实验24 离体家兔肠肌运动

实验24 离体家兔肠肌运动

一、实验目的

观察某些因素对肠肌运动的影响

消化道平滑肌兴奋性较低，收缩缓慢并有自律性。消化管运动的基本形式是蠕动和紧张性收缩，小肠还有分节运动。给予离体肠肌以接近于在体情况的适宜环境，消化道平滑肌仍可保持良好的生理特性。

二、实验材料和方法

1. 材料

家兔；麦氏浴槽，超级恒温器，张力换能器，生物信号采集处理系统；台氏溶液。

2. 方法

2.1 实验系统连接和参数设置麦氏浴槽中加20ml的台氏液，调节超级恒温器的温度，使麦氏浴槽内温度恒定在38度。通气管接95%O2+5%CO2混合气体通道。同螺丝夹调节气体管道的气体流量，调节至浴槽中气泡一个个逸出为止，张力换能器与生物信号采集处理系统相连。仪器参数：

RM6420系统参数：点击实验菜单中的“肠肌记录”，仪器参数：通道时间常数为直流，滤波频率10Hz，灵敏度3g，采样频率200Hz，扫描速度1ms/div。

2.2 离体家兔十二指肠标本制备取家兔一只，用木追击其头部至昏，立即剖开腹腔，找到十二指肠大乳头处，然后取10cm左右一段置于氧饱和的台氏液中，用注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净，后将其剪成小段（约1~1.5cm），换以新鲜台氏液备用（注意操作时勿牵拉肠段以免影响收缩功能）。去小肠肠管于盛有台氏液的培养皿中，在其两端对角壁处，分别用缝针穿线并打结。注意保持肠道通畅，勿使其封闭。

2.3 标本固定肠管一端连线于浴槽固定钩上，然后放入38摄氏度的麦氏浴槽中。再将肠管的另一段系结在张力换能器的悬臂梁上，调节张力至2~3g。

2.4.1 在浴槽中滴加入Ach，观察其反应，反应稳定后换液冲洗。

2.4.2 在浴槽中滴加肾上腺素溶液后，观察其反应，反应稳定后换液冲洗。

2.4.3 在浴槽中滴加HCl，观察并记录其收缩幅度，反应稳定后换液冲洗。

2.4.4 在浴槽中滴加NaOH，记录其收缩幅度，待曲线恢复至基线或基本稳定后换液冲洗。

2.4.5 将浴槽中台氏液的温度降低到25摄氏度，观察其反应，反应稳定后换液冲洗。

2.4.6 同螺丝夹调节气体管道的气体流量，调节至浴槽中无气泡冒出为止，观察其反应并记录。

生物信号波形

加入Ach后的肠肌运动加入肾上腺素后的肠肌运动

加入NaOH后的肠肌运动加入Hcl后的肠肌运动

低温处理后的肠肌运动缺氧处理后的肠肌运动

（1）ACh可明显兴奋胃肠道平滑肌，使其收缩幅度、张力、蠕动增加。其作用机制是：Ach作用于十二指肠M受体，使平滑肌Ca2+通道开放，Ca2+内流，Ca2+胞浆浓度增加，平滑肌收缩加快加强，表现为收缩力变大，频率增强。【1】

（2）NE的作用主要在于受体的不同，肌肠细胞膜上存在α和β受体，α受体又分为α抑制型受体和α兴奋型受体。NE作用于α抑制型受体，对小肠的作用是抑制的，引起肠肌膜上一种特异性受体活化，使K+外流增多，细胞膜发生超级化，肠肌兴奋性降低，肌张力减弱。同时，NE还作用于β受体（主要是β2受体），作用机制是：①引起肠肌细胞膜中的cAMP合成增多，cAMP激活肠肌膜及肌浆网上Ca2+泵活动，使肌浆中Ca2+浓度降低；②K+及Ca2外流增加，加速膜的超极化，促进了肌肠肌张力降低。

（3）消化道平滑肌对化学刺激敏感，小肠的PH约为7.0~8.0，过高或过低的PH都会影响肌肠的收缩，滴加1滴NaOH后，台氏液的PH值处于7.8~8.0之间，处于肌肠收缩的最适PH，肌肠运动加强。其作用机制，细胞外OH-升高时，促进Ca2+通道开放，使Ca2+内流增加，Ca2+胞浆浓度增加，平滑肌收缩加快加强，表现为收缩力变大，频率增强。

（4）滴加一滴HCL后，台氏液的PH低于肌肠收缩的最适范围（7.0~8.0），收缩减弱。其机制是：当细胞外H+升高时，机制Ca2+通道开放，使Ca2+内流减少，Ca2+胞浆浓度降低；同时可干扰肌肉的代谢和肌丝滑行的生化过程：H+能与Ca2+竞争钙调蛋白的结合位点而使肌球蛋白ATP酶活性降低，使肌原纤维对Ca2+的敏感性和Ca2+从肌质网的释放减少。因此，滴加一滴HCL后，表现为平滑肌收缩力变小，处于舒张状态，收缩频率降低。【2】

（5）浸浴小肠的台氏液温度以37.5℃左右为宜，低于或高于这个温度，都会影响结果。消化道平滑肌对温度刺激敏感，将38℃的台氏液迅速换成25℃的台氏液，参与代谢活动的各种酶活性降低，使代谢水平降低，兴奋性减弱，可出现收缩曲线基线下移，频率变慢，收缩幅度变小。曲线中还出现基线先上升再下移的现象，这是因为降温本身对肠道是一种刺激，也可短暂地加强代谢活动，所以肌张力短暂升高。

（6）肌肠运动需要消耗能量，当停止通氧后，肌肠缺氧，有氧代谢障碍，产能障碍，ATP减少，肌肠运动得不到能量供给，因此，肌肠表现为平滑肌收缩力变小，收缩频率降低。

五、实验结论

一定浓度的Ach、NaOH可促进肌肠运动；一定浓度的NE、Hcl以及降低温度、停止供养可抑制肌肠运动。

六、参考文献

【1】朱大年.生理学. 第7版.北京：人民卫生出版社.2009

【2】许绍纷.神经生物学.上海：上海医科大学出版社.1999