脑脊液蛋白质定性检查
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二、硫酸铵试验 【目的】 掌握硫酸铵试验〔罗-琼(Ross-Jonce) 试验与诺-爱(Nonne-Apelt)氏试验〕的方法。 【原理】 饱和硫酸铵溶液可以沉淀球蛋白,正 常脑脊液内球蛋白含量很低,加入饱和硫酸铵 后无白色反应环出现,为阴性;若球蛋白增加 即可在两液交界处出现白色反应环,为阳性, 此为罗—琼氏试验。除去球蛋白以后,用乙酸 煮沸法测定白蛋白,为诺-爱氏试验。
【操作】 1.加入饱和硫酸铵溶液 2.将试管内两种液体振摇混合,3分钟内 再仔细观察有无浑浊或沉淀,即诺-爱氏 试验Ⅰ相。 3.将上述混合液过滤,于滤液内滴入5% 乙酸溶液少许,使其成为酸性,再加热煮 沸,3分钟内观察有无沉淀出现为阴性, 此为诺—爱氏试验Ⅱ相 。
4.结果判断 (1)按“l”操作:3分钟内在两液交界面处出现 白色浑浊环形成,为罗-琼氏试验阳性,否则为 阴性。 (2)按“2” 操作:3分钟内如见有白色浑浊或沉 淀为诺-爱氏试验Ⅰ相阳性,表示脑脊液内球蛋 白含量增高。如仍清晰或仅显微白色,为阴性。 (3)按“3”操作:3分钟内如出现白色沉淀,为 诺-爱氏试验Ⅱ相阳性,提示脑脊液内白蛋白含 量增高,如加酸加热煮沸后仍然清晰,或显轻度 乳白色,或微白色,都属阴性结果。 5.报告方式
实验三 脑脊液蛋白质定性检查
一、潘迪试验 【目的】 掌握脑脊液蛋白质定性潘迪试 验的方法。 【原理】 脑脊液中球蛋白与苯酚结合, 形成不溶性蛋白盐而下沉,产生白色浑 浊或沉淀,浑浊的程度与球蛋白含量相 关。
【操作】 1.加试剂 2.加标本 3.观察结果 4.判断结果 5. 报告方式
ห้องสมุดไป่ตู้注意事项】 1.实验所用的试管应选择小口径的试管为宜,内径一般 为12mm左右,加入试剂后立即观察。所用的试管和滴管 必须洁净,否则易出现假阳性。 2.苯酚不纯可引起假阳性,当室温在l0℃以下时,应将 酚试剂保存在37℃温箱中,否则饱和度降低,可致假阴性 结果。 3.因穿刺出血,标本中如红细胞过多,应离心沉淀取上 清液检测;标本有血清蛋白混入可引起假阳性。 4.可在正常脑脊液或配制与正常脑脊液基本成分相似的 基础液中加不同浓度的球蛋白作考核实验的对照。 5.潘迪试验过于敏感,致使部分正常人亦出现极弱阳性 结果,应注意正确评价实验结果。
【注意事项】 1. 硫酸铵不纯可引起假阳性。 2. 余同潘迪试验。