HILIC色谱柱简介

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HILIC色谱柱简介:

1. HILIC的概念

亲水色谱(HILIC)是一种用来改善在反相色谱中保留较差的强极性物质保留行为的色谱技术。它通过采用强极性固定性,并且结合高比例有机相/低比例水相组成的流动相来实现这一目的。而这样的流动相组成尤其有利于提高电喷雾离子化质谱(ESI-MS)的灵敏度。2. HILIC的分离机制

HILIC的分离机理在目前还存在着争议,主要包括以下三个方面:(1)分配机理(2)离子交换(3)偶极-偶极相互作用。更多的试验现象则表明HILIC的保留机理包含氢键作用、偶极作用和静电作用等多种次级效应,很难将其区分开来。。。。。”

HILIC方法开发经验大披露:

1. HILIC色谱柱的以waters 公司的HILIC色谱柱为例,分为HPLC和UPLC两种类型,又分为Atlantis,Xbridge,Acquity三个品牌。填料类型分为BEH,无封尾和Amide填料三种。

2. HILIC色谱柱的应用范

普通反向色谱难以保留的物质。

3.HILIC的对化合物的保留原理:

亲水性吸附,离子交换和氢键作用。

应用小TIPS:

1.HILIC柱如何平衡?

HILIC柱使用70%的乙腈水溶液平衡。

2.HILIC柱如何保存?

HILIC柱使用90%的乙腈水溶液保存。

前言:

1. 一直使用Waters 的HILIC较多,感觉质量还行,但是要小心waters 的HILIC是分两种类型的填料的BEH HILIC和HILIC。

很多waters 的销售都不清楚之一点。但是大家一定要注意,这两款的区别是很大的,保留的效果是不同的。

2. 费罗门公司的HILIC柱,感觉是小家碧玉型的,保留能力不是太强,但是清秀文雅,峰型很好看。

3. HILIC的流动相推荐使用乙腈。

4. 推荐使用乙酸铵,这也以后再说。

5.不能使用100% 的乙腈,推荐使用到95%就行了。

不能使用60%一下的乙腈。

所以梯度范围小。但是足够用了。

因为100%的乙腈可能对HILIC的中亲水的部分不利于键合相的伸展开。使得保留性能下降。

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