毛细管电泳03

Protein-macro Bio-molecules
Relative Abundance
60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 242.91 323.29 200 429.10 400 614.07 600 707.40 616.25
1304.98
771.63
738.04 1413.54 1306.07 1414.60 1541.91 1416.28 1550.78 1645.02 1790.40 1884.26 800 1000 m/z 1200 1400 1600 1800 2000
Polymer chip CE-ESI-MS system
Image of chip CE ESI MS interface, left-discharge; right-normal spray
ESI（阳离子模式） MS 测定蛋白质的分子量的原理
m M nH Mz z n n1 n2 1 M1 M n1 H n1
Agilent Flow cell
Z型长光程UV检测池结构 非柱上检测
在芯片上用狭缝去除光度检测中干扰光的影响
荧光检测系统



光路 激发光源 发射光/荧光 分光/滤光 光孔/空间滤光
荧光检测定量的根据
F 2.3Q K I 0 l C
F－荧光强度 Q－量子效率 K－荧光收集效率 －摩尔吸光系数 C－样品浓度 l－光路长度
End reห้องสมุดไป่ตู้ervoir
Substrate Main channel
Chip design with CCD
ppm级37种阴离子的CZE电导检测谱图，负高压，EOF转向
芯片电泳接触电导检测电极
A
Separation channel
B
+
ICE
HV + V ID Sensing electrodes V
Lamination layer
Chip design with universal conductivity electrodes
1.3
Potential difference/V
1.2 1.1 1.0 0.9 0.8 0 7.35 7.30 10 20 Second 30 40 50
Potential difference/V
芯片电泳LIF检测光路系统
阵列毛细管 四色荧光检 测系统
Electrochemical detection
电化学检测器
--- Amperometry --- Conductivity
安培检测系统
工作电极的电势得到控制，测量工作电极和辅助电极回路 上的电流，该电流水平与电活性组分的量相关。 三电极系统 工作电极，WE 参比电极，RE 辅助电极，AE 安培检测系统与毛细管电泳高电压的矛盾
M n2 H M2 n2
例如，马心肌红蛋白ESI谱有如下两个相邻峰，998.1，1060.5
计算结果M＝16952.0，n＝15.98
Drug-small molecules
sample-11 #12-66 RT: 0.34-1.88 AV: 55 NL: 2.11E8 T: + c ms [ 150.00-2000.00] 100 95 90 85 80 75 70 65 1131.17 1211.84 808.31 848.68 942.84 893.25 998.21 1060.52
R
I
Universal electro-conductivity detector for electrophoresis
Connect pad Double T Separation channel
Carbon electrodes
End reservoir
Substrate
Main channel
1，2－截止率光片 3，4－带通率光片
A－激发光谱 B－二像色镜（分光镜） C－荧光光谱
Spectrum data of Mercury arc lamp
可用于LIF检测的 激光光源
一种商品化的荧光检测光路系统示意图
芯片LIF检测系统
微流控芯片 透镜 光纤 滤光片 光电倍增管 半导体激光器 平面镜
Detection methods in CE

检测方法
光度检测，最常规
荧光检测，灵敏度高 电化学检测（安培，电导） 质谱，ESI
光度法定量的根据
I0 A log l C I
A－吸光度 I0－入射光强度 I－投射光强度 l－光路长度 C－样品浓度
各种UV检测池的结构；增加光程的方法
安培检测器用于糖的检测
电导检测定量的根据
A S ci i l
S－电导 A－电极面积 l－电极间距离 Ci－i组分浓度 i－i 组分极限电导
非接触电导检测器（CCD）
芯片非接触电导检测系统
Connection pad Double T
Separation channel
Electrodes
7.25 7.20 7.15 7.10 7.05 0 5 10 15 20 Time/Second 25 30 35
Electropherograms obtained by the new detection method MES-His running buffer, a) Li and amines; b) Li, Na, K ions