脑脊液蛋白质定性检查

脑脊液蛋白质定性检查

潘迪试验

【目的】掌握潘迪试验的原理和方法。

【原理】脑脊液中球蛋白与苯酚结合，形成不溶性蛋白盐而下沉，产生白色浑浊或沉淀，浑浊的程度与球蛋白含量相关。

【器材】

1、小试管、试管架

2、吸管、吸耳球

3、滴管、乳胶吸头

【试剂】饱和苯酚溶液:取苯酚10ml，加蒸馏水至100ml，充分混匀，置入37℃温箱中数小时，见底层有苯酚析出，取上层饱和苯酚溶液于棕色瓶中避光保存。

【标本】新鲜脑脊液

【操作】

1、加试剂取试剂2ml于小试管中。

2、加标本用滴管垂直滴加脑脊液标本1—2滴。

3、观察结果立即在黑暗背景下肉眼观察结果。

4、判断结果

5、报告方式阳性或阴性

【参考区间】阴性或弱阳性

【注意事项】

1、器材试验所用的试管应选择小口径试管为宜，内径一般为12cm左右，加入试剂后应立即观察。所用的试管和滴管必须洁净，否则容易出现假阳性。

2、试剂苯酚不纯可引起假阳性，当室温在10℃以下时，应将苯酚试剂保存在37℃温箱中，否则饱和度降低，可致假阴性结果。

3、标本如果标本中红细胞过多，应离心沉淀取上清液检测；标本有血清蛋白混入可引起假阳性。

4、阳性对照可在正常脑脊液或配置与正常脑脊液基本成分相似的基础液中加入不同浓度的球蛋白作为阳性对照。

5、评价潘迪试验过于敏感，部分健康人可出现极弱阳性结果，应特别注意。

浆膜腔积液粘蛋白定性试验

【目的】掌握浆膜腔积液粘蛋白定性试验（李凡他试验）的原理和方法。

【原理】浆膜腔上皮细胞受到炎症等因素刺激时，分泌黏液蛋白增多。黏蛋白是一种酸性糖蛋白，等电点pH为3—5，可在稀乙酸中出现白色沉淀。

【器材】

1、100ml量筒。

2、滴管，乳胶吸头。

【试剂】

1、冰乙酸

2、蒸馏水

【标本】新鲜浆膜腔穿刺液

【操作】

1、加试剂在100ml量筒加入2—3滴冰乙酸，在加100ml 蒸馏水，充分混匀（pH3—5），静止数分钟。

2、加标本吸取浆膜腔积液靠近量筒液面垂直逐滴轻轻滴下。

3、观察结果立即在黑色背景下观察有无白色云雾状沉淀生成及其下降程度。

4、判断结果

5、报告方式阴性或阳性

【参考区间】阴性

【注意事项】

1、器材与试剂①量筒的高度与蒸馏水的量要足够。②在量筒中加入冰乙酸及蒸馏水后应充分混匀。③可根据漏出液主要成分制备基础液，在其中加入黏蛋白作为阳性对照。④保证pH3—5的酸碱度，加冰乙酸不宜过多，以免pH远离黏

蛋白的等电点产生假阴性。

2、标本浑浊浆膜腔积液经离心沉淀后，用上清液检查黏蛋白。

3、结果判断①加入标本后应立即仔细观察结果，开始浑浊明显但中途消失者为阴性。②标本中球蛋白含量增高可致试验假阳性，可进行鉴别试验，方法是将标本滴入未加冰乙酸的蒸馏水中观察，球蛋白不溶于水而出现白色云雾状沉淀。③黏蛋白定性试验常用于漏出液与渗出液的鉴别：漏出液中有微量的黏蛋白，试验多为阴性，后者多为阳性。