长链脂肪乳剂及中_长链脂肪乳剂水解速率的比较研究

第9卷 第1期肠外与肠内营养

Vol.9 No.1

2002年1月Parenteral &Enteral N utrition

Jan.2002

#论

著#

长链脂肪乳剂及中/长链脂肪乳剂

水解速率的比较研究

吴国豪1

, Connie Jarstrand 2

, Jorgen Nordenstrom

2

(11上海中山医院普外科,上海200032; 21Department of Clinical Bacteriolog y and Surgery,Huddinge University Hospital,Karolinska Institute,Sw eden)

摘要: 目的:比较长链脂肪乳剂、物理混合的中/长链脂肪乳剂及结构脂肪乳剂的水解速率。 方法:应用1-14C 甘油棕榈酸标记的长链三酰甘油(L CT )和2,3-3

H 甘油辛酸标记的中链三酰甘油(M CT ),分别标记Intralipid,L ipo -fundin 及Structolipid,在体外添加缓冲液、脂蛋白酯酶和肝酯酶后,置37e 温箱中水浴、孵育。采用气相色谱仪测定核素标记的各种脂肪酸及三酰甘油浓度,游离脂肪酸浓度用放射性核素扫描计数测定,通过计算培养液中14C 标记的长链脂肪酸及3H 标记的中链脂肪酸分别在14C 标记L CT 及3H 标记M CT 中的比例,来计算三种脂肪乳剂的水解率。 结果:物理混合的中/长链脂肪乳剂及结构脂肪乳剂的水解程度明显高于长链脂肪乳剂,差异有统计学意义。物理混合的中/长链脂肪乳剂水解程度高于结构脂肪乳剂,但在水解程度及水解速度上却无统计学差异。 结论:物理混合的中/长链脂肪乳剂及结构脂肪乳剂的水解率明显高于长链脂肪乳剂。关键词: 结构脂肪乳剂; 长链脂肪乳剂; 物理混合的中/长链脂肪乳剂; 水解率中图分类号: R45913 文献标识码: A 文章编号: 1007-810X(2002)01-0042-03

Hydrolysis of lipid emulsions containing medium -chain and long -chain

triglyceride with lipoprotein lipase in plasma -like medium WU Guo -hao 1,Connie Jarstrand 2,Jorg en Nordenstrom 2

(1.Dep ar tment o f General Sur gery ,Shanghai Zhongshan Hosp ital,Shanghai 200032,China; 2.Dep ar tment of Clinical Bacteriology and Surgery ,H uddinge University H osp ital,K arolinska I nsti-tute,Sw eden)

Abatract: Objectives:The purpose of the present study w as to compare hydrolysis of structured lipid and physical mixed M CT /LCT w ith LCT emulsion. Methods:T he emulsions used in this study w ere 20%Intralipid,20%Lipofundin and 20%Structoliped.Glycerol tr-i [1-14C]palmitate and Glycerol tri [2,3-3H ]octanoate w ere dissolved in lipid em ulsions to g ive a specific radioactivity of 0.075L Ci/mg LCT and MCT oils.With buffer system at optimal pH ,plasma albumin,lipoprotein lipase and hepatic

lipases w ere added.Incubation w as performed in a shaking water bath at 37e for 60minutes.Rate of hydrolysis w ere initially expressed as the amount of FFA release measured by radioactivity count.Per -cent hydrolysis was calculated as 14C -labled LCFAs and 3H -labled MCFAs released relative to the initial

amount of 14C -labled LCTs and 3

H -labled MCTs in the incubation m ix ture respectively. Results:The physical mixed M CT /LCT and structured lipid emulsion w ere hy drolyzed better than pure LCT part-i cles,and more free fatty acids w ere released(P <0.05,P <0.01).There were no differences in rates of

#42#X 收稿日期: 2001-02-02

作者简介 吴国豪(1964-),男,浙江台州人,副教授,医学博士,从事普通外科专业。

hydrolysis betw een physical mixed MCT/LCT emulsion and structured lipid em ulsion(P>0.05). Conclusions:The rate of physical mix ed MCT/LCT emulsion and structured lipid emulsion hydrolysis w ere better pure than LCT emulsion,the release of total FFAs during em ulsion hydrolysis is largely de-pendent on the amount of MCTs.

Key words:Structured fat emulsion;M CT/LCT fat emulsion;LCT fat emulsion;H ydrolysis

0引言

脂肪乳剂在肠外营养支持中的重要性早已为大家所熟知,但有关脂肪乳剂在循环、组织中的代谢情况却知之尚少。脂肪乳剂不能穿过生物膜而被组织吸收、利用;静脉输注脂肪乳剂后,外源性三酰甘油首先在肝外组织的毛细血管内皮细胞中,在脂蛋白酯酶(LPL)的作用下水解释出游离脂肪酸供组织、细胞利用,其残余颗粒被肝等组织摄取,在肝酯酶(H L)的作用下分解、代谢。脂肪乳剂的水解是脂肪乳剂在血中氧化、清除的关键步骤。

外源性三酰甘油的水解除受LPL和H L的影响外,还与脂肪乳剂的组成有关。三酰甘油水解前必须从核心部位溶入颗粒表面的磷脂成分中,而溶入三酰甘油的多少依赖于脂肪酸的长度、多不饱和脂肪酸的含量及磷脂的组成。中链三酰甘油(MCT)的水溶性比长链三酰甘油(LCT)高4~5倍,因而其水解速度也应高于LCT。本研究目的是在体外比较长链脂肪乳剂、物理混合的中/长链脂肪乳剂及结构脂肪乳剂(STG)的水解速率。

1材料和方法

本研究应用的脂肪乳剂分别为20%Intralipid (Pharm acia&Upjohn,Sweden)、20%Lipofundin (B.Braum,Germany)和20%Structolipid(Pharmacia &Upjohn,Sweden),三种脂肪乳剂的组成成分见表1。通过特殊方法用1-14C甘油棕榈酸标记LCT,2, 3-3H甘油辛酸标记M CT,使得标记好的长链脂肪乳剂含6L l/ml14C标记的LCT、结构脂肪乳剂含5L l/ml14C标记的LCT及5L l/ml3H标记的MCT。

在10ml标记好的脂肪乳剂中加入3m l双重蒸馏水,振荡30min,使之分散、均匀,再加入双重蒸馏水至100ml,然后再置于超声振荡器中振荡均匀以备用。取24孔平板,每孔各加入1ml制备好的脂肪乳剂,加入0.2m l缓冲液(含0.1mol/L NaCl, 0.15mol/L Tris-HCl,1U/ml肝素,2.5L l/ml白蛋白,pH=8.5),然后再分别添加20L l配置好的脂蛋白酯酶和肝酯酶(由Novum,Karolinska Institute,Sweden提供)。密封后置37e温箱中水浴、孵育60 min,然后加入1ml0.5mol/L H Cl终止反应,再纯化、提取游离脂肪酸。

表120%Intr alipid,20%Lipofundin及20%Structolipid 组成比较

T able1Composition of20%Intralipid,20%L ipofandin and20%Stratolipid

成分/1000ml STG M CT/LCT LCT

大豆油(g)-100200

STG(g)200100-

卵磷脂(g)121212

甘油(g)2215252215

能量(mj)812810814

pH8.07.58.0

辛酸8B02730-

癸酸10B01020-

棕榈酸16B07 4.513

硬脂酸18B03 1.54

油酸18B0138.522

亚油酸18B2332052

2-亚麻酸18B3548

其他221

采用气相色谱仪测定核素标记的各种脂肪酸及三酰甘油浓度,游离脂肪酸浓度通过放射性核素扫描计数测定,Intralipid的水解率通过计算培养液中14C标记长链脂肪酸占14C标记总的LCT中的比例所得出,Lipofundin及Structolipid的水解率通过计算培养液中3H标记中链脂肪酸占3H标记M CT 比例所得出,并分别在0、5、10、20、30、40及60m in 测定两种脂肪乳剂的水解率。

所有数据均采用均数?标准差表示,应用SPSS 810统计软件建立数据库,采用变量分析软件(ANOVA)和Student t-检验作组间及组内差异分析,P<0.05作为统计学显著差异界限。

2结果

三种脂肪乳剂的水解情况见表2。由表可见,物理混合的中/长链脂肪乳剂及结构脂肪乳剂中游离脂肪酸浓度及水解率明显高于长链脂肪乳剂,差

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第1期吴国豪,等长链脂肪乳剂及中/长链脂肪乳剂水解速率的比较研究