53及RB等。 在大肠癌形成过程中，ras、c-myc癌基因和APC、 MCC抑癌基因的改变是早期事件。Ras基因改变主要发 生在12、13或16密码子，大约50%的大肠癌和50%的大 肠腺癌（直径>1cm）发现有ras基因突变。 等位基因的丢失最常见于17p染色体等位基因的缺失。 虽然这种缺失在大肠腺瘤的各个时期都很少见到，但 有人发现17p等位基因丢失与腺瘤向癌转变有关。17p 染色体等位基因丢失的常见部位为p53基因，K-ras、 p53基因是人类癌症最常见的突变基因，两者的检出对 大肠癌的诊断很有帮助。
肿瘤标记物检查，如癌胚抗原（CEA）、 CA19-9及肿瘤相关抗原T、Tn及TAG-T2等，虽 然对大肠癌的临床诊断及预后判断有帮助，但 对早期大肠癌诊断的特异性及敏感性均不高。 随着分子生物学的发展，人们认识到肿瘤的 发生发展归因于相关基因突变，而粪便中的脱 落细胞包含着与大肠癌关系密切的突变基因， 粪便中基因检测可望成为筛选诊断大肠癌的新 方法。
根据文献报道，有三类抗体可用于粪便的隐血实验： 一种为抗人血红蛋白抗体，一种抗人红细胞基质抗体， 另一种为抗血液中其他成分如α1-AT、Tf、Hb-Hp等。 采用抗α1-AT、Tf、Hb-Hp等抗体的隐血实验对所有消 化道出血均呈阳性反应；而抗人血红蛋白法和抗人红 细胞基质法隐血试验主要检测下消化道出血，约有4050%的上消化道出血不能检出，原因是： ①血红蛋白或红细胞经过消化酶降解就业性或消化殆尽 已不具有原来免疫原性； ②过量大出血而致反应体系中抗原过剩出现前带现象； ③病人血红蛋白的抗原与单克隆抗体不配。
2．大便寄生虫检验
在目视检查和显微镜检查中，已经有大部分 寄生虫感染能被检出。但是，由于虫卵和虫体 在粪便中的分布高度不均一，使得目视检查和 普通的涂片镜检结果重复性很差。在高度怀疑 寄生虫感染的病例，应采用集卵法以及虫卵孵 化实验等以提高检出率和重复性。
3．大便的脱落细胞检验
在下消化道肿瘤时，肿瘤表面细胞会脱落并 随粪便排除，在粪便中发现肿瘤细胞可以确诊 某些下消化道的肿瘤。但是，由于肿瘤细胞的 脱落具有随机性，且细胞量很少、取材难，因 而检出率不高。另外，上消化道肿瘤的脱落细 胞由于经过胃肠道的消化作用，难以被检出。 这使得用常规的方法进行大便脱落细胞检验的 实用意义不大。
二、显微镜检查
• 借助普通光学显微镜，我们可以检出粪便标本 中的脂肪小滴、血细胞、真菌、某些寄生虫和 寄生虫虫卵等病理成分有。
1.脂肪小滴增多提示有肠蠕动亢进、腹泻或胰腺外分泌 功能减退等可能； 2.大量脓细胞或白细胞，提示有菌痢等感染性肠炎； 3.大量红细胞和极少量白细胞，多提示为下消化道出血 或痔疮出血； 4.大量真菌可以确诊真菌性肠炎； 5.寄生虫或虫卵可以确诊该寄生虫感染。
三、其它方法
近年来某些实验室还采用卟啉荧光法血红蛋 白定量试验，用絷草酸试剂使血红素变为卟啉 进行荧光检测，这样除可测粪澡未降解的血红 蛋白外，还可测血红素衍化物卟啉，从而克服 了化学法和免疫法受血红蛋白降解影响缺点， 可对上、下消化道出血同样敏感，但外源性血 红素、卟啉类物质具有干扰性，且方法较复杂， 故不易推广使用。
• 总的来说，大便检验的很多方法都 已经很成熟和规范化、规程化。 • 下边介绍一些比较新的检验方法在 大便检验中的应用及所带来的诊断 意义。
大便隐血实验的进展
隐血实验是指检查胃肠道隐性出血的一类实验方法。 对胃癌和大肠癌等消化道肿瘤，持续的消化道出血可 能是其早期出现的唯一特征，且大便隐血检查属无创 检查，试验方便、费用低廉，适合进行长期观察，因 而大便隐血试验则目前仍旧是早期发现的较好试验。 传统的隐血实验是利用血液中RBC的血红蛋白的亚 铁血红素具有类过氧化物酶作用，能分解H2O2为水和 活性氧而设计的简易化学试验试验。这类方法虽然成 本低廉、简单易行，但特异性差、灵敏度较低，易受 食物及服用药物成分的影响。为解决传统隐血试验的 特异性问题，人们探索了一些新的隐血试验方法，如 同位素铬（51Cr）法等同位素法和各种免疫学方法。
用IHC检测p53蛋白和用PCR-SSCP检测p53基 因突变发现，IHC对大肠癌的p53蛋白检测率为 23%，而PCR-SSCP分析技术检出p53基因突变 率为39%，两者的符合率为68%，不符合率为 32% 32%，说明p53蛋白积累不能代表有p53基因突 p53 p53 变，反之亦然。 也有人认为p53蛋白免疫组化阳性并不一定 是突变的p53积累，还可能是稳定的野生型p53 蛋白在起作用。因为当正常细胞的DNA受损害 时，野生型p53蛋白也会过量表达。在其他种 类的癌组织中也发现p53蛋白增加并没有相应 的p53基因突变。
传统的Southern印迹杂交和DNA直接测序， 虽然可准确地确定突变的类型及部位，但操作 复杂、技术要求高、时间长、费用较高，不实 用于临床筛检基因突变。 目前多采用的是免疫组织化学法检测癌相关 基因产物，如检测p53蛋白、ras基因的p21蛋 白及c-mye的p62蛋白。虽然技术简单，但有相 当一部分基因改变检测不到，且运用不同的抗 体需要不同的解释标准，临床意义也不同。
（二）胃肠道出血的锝标的红细胞法定位诊断
1.原理：
当胃肠道出血时,锝标的红细胞或胶体随血液进入胃 肠道。
2.方法
静脉注射显像剂后以2-5分钟一帧的速度连续显像0.51小时,必要时延迟显像。但胶体不能进行延迟显像。
3.临床应用
适应于活动胃肠道出血的诊断和大致定位。急性活动 出血用锝标胶体显像,间歇出血者用锝标RBC显像。诊 断准确率在80%左右,能够探测出血率高于每分钟0.1ml 的消化道出血。 尽管同位素方法的灵敏度和特异性无可非议，甚至 还可以对出血点进行准确的定位，但临床很难接受将 一种应用放射性同位素的、操作复杂的、需要特殊仪 器的方法普遍用来进行一个没有特异性的指标的检验。
一、粪便基因筛检的分子生物学 基础
肿瘤的产生是多能干细胞向正常细胞增殖、 分化的过程中，受环境因素和遗传因素的影响， 相关基因发生改变的结果。 肿瘤细胞的基因与基因表达与正常细胞有显 著区别，因此如能检出这种基因改变就能为肿 瘤的诊断和预防提供条件。 肿瘤不是单基因疾病，肿瘤的发生发展是肿 瘤相关基因的多阶段积累的改变过程，涉及到 多种癌基因激活和多种抑癌基因失活。如能在 早期检出基因突变信息，就可以获得细胞癌变 的信号，从而对肿瘤的早期诊断和预防带来积 极意义。
粪便检验及进展
粪便常规检验方法回顾
一、目视检查
在某些疾病情况下，粪便的颜色、性状等有特定的显著 改变，这些肉眼可见的显著变化具有一定的诊断意义。 1.在胆道梗阻时，粪便因缺乏胆色素而呈白陶土样灰白 色； 2.上消化道出血时，大便可呈柏油样黑而具有特殊光泽； 3.霍乱、副霍乱时，大便呈米泔水样； 4.阿米巴肠炎时，大便往往带有果酱样的脓血； 5.肿瘤等导致下消化道出血或痔疮出血时，大便往往带 有鲜血。另外，消化不良时，粪便含较多未消化的食 物残渣； 6.蛔虫、绦虫等寄生虫感染时，有时能从粪便中看见虫 体
二、免疫学方法
免疫学方法以其特异性和灵敏度而广受临床 检验的欢迎。基于免疫反应的隐血实验方法是 当前发展最快也最有临床实用价值的隐血实验 方法。应用免疫学方法的隐血实验具有很好的 灵敏度，一般血红蛋白为0.2mg/L或0.03mg/g 粪便就可得到阳性结果，且有很高的特异性， 各种动物血血红蛋白在500mg/L、辣根过氧化 物酶在2000mg/L时不会出现干扰，因而不需控 制饮食。
• 通过电子显微镜，还可以检出粪便标本中的某 些病毒体。
三、粪便的化学检查
化学检验主要包括粪便隐血实验和胆 红素及其衍生物检验。 1.隐血实验主要用于消化道出血的诊断。 2.胆红素及其衍生物检验可用于严重腹泻、 消化道菌群大量抑制、胆道梗阻以及溶 血性疾病的辅助诊断实验。
四、大便致病菌检验
人类的肠道中有大量种类繁多的微生物，其中绝大 部分是不致病的如：各种厌氧菌、大肠埃希氏菌和肠 球菌等，只有少部分为致病微生物。大便的细菌学检 验常规的目的就是从这些大量的微生物中分离出致病 菌。 1．霍乱弧菌检验。霍乱在我国《急性传染病管理条例》中列为“甲
五、其他大便检验
1．大便的病毒检验
目前研究最多的是轮状病毒和甲型肝炎病毒的检验。 轮状病毒是我国婴幼儿秋冬季节流行性腹泻的主要致 病病原，由于这种腹泻没有特征性的病变指标，从大 便中检出轮状病毒就是重要的诊断依据。 而粪便中甲肝病毒的检出则是该病人具有传染性的 可靠依据。由于病毒体积微小、生命形式不完善，这 使得普通显微镜和无生命培养基在病毒检验中无用武 之地。 常用检验方法有：血清学方法、电镜观察与分离培 养（用动物接种、组织培养、细胞培养等）等。临床 上往往采用免疫学方法进行快速诊断，且准确性和灵 敏度都较高。电子显微镜或分离培养的方法比较费时、 费事，往往在研究中采用。
抗人血红蛋白法或抗人红细胞基质的隐血试 验目前被认为是对大肠癌普查最适用的试验。 为了使免疫学方法在检测粪便潜血时尽可能简 便，以适应大规模大肠癌普查的需要和临床快 速报告的要求.特别是消化道癌肿患者87%便隐 血为阳性。正常人24小时胃肠道生理性失血量 为0.6ml，由于免疫学方法的高度敏感性，在 某些正常人特别是服用刺激备用肠道药物后或 处于应急反应状态时也可能造成假阳性。
一、同位素方法
（一）铬（51Cr）法测定大便隐血量
1．原理：
51Cr-红细胞经静脉注射后,正常不进入消化道,消 化道出血时则进入并不被吸收,随大便排出。将大便中 的放射性与每毫升血液中放射性比较计算可求出胃肠 道出血量。
2．方法
静脉注射51Cr-RBC 7.4Mபைடு நூலகம்q后,收集72小时大便,称 重测放射性,并在开始时和收集大便结束时抽静脉血测 每毫升放射性计数。按公式计算结果。 72H出血量(ml)=大便总放射性/每毫升血放射性
包含APC基因和MCC基因的5q等位基因的缺失 占散发性大肠癌的35%。这些基因的特异性改 变可成为诊断肿瘤的标记。 应用分子生物学技术检测粪便中的相关基因 突变，则不受粪便其他物质的影响，且可以批 量筛查，可望称为大肠癌的筛选和早期诊断的 一种敏感而有效的方法。
二、粪便基因突变检测方法
目前检测粪便基因突变的方法主要有： 1.免疫组织化学检测（IHC）； 2.Southern印迹杂交； 3.DNA直接测序； 4.PCR产物单链DNA泳动变位技术和错配 PCR技术。
粪便基因检验的研究进展
近年来，大肠癌发病率有上升趋势，全世界 每年新增病例高达57万，占全部确诊癌症的4%。 大肠癌的症状体征均无特异性，致使临床上 确诊的大肠癌大部分为中、晚期，临床治疗效 果差，5年生存率极低。如能早期诊断出大肠 癌，可使90%以上的患者得到治愈。因此，大 肠癌的筛选诊断工作非常重要。 既往应用最普遍的筛选检查是大便潜血实验， 潜血在筛选大肠癌方面取得一些进展，但有很 高的假阳性率和假阴性率。纤维结肠镜检查是 检出大肠癌的可靠方法，但该方法为侵入性且 需要一定的设备和仪器，操作要求也较高，目 前尚不能用于大范围人群筛选普查。
目前认为一种肿瘤的产生需要4～5个相关癌基因的 改变；与大肠癌相关的癌基因主要有ras、c-myc、erb2等，与大肠癌相关的抑癌基因主要有APC/MCC、 DCC、p53及RB等。 在大肠癌形成过程中，ras、c-myc癌基因和APC、 MCC抑癌基因的改变是早期事件。Ras基因改变主要发 生在12、13或16密码子，大约50%的大肠癌和50%的大 肠腺癌（直径>1cm）发现有ras基因突变。 等位基因的丢失最常见于17p染色体等位基因的缺失。 虽然这种缺失在大肠腺瘤的各个时期都很少见到，但 有人发现17p等位基因丢失与腺瘤向癌转变有关。17p 染色体等位基因丢失的常见部位为p53基因，K-ras、 p53基因是人类癌症最常见的突变基因，两者的检出对 大肠癌的诊断很有帮助。
肿瘤标记物检查，如癌胚抗原（CEA）、 CA19-9及肿瘤相关抗原T、Tn及TAG-T2等，虽 然对大肠癌的临床诊断及预后判断有帮助，但 对早期大肠癌诊断的特异性及敏感性均不高。 随着分子生物学的发展，人们认识到肿瘤的 发生发展归因于相关基因突变，而粪便中的脱 落细胞包含着与大肠癌关系密切的突变基因， 粪便中基因检测可望成为筛选诊断大肠癌的新 方法。
根据文献报道，有三类抗体可用于粪便的隐血实验： 一种为抗人血红蛋白抗体，一种抗人红细胞基质抗体， 另一种为抗血液中其他成分如α1-AT、Tf、Hb-Hp等。 采用抗α1-AT、Tf、Hb-Hp等抗体的隐血实验对所有消 化道出血均呈阳性反应；而抗人血红蛋白法和抗人红 细胞基质法隐血试验主要检测下消化道出血，约有4050%的上消化道出血不能检出，原因是： ①血红蛋白或红细胞经过消化酶降解就业性或消化殆尽 已不具有原来免疫原性； ②过量大出血而致反应体系中抗原过剩出现前带现象； ③病人血红蛋白的抗原与单克隆抗体不配。
2．大便寄生虫检验
在目视检查和显微镜检查中，已经有大部分 寄生虫感染能被检出。但是，由于虫卵和虫体 在粪便中的分布高度不均一，使得目视检查和 普通的涂片镜检结果重复性很差。在高度怀疑 寄生虫感染的病例，应采用集卵法以及虫卵孵 化实验等以提高检出率和重复性。
3．大便的脱落细胞检验
在下消化道肿瘤时，肿瘤表面细胞会脱落并 随粪便排除，在粪便中发现肿瘤细胞可以确诊 某些下消化道的肿瘤。但是，由于肿瘤细胞的 脱落具有随机性，且细胞量很少、取材难，因 而检出率不高。另外，上消化道肿瘤的脱落细 胞由于经过胃肠道的消化作用，难以被检出。 这使得用常规的方法进行大便脱落细胞检验的 实用意义不大。
二、显微镜检查
• 借助普通光学显微镜，我们可以检出粪便标本 中的脂肪小滴、血细胞、真菌、某些寄生虫和 寄生虫虫卵等病理成分有。
1.脂肪小滴增多提示有肠蠕动亢进、腹泻或胰腺外分泌 功能减退等可能； 2.大量脓细胞或白细胞，提示有菌痢等感染性肠炎； 3.大量红细胞和极少量白细胞，多提示为下消化道出血 或痔疮出血； 4.大量真菌可以确诊真菌性肠炎； 5.寄生虫或虫卵可以确诊该寄生虫感染。
三、其它方法
近年来某些实验室还采用卟啉荧光法血红蛋 白定量试验，用絷草酸试剂使血红素变为卟啉 进行荧光检测，这样除可测粪澡未降解的血红 蛋白外，还可测血红素衍化物卟啉，从而克服 了化学法和免疫法受血红蛋白降解影响缺点， 可对上、下消化道出血同样敏感，但外源性血 红素、卟啉类物质具有干扰性，且方法较复杂， 故不易推广使用。
• 总的来说，大便检验的很多方法都 已经很成熟和规范化、规程化。 • 下边介绍一些比较新的检验方法在 大便检验中的应用及所带来的诊断 意义。
大便隐血实验的进展
隐血实验是指检查胃肠道隐性出血的一类实验方法。 对胃癌和大肠癌等消化道肿瘤，持续的消化道出血可 能是其早期出现的唯一特征，且大便隐血检查属无创 检查，试验方便、费用低廉，适合进行长期观察，因 而大便隐血试验则目前仍旧是早期发现的较好试验。 传统的隐血实验是利用血液中RBC的血红蛋白的亚 铁血红素具有类过氧化物酶作用，能分解H2O2为水和 活性氧而设计的简易化学试验试验。这类方法虽然成 本低廉、简单易行，但特异性差、灵敏度较低，易受 食物及服用药物成分的影响。为解决传统隐血试验的 特异性问题，人们探索了一些新的隐血试验方法，如 同位素铬（51Cr）法等同位素法和各种免疫学方法。
用IHC检测p53蛋白和用PCR-SSCP检测p53基 因突变发现，IHC对大肠癌的p53蛋白检测率为 23%，而PCR-SSCP分析技术检出p53基因突变 率为39%，两者的符合率为68%，不符合率为 32% 32%，说明p53蛋白积累不能代表有p53基因突 p53 p53 变，反之亦然。 也有人认为p53蛋白免疫组化阳性并不一定 是突变的p53积累，还可能是稳定的野生型p53 蛋白在起作用。因为当正常细胞的DNA受损害 时，野生型p53蛋白也会过量表达。在其他种 类的癌组织中也发现p53蛋白增加并没有相应 的p53基因突变。
传统的Southern印迹杂交和DNA直接测序， 虽然可准确地确定突变的类型及部位，但操作 复杂、技术要求高、时间长、费用较高，不实 用于临床筛检基因突变。 目前多采用的是免疫组织化学法检测癌相关 基因产物，如检测p53蛋白、ras基因的p21蛋 白及c-mye的p62蛋白。虽然技术简单，但有相 当一部分基因改变检测不到，且运用不同的抗 体需要不同的解释标准，临床意义也不同。