常艳-生殖毒性试验中应该注意的问题

生殖发育毒性试验设计和实施中应注意的问题

国家上海新药安全评价研究中心

常艳

2009年11月成都

汇报提纲

1

生育力和早期胚胎发育毒性试验

2

胚胎-胎仔发育毒性试验

3

围产期毒性试验

4

疫苗的生殖毒性评价

15

SD需要注意的共性问题

参考指导原则

-[ZH]GPT1-1：药物生殖毒性研究技术指导原则

[ZH]GPT11药物生殖毒性研究技术指导原则

-OECD414. Prenatal development toxicity study

-OECD415.One generation reproduction toxicity study

OECD 415. One generation reproduction toxicity study

-OECD416. Two generation reproduction toxicity study

-OECD421. Reproduction-developmental toxicity screening test -FDA-CFSAN-OPA Redbook 2000 IV_C_9_a_ Guidelines for Reproduction Studies

-FDA-CFSAN-OPA Redbook 2000 IV_C_9_b_ Guidelines for FDA CFSAN OPA Redbook2000IV C9b Guidelines for Developmental Toxicity Studies

-ICH S5A Reproduction toxicology

__p gy

-ICH_S5B_Male fertility

一、

、大鼠生育力和早期胚胎发育毒性试验•基本试验设计

交配前给药期交配期妊娠期

雄性动物

雌性动物

‐

23周

‐GD1315

一大鼠生育力和早期胚胎发育毒性试验、大鼠生育力和早期胚胎发育毒性试验•交配前给药期的确定

-一般情况：雌性-2周，雄性-4周

-根据供试品的特性，参考1个月、3个月重复

给药毒性试验结果来综合判断雄性给药期的选择

一大鼠生育力和早期胚胎发育毒性试验、大鼠生育力和早期胚胎发育毒性试验•雌性动物动情周期的预筛和评价

-分组前预筛2周，剔除动情周期异常的雌性动物

-2周给药期评价对动情周期的影响

-积累动情周期历史数据

、大鼠生育力和早期胚胎发育毒性试验一大鼠生育力和早期胚胎发育毒性试验•案例1

未开展动情周期预筛时，I段生殖毒性试验在交配期发现一只阴道闭锁动物。

一大鼠生育力和早期胚胎发育毒性试验、大鼠生育力和早期胚胎发育毒性试验•雄性动物处死解剖时间的确定

-一般情况下，在交配期结束后处死雄性动

-SD应该密切关注交配期的交配情况

-必要时修改方案，增加给药雄性动物与未给药的雌性动物

交配，以满足用最少的动物数获得最大量的信息

一大鼠生育力和早期胚胎发育毒性试验、大鼠生育力和早期胚胎发育毒性试验•案例2

I段生殖毒性试验：

高剂量组20只动物，交配期前死亡3只，交配期17只动物在交配期前5天仅12只交配成功，为70.6%。通常5天内的交配率为90%以上。此时做好延长交配期的准备，增加雄性与未交配雌性动物再次交配。但在2周内，又有4只动物交配成功，达到90%以上，所以未延长交配期。结果反映出来是交配成功所需时间明显延长。

、大鼠生育力和早期胚胎发育毒性试验一大鼠生育力和早期胚胎发育毒性试验•分开进行雄性和雌性生育力试验

-当已有的资料显示，供试品对雄性和雌性的生育力均有影

响的可能时，可以考虑分开进行雄性和雌性的生育力试验。

一、大鼠生育力和早期胚胎发育毒性试验

•精子检查

-精子活动度，精子计数和精子畸形

-人工或仪器

人工仪器

投入少投入大

主观，依赖经验客观

培训验证

-SOP及人员培训

一大鼠生育力和早期胚胎发育毒性试验、大鼠生育力和早期胚胎发育毒性试验•案例3

精子畸形培训中，精子样品冷藏过夜，第二天发现

大部分精子均出现断头。所以SOP中规定精子检查必须

当天完成。

一大鼠生育力和早期胚胎发育毒性试验、大鼠生育力和早期胚胎发育毒性试验•数据统计和报告撰写

-雌性动物孕期仅统计怀孕动物的相关数据

-母体毒性的NOAEL

雄性动物生育力NOAEL

雌性动物生育力NOAEL

雌性动物早期胚胎发育NOAEL

二

二、胚胎‐胎仔发育毒性试验

•基本试验设计

着床硬腭闭合

主要器官发生期

大鼠GD6‐15

GD0GD20

兔GD6‐18

GD0GD28

二

二、胚胎‐胎仔发育毒性试验

•预试验的重要性

-生育力和早期胚胎发育毒性试验的剂量设计可以参考一个月或者三个月重复给药毒性试验

-胚胎胎仔发育毒性试验必须进行预试验

判断母体的耐受性

判断胚胎-胎仔毒性的大小

二、胚胎‐胎仔发育毒性试验

二

•案例4

喹诺酮类抗生素，未进行预试验，参照刚结束的另外一

g g

个厂家的同类产品设置，0、100、300和1000 mg/kg四组，结果1000 mg/kg组全部为吸收胎、死胎。又追加600 mg/kg

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组，平行设部分0、100、300mg/kg组。