脑脊液蛋白电泳

1 拼音

nǎo jǐ yè dàn bái diàn yǒng

[返回]2 英文参考

cerebrospinal fluid protein electrophoresis

[返回]3 概述

中枢神经系统发生病变时（如感染、炎症、肿瘤、外伤、出血、水肿等），脑脊液中的化学成分都可能发生变化，可通过测定脑脊液中的某些化学成分的变化，作为临床诊断、治疗疾病和预后观察的依据。脑脊液蛋白成分变化就是其中之一。

[返回]4 脑脊液蛋白电泳的医学检查

4.1 检查名称

脑脊液蛋白电泳

4.2 分类

体液和排泄物检查> 脑脊液检查

4.3 化验取材

脑脊液

4.4 脑脊液蛋白电泳的测定原理

带电粒子在电场中的移动现象称为电泳。带负电荷的粒子向电场的正极移动；带正电荷的粒子则向负极移动。

蛋白电泳是利用不同蛋白的分子大小和表面电荷的差别，在直流电场中的不同泳动速度进行蛋白质分离。蛋白电泳的速度与蛋白质分子的电荷多少、分子量的大小、分子的形态及等电点有关。带电荷越多泳动越快；分子量和体积越大的蛋白分子泳动速度越慢；等电点低的蛋白分子泳动快，等电点高的泳动慢。按其泳动速度可从正极端起，依次分离出白蛋白，α1、α2、β和γ球蛋白五个组

分，它们的分子量及等电点见表1。

电泳过程中电渗流从阳极向阴极流动，与蛋白电泳的方向相反，因此泳动最慢的γ-球蛋白常位于原点，甚至移向负极。

蛋白电泳支持介质的种类近年来发展很多，如琼脂糖、聚丙烯酰胺、醋酸纤维素等，而以后者临床检验多用。醋酸纤维素薄膜分辨力较好，即使通电时间较短（一般0.5～1h），区带界限也很清楚。其另一优点为对蛋白质的吸附很少，拖尾现象轻微，洗脱后几乎可得到无色的背景。便于扫描或洗脱定量。

4.5 试剂

（1）巴比妥-巴比妥钠缓冲液（pH8.6±0.1，离子强度0.06）：称取巴比妥2.21g，巴比妥钠12.36g于500ml蒸馏水中，加热溶解，待冷至室温后，再用蒸馏水补足至1L。

（2）染色液

①丽春红S染色液：称取丽春红S0.4g及三氯醋酸6g，用蒸馏水溶解，并稀释至100ml。

②氨基黑10B染色液：称取氨基黑1080.1g，溶于无水乙醇20ml中，加冰醋酸5ml，甘油

0.5ml，使溶解。另取磺基水杨酸2.5g，溶于74.5ml蒸馏水中，再将二液混合摇匀。

（3）漂洗液

①5%（V/V）醋酸溶液：适用于丽春红染色的漂洗。

②甲醇45ml、冰醋酸5ml和蒸馏水50ml，混匀。适用于氨基黑10B染色的漂洗。

（4）透明液：称取柠檬酸（C6H6Na3O7·2H2O）21g和N-甲基-2-吡咯烷酮150g，加蒸馏水溶解，并稀释至500ml。亦可选用十氢萘或液体石蜡透明。

（5）0.4mol/L氢氧化钠溶液。

4.6 操作方法

使用醋酸纤维素膜操作法。

4.7 正常值

前清蛋白0.02～0.06；

清蛋白0.55～0.66；

球蛋白α1 0.03～0.08；

α2 0.06～0.09；

β 0.10～0.18；

γ 0.04～0.13。

4.8 化验结果临床意义

升高：前清蛋白升高，见于先天性或梗阻性脑积水，脑萎缩等；清蛋白升高，见于椎管内阻塞、脑肿瘤等；α球蛋白升高，见于脑部急性炎症（如细菌性脑膜炎、脊髓灰质炎等）；β球蛋白升高，见于小脑萎缩、脊髓小脑变性、肌萎缩侧索硬化症、动脉硬化和脑血栓等；γ球蛋白升高，见于脑瘤、多发性脑膜炎、麻痹性痴性痴呆、结节病及慢性脑膜炎等。

4.9 附注

（1）每次电泳时应交换电极，可使两侧电泳槽内缓冲液的pH值维持在一定水平。然而，每次使用薄膜的数量可能不等，所以其缓冲液经多次使用后，就将缓冲液弃去。

（2）电泳槽缓冲液的液面要保持一定高度，过低可能会增加γ-球蛋白的电渗现象（向阴极移动）。同时电泳槽两侧的液面应保持同一水平面，否则，通过薄膜时有虹吸现象，将会影响蛋白分子的泳动速度。

（3）电泳失败的原因：①电泳图谱不整齐：点样不均匀、薄膜未完全浸透或温度过高致使膜面局部干燥或水分蒸发、缓冲液变质；电泳时薄膜放置不正确，使电流方向不平行；②蛋白各组分分离不佳：点样过多、电流过低、薄膜结构过分细密、透水性差、导电差等；③染色后白蛋白中间着色浅：由于染色时间不足或染色液陈旧所致；若因蛋白含量高引起，可减少血清用量或延长染色时间，一般以延长2min为宜。若时间过长，球蛋白百分比上升，A/G 比值会下降；④薄膜透明不完全：将标本放入烘箱，温度未达到90℃以上，透明液陈旧和浸泡时间不足等；⑤透明膜上有气泡，玻璃片上有油脂，使薄膜部分脱开或贴膜时滚动不佳。

4.10 相关疾病

脊髓灰质炎、肌萎缩侧索硬化、麻痹性痴呆、痴呆、结节病