细胞生物学植物染色体压片的制作及细胞有丝分裂的观察

核仁消失，染
色体排列在赤 道板上，此时 最有利于对染 色体进行观察 和计数。
后期
着丝点分裂， 每两个并列的 染色单体分开， 有纺锤丝牵引
分别移向两极。
ຫໍສະໝຸດ Baidu
末期
核膜、核仁重新
组成，染色体解旋，
形成两个新的子核， 两个子核间形成细
胞板，将母细胞分
成两个子细胞，此 时细胞分裂结束。
〖作 业〗
绘出所观察到的有丝分裂图象，并注明 时期及主要特征。 预处理与未预处理的分裂相有何不同为 什么？
液中，低渗处理20min，然后，蒸馏水冲洗23次；
4、解离：常用的解离方法有三种。 盐酸水浴解离法； 酶解法； 浓盐酸解离法； 将根尖置于盛有1N盐酸的离心管中，并将
其放入60℃水浴中，处理10-12min(关键)。
5、染色与压片：
将解离好的根尖迅速取出，置于吸水纸上 吸干残留盐酸，转入Schiff试剂（希夫试 剂）中，染色约5min至根尖部分变红； 取1根染色好的根尖放在载玻 片上，用刀片切去根冠,将分 生区切成3-5块； 滴加一滴改良苯酚品红，加盖盖玻片；
间期
两次细胞分 裂之间的时期, DNA复制分为 三个时期：复 制前期(G1期) 复制期(S期)、 复制后期(G2 期)，该时期 一般看不到细 胞核中的染色 体。
前期
染色体开始 螺旋化，每个 染色体由两个 相同的染色单 体组成，两者 紧密相连(光镜 下很难区别)， 细胞核呈线团 状。
中期
核膜解体，
和染色体。
三、材料和用品
材料：
洋葱、大蒜的鳞茎；或玉米、黑麦、小麦、 蚕豆的种子等。本实验以大蒜为实验材料。
用具及药品：
显微镜、镊子、刀片、解剖针、载玻片、盖 玻片、滤纸、培养皿、酒精灯、95%乙醇、浓 盐酸、改良苯酚品红等。
四、实验步骤
1、取材：选取健壮的大蒜根尖，自尖端约1cm
处，将其剪下备用；
在盖玻片上覆以吸水纸，用左手中指压住 盖玻片一角，用铅笔的橡皮头垂直敲打盖 玻片,使材料均匀散开； 将载玻片在酒精灯火焰上烘烤至微烫，将 吸水纸覆于载片上,左手压住盖玻片一角, 右手拇指垂直用力下按，将材料压成薄薄 一层后，置镜下观察。
6、镜检：
将压好的片子先置于低倍镜下（10X），找 到分生区细胞后，转换高倍镜(40X)观察； 分别找出前期、中期、后 期、末期等不同分裂期的 细胞；
实验一 植物染色体压片的制作及 细胞有丝分裂的观察
一、教学基本要求
1.本次实验通过对植物根尖的制片和观察, 要求 学生初步掌握对植物组织细胞的固定、解离和 压片方法；
2.了解有丝分裂的全过程及其染色体的动态变化 情况,掌握有丝分裂各时期的特征。
二、实验原理
有丝分裂是细胞均等增殖的过程, 是体细胞分 裂的主要方式。
在有丝分裂过程中，细胞内每条染色体都能复 制一份,然后分配到子细胞中,因此两个子细胞 与母细胞所含的染色体在数目、形态和性质均 是相同的，在各种生长旺盛的植物组织中均存 在着有丝分裂。
因此，选取植物体生长 旺盛的分生组织（如根尖、
茎尖、幼叶等），经固定、
解离、染色及压片等处理， 将细胞分散在装片中，显 微镜下，即可看到大量处 于有丝分裂各时期的细胞
2、预处理：获得较多的中期分裂相；同时使 染色体相对缩短，便于观察和计数 1）药物处理：秋水仙素、对二氯苯、8-羟基喹啉； 2）冰冻处理：将根尖浸泡于冰水之中。
3、固定或前低渗处理： 1）固定处理：将根尖放入卡诺固定液中，室温 固定3-24hr；如不立即使用，可转入70%的乙 醇中置于冰箱或阴暗处长期保存； 2）前低渗处理：将根尖放入0.075mol/L KCl溶