交叉配血操作规程
交叉配血试验操作规程
![交叉配血试验操作规程](https://img.taocdn.com/s3/m/41536e317ed5360cba1aa8114431b90d6d858962.png)
交叉配血试验操作规程一、前期准备1.需准备的仪器和材料有:试剂盘、试剂套装、试管、离心机、试剂架、操作台、试剂粉末、负压孔盖垫、抗人免疫球蛋白(抗人IgG)、标注笔等。
2.确保实验室实验台面整洁干净,并消毒工作区。
3.检查试剂有效期,避免使用过期试剂。
4.根据需求确定所需血浆标本和酶抗全血标本。
二、实验步骤1.将所需血浆标本加入试管中,用离心机离心10分钟,以获得澄清的血浆。
2.将澄清的血浆转移到试剂盘中的相应位置,每个孔位加1mL。
3.将离心后的红细胞沉淀与抗人IgG直接接触15分钟,以充分吸附不特异抗体。
4.加入2mL盐水,搅拌均匀,离心5分钟,去除清液。
5.加入4mL盐水,振荡均匀,1分钟后离心5分钟,去除清液。
6.加入2mL盐水,振荡均匀,1分钟后离心5分钟,去除清液。
7.加入1mL试剂套装中所配的抗人IgG,共悬浮混合24次,再加入5mL盐水,振荡均匀。
8.加入2mL盐水,振荡均匀,1分钟后离心5分钟,去除清液。
9.加入2mL试剂套装中所配的抗人IgG,共悬浮混合24次,再加入5mL盐水,振荡均匀。
10.重复步骤9,使红细胞悬浮,在离心后去除清液。
三、结果判断1.观察试剂盘中悬浮混合的红细胞沉淀情况,判断是否存在凝集现象。
2.凝集现象表明供血者和受血者之间存在血型抗原-抗体反应。
四、安全注意事项1.实验操作过程中注意戴手套、口罩和护目镜,保证操作者和实验样品的安全。
2.在操作前检查仪器和试剂的完好性,并遵循试剂的保存和使用说明。
3.严禁口饮、抽烟和进食,确保操作环境清洁。
4.实验后及时清洗仪器和工作区域,妥善处理废弃物。
5.确保实验室通风良好,防止有害气体和防护物质的浓度超标。
6.在实验操作过程中,严格遵守相关的实验操作规程和实验室安全规定。
以上是交叉配血试验的操作规程,包括前期准备、实验步骤、结果判断和安全注意事项。
按照规程进行操作,可以确保实验结果的准确性和实验人员的安全。
抗人球蛋白检测卡(交叉配血)操作规程
![抗人球蛋白检测卡(交叉配血)操作规程](https://img.taocdn.com/s3/m/fe389d34591b6bd97f192279168884868662b841.png)
抗人球蛋白检测卡(交叉配血)标准操作规程一、目的:为规范交叉配血试验的技术操作,保证临床输血安全有效,特制定本规程。
二、适用范围:适用于输血科进行交叉配血试验。
三、职责:输血科技术人员负责交叉配血试验四、试剂及材料(一)试剂:抗人球蛋白检测卡(二)设备:专用离心机,专用孵育器,微量移液器(5-50ul)、普通离心机、玻璃或塑料试管、0.9%生理盐水等五、标本要求:(一)抽取受血者抗凝(抗凝剂为EDTA.K2)静脉血2-3ml,在3000r/min条件下离心5分钟备用。
(二)标本保存:血液样本必须密封,2-6℃保存7天。
(三)用于交叉配血必须是2-6℃保存3天以内的标本。
六、操作步骤:(一)交叉配血前,复检患者ABO和RH血型(二)在抗人球蛋白卡片上标明患者姓名(三)将受血者和献血者的红细胞和血清分离(四)取试管两支,用低离子溶液分别配患者和献血者0.5%-0.8%红细胞悬液(取分离血清后受血者底层红细胞8ul与0.9%生理盐水1mL配成0.8%受血者盐水悬液,取分离血清后供血者底层红细胞8ul 与0.9%生理盐水1mL 配成0.8%供血者盐水悬液)(五)交叉配血:主侧:患者血清50uL+献血者红细胞悬液50uL次侧:献血者血清50uL+患者红细胞悬液50uL(六)将卡放入37℃孵育箱15分钟(七)移出放入离心机5分钟,900rmp2分钟,1500rpm3分钟,取出观察结果。
七.结果观察:(一)阴性结果:主侧和次侧均不凝集,红细胞完全沉于凝胶管底部,配血相合。
(二)阳性结果:主侧和次侧均凝集,红细胞位于凝胶表面或中间,配血不相合。
(三)如果发生溶血,提示为阳性结果。
八.微柱卡式法凝集强度描述。
盐水介质法交叉配血试验操作规程
![盐水介质法交叉配血试验操作规程](https://img.taocdn.com/s3/m/8dd5d5a86aec0975f46527d3240c844769eaa084.png)
盐水介质法交叉配血试验操作规程一.【原理】红细胞上携带有ABO抗原,当和相应的抗体结合(如A型红细胞遇到含有抗A的B型血清)之后,就会产生肉眼可见的凝集。
所以当受血者和供血者细胞经混合并离心后,如有ABO不配合问题,就会很快显示出来,所以常称为“立即离心”(immediate spin,IS)配血试验。
用来检测供者红细胞与受血者血清之间的ABO相容性。
二.【器材】0.9%生理盐水,离心机,塑料小试管三.【操作】1.用生理盐水将受血者红细胞制备2%~5%盐水悬液。
(如取分离血清后受血者底层红细胞50ul与生理盐水1mL配成5%受血者盐水悬液)2.从供血者血液保存袋上的辫子中获取少量血样,分离血清,生理盐水三洗红细胞(取红细胞以后,往红细胞内加入无菌生理盐水混匀,离心去除残余白细胞,反复洗涤3次,去除上面的血浆和其他细胞,但是使用生理盐水洗涤红细胞时,不能用力摇晃试管,以免引起红细胞破裂,导致溶血等情况,溶血会影响红细胞的使用。
),并用生理盐将供血者红细胞制备2%-5%盐水悬液。
(如取分离血清后供血者底层红细胞50ul 与生理盐水1mL 配成5%供血者盐水悬液)3.取洁净塑料小试管2支,1支标明受血者血清(PS)+供血者细胞(DC)或主侧:另1支标明供血者血清(Ds)+受血者细胞(PC)或“次侧”。
4.按标记“主侧”管加受血者血清2滴(100uL),加供血者红细胞悬液1滴(50uL)。
“次侧”管放供血者血清2滴(100uL),加受血者红细胞悬液1滴(50uL)。
混匀,离心机离心1分钟,轻轻晃动试管,肉眼观察结果。
四.【结果判定】1.肉眼观察,如果试管中出现任何红细胞凝集或溶血,则判读为阳性,无凝集为阴性。
2.对于不能明显判定为阴性而并未达到阳性凝集的反应,可通过显微镜进一步判读,镜下有红细胞凝集的为阳性反应,无凝集的为阴性。
3.如果试验在室温进行,若有凝集产生,可置37℃放置2分钟后观察凝块是否散开,以排除冷凝集素造成的凝集影响测定结果。
交叉配血操作规程
![交叉配血操作规程](https://img.taocdn.com/s3/m/b975e4d988eb172ded630b1c59eef8c75fbf952c.png)
1.目的:检查受血者与献血者的抗原及抗体成分是否相容,以保证安全输血;
2.要求:
要求全科人员能够熟练掌握原理及操作;
3.
,
4.
4.1
4.2
4.3
4.4
5.
5.1 首先查看输血申请单,核对姓名、科室、床号等内容,无误后方可进行配血;★5.2盐水介质配血法
1首先对患者血样充分离心后,吸出血清于另一试管中并标记;
2取试管12支,分别标记患者细胞、患者抗A、抗B、抗D、A C、BC、O C、主侧、次侧、献血者抗A、抗B、献血者细胞管;对患者血样进行ABO血型正反定性和Rh血型检定,主侧管加受血者血清2滴,献血者2%~5%红细胞悬液1滴;次侧管加献血者血清2滴,受血者2%~5%红细胞悬液1滴,对献血者血辫进行ABO血型复查,以
1000g离心15秒,观察结果
6.结果判断
ABO同型配血,主侧和次侧均无凝集及溶血现象;为盐水介质配血结果阴性,可将原标本接着做聚凝胺法或抗人球蛋白法配血;
6.1聚凝胺法:具体方法见聚凝胺法;
6.2 抗人球蛋白法:具体方法见抗人球法;
7.
7.1
7.2
7.3,然后再离心;
7.4
误,,37℃或7.5
7.6 各医院前来配血时,要有输血申请单方可配血;
8.相关文件
8.1中国输血技术操作规程
9.相关表单
9.1 CB—004血型参比室实验记录单
9.2 CB—005青海省血液中心交叉配血报告单
起草人:批准人:审核人:。
护士抽交叉配血标准操作流程
![护士抽交叉配血标准操作流程](https://img.taocdn.com/s3/m/08e07d96d4bbfd0a79563c1ec5da50e2524dd12d.png)
护士抽交叉配血标准操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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交叉配血操作规程凝聚胺法
![交叉配血操作规程凝聚胺法](https://img.taocdn.com/s3/m/95426f123d1ec5da50e2524de518964bcf84d2dd.png)
交叉配血操作规程凝聚胺法交叉配血是指将一定数量的输血者的红细胞与另一组供血者的血清进行混合,通过观察混合血后是否发生凝集反应来确定血型。
交叉配血操作主要采用凝聚胺法进行,以下是交叉配血操作规程的详细步骤。
1.准备工作a.配置所需试剂,包括输入血浆、配血瓶、试剂盘、标本管、溶血酶溶液、配血盘等。
b.通过测定输血者和供血者的血型,确认双方的血型信息,并记录在相关记录表中。
2.标本采集a.采集输血者和供血者的静脉血标本,放入标本管中,避免血样凝固。
b.标本采集的相关操作要符合严格的无菌原则,确保血样的无菌及安全性。
3.标本处理a.将标本管中的静脉血标本置于冰上,在4℃下保存。
b.用溶血酶溶液处理输血者的红细胞,将3滴红细胞加入到每一个配血瓶中,轻轻摇动混合均匀。
4.试剂配置a.将配血盘中的试剂盘取出,配置新鲜的抗血型血清和已知血型标准红细胞。
5.凝胶装配a.打开凝胶洞口,将配血盘的试剂盘放入凝胶洞中。
b.确保试剂盘的位置正确,使试剂液体触及到凝胶洞的底部。
6.样本混合a.取出保存在冰上的输血者和供血者的静脉血标本,放置于试剂盘的对应位置。
b.轻轻旋转试剂盘,使血样和试剂充分混合起来,注意避免搅拌过于激烈。
7.观察凝聚反应a.在一定的时间内,观察配血盘中是否发生凝聚反应。
b.根据凝聚反应的情况,判断输血者和供血者的血型是否兼容。
8.结果判读a.若输血者的红细胞与供血者的血清发生凝聚反应,表示两者的血型不兼容,不适合进行输血。
b.若输血者的红细胞与供血者的血清没有发生凝聚反应,表示两者的血型兼容,可以进行输血。
9.记录和报告a.记录每次交叉配血的操作过程和结果,包括输血者和供血者的血型信息、配血的凝聚反应情况等。
b.报告输血者的血型结果和是否适合进行输血。
交叉配血操作规程凝聚胺法主要是通过观察凝聚反应来判定血型的兼容性,该方法操作简单、结果可靠。
但需要注意的是,交叉配血结果只能作为指导输血的参考依据,还需要综合考虑患者的临床情况和输血指征等因素,确保安全有效地进行输血操作。
交叉配血操作规程
![交叉配血操作规程](https://img.taocdn.com/s3/m/d6511d2c7f21af45b307e87101f69e314332fa0b.png)
交叉配血操作规程交叉配血是一种常用的动物繁殖方法,通过将两个不同的个体进行交叉配对,以获得具有理想遗传特征的后代。
下面是一份交叉配血操作规程,详细介绍了交叉配血的具体步骤和注意事项。
一、前期准备1.确定需要交叉配血的两个个体,分别为雄性和雌性个体。
2.对选定的个体进行健康检查和基因型鉴定,确保它们身体健康且没有携带任何遗传疾病或缺陷。
3.确定交叉配血的时间和地点,保持环境整洁,避免外部因素对实验造成干扰。
4.准备必要的实验器材和试剂,包括培养皿、显微镜、匀浆器、移液器、生理盐水等。
二、交叉配血操作步骤1.检查个体性别:使用显微镜或基因鉴定方法,确认选定个体的性别。
2.打开个体体腔:以手术刀或麻醉剂等方法,在个体体腔中打开一个小孔,以便于之后的操作。
3.收集个体血液:用匀浆器缓慢吸取个体血液,将其置于培养皿中。
4.检查血液凝固情况:观察个体血液是否凝固,若已凝固则将其舍弃,重新收集血液。
5.将雄性血液与雌性血液混合:将取自雄性个体的血液与取自雌性个体的血液混合,保持培养皿中的血液充分混合。
6.观察交配反应:观察混合后的血液是否发生凝集或聚集,若出现凝集或聚集现象,说明雄性与雌性个体之间存在交配反应。
7.鉴定交配结果:使用显微镜或试纸等方法,对交配结果进行鉴定和记录。
8.存储交配后的血液:若需要保存交配后的血液供后续研究使用,将其分装于合适的容器中,并存放于低温环境中。
9.清理实验现场:将使用过的器材和材料进行清理和消毒,保持实验现场整洁。
三、注意事项1.交叉配血操作需要在无菌环境下进行,以避免外部微生物对实验的污染。
2.个体血液的收集应该尽量避免暴露在空气中,以免造成血液的凝固或氧化。
3.操作过程中要注意个体的安全,减少对个体的伤害。
4.需要保持操作的准确性和规范性,避免实验中出现误差。
5.实验后要对结果进行及时记录和分析,以便下一步的研究。
6.学习和了解相关法规和伦理要求,确保在动物实验中符合相关规定。
柱凝集法交叉配血试验操作规程2024
![柱凝集法交叉配血试验操作规程2024](https://img.taocdn.com/s3/m/6825233c178884868762caaedd3383c4bb4cb4d0.png)
柱凝集法交叉配血试验操作规程20241.原理柱凝集法交叉配血是通过抗原-抗体在凝胶卡的反应室中反应后离心通过预先装填有抗IgG的凝胶柱。
凝集的红细胞将会被截留在凝胶柱的顶部或柱体中,而不凝集的红细胞则将在凝胶柱的底部。
2试剂柱凝集配血卡。
3.操作3.1取凝胶抗球蛋白微柱卡,标记1号(“主侧”),2号(“次侧”)。
3.2主侧:配制细胞悬液,通常清况下使用供应商提供的稀释液将献血者红细胞配成1%的悬液(根据厂商的操作说明书而定)50µ1轻轻滴人1号微管反应池中,再加25µ1受血者血清。
3.3次侧:配制细胞悬液,通常清况下使用供应商提供的稀释液将受血者红细胞配成1%的悬液(根据厂商的操作说明书而定)50µ1轻轻滴人2号微管反应池中,再加25µ1献血者血清。
3.4阴印捆:配制细胞悬液,通常情况下使用供应商提供的稀释液将受血者红细胞配成1%的悬液50µ1轻轻滴入2号微管反应池中再加25µ1AB型血清。
3.5将已加好反应物的凝胶卡放入37°C孵育15分钟。
3.6取出凝胶卡,立即用专用离心机离心,通常离心的速度被设定在1000r/min (80x g~100x g离心10分钟后,观察结果。
4结果判定4.1若对照管细胞沉淀在管底,检测管凝集块在胶上或胶中判读为阳性。
结果判断参照图示(见图1-5-1).图片4.2若对照管和检测管的细胞沉淀均在管底判读为阴性。
4.3若对照管细胞在胶上或胶中说明试验失败应重新试验。
5注意事项5.1每种柱凝集卡都分为反应室和凝胶柱两部分操作时,向反应池内要先加红细胞悬液,后加血清或抗体。
5.2不同的厂商所提供的柱凝集试验要求的细胞与血清的比例不同,一般50µ11%红细胞悬浮加25µ1血清;50µ10.8%红细胞悬浮加40µ1血清。
5.3除上述两种配血方法之外,常用的还有快速的聚凝胺介质配血、LISS 介质配血以及增强反应的酶法配血等。
交叉配血操作规程
![交叉配血操作规程](https://img.taocdn.com/s3/m/e9eb4617cec789eb172ded630b1c59eef9c79a78.png)
交叉配血操作规程交叉配血操作规程交叉配血是一项重要的医学检验技术,用于确保输血的安全和有效性。
以下是交叉配血操作的规程,以确保正确而高效的操作过程。
1.准备工作:(1)确保操作室内环境整洁、无菌,并保持适宜的温度和湿度。
(2)检查所需仪器和试剂的完整性和有效期,并进行必要的校准和验证。
(3)配备所需的个人防护装备,包括手套、口罩、护目镜和无菌衣物。
2.确定受试者和供者的身份:(1)核对受试者和供者的身份信息,包括姓名、年龄、性别和住院号等。
(2)核对受试者和供者的血样标本标签与申请单上的信息是否一致。
3.采集血样:(1)选择适当的采血方式,如肘窝采血或掌指采血。
(2)使用无菌操作的方法,采集受试者和供者的血样,遵循正确的采血顺序和技术要求。
4.制备试验材料:(1)准备所需的试剂和试管,并检查其完整性和有效期。
(2)按照操作要求,将试剂重新悬浮或稀释至规定的浓度,并确保无菌操作。
(3)标记试管上的信息以及反应区域。
5.进行试验操作:(1)取适量的受试者和供者的血液样本,加入相应试管中,并进行试管的混匀。
(2)将试管置于恒温水浴中进行适当的孵育和反应时间,注意控制温度和时间。
(3)根据试管的反应结果,判断受试者和供者的血型是否相符,即是否适宜进行输血。
6.记录和报告结果:(1)将试验结果准确记录在相应的记录表中,包括受试者和供者的血型信息和交叉配血结果。
(2)及时向临床医生报告交叉配血结果,并协助其进行输血决策和操作。
7.清理消毒:(1)完成试验后,及时清理试验台面和使用的试剂和试管。
(2)将用过的试剂和试管进行正确的分类,处理或清洗消毒。
(3)将工作台面进行清洁消毒,保持操作室内的卫生和无菌状态。
8.质量控制和评估:(1)建立严格的质量控制和质量评估制度,对交叉配血操作过程进行监控和评估。
(2)定期检查和校准操作所使用的仪器和试剂,确保其准确性和可靠性。
(3)进行内部和外部质量控制试验,并根据结果进行必要的改进和调整。
血液交叉配血试验标准操作规程
![血液交叉配血试验标准操作规程](https://img.taocdn.com/s3/m/4a8d66163a3567ec102de2bd960590c69fc3d843.png)
血液交叉配血试验标准操作规程血液交叉配血试验标准操作程序交叉配血主要是检查受血者血清中有无破坏供血者红细胞的抗体,故受血者血清加供血者红细胞相配的一管称为“主侧”;供血者血清加受血者红细胞相配的一管称为“次侧”,两者合称交叉配血。
交叉配血试验又称不配合性试验,是确保患者安全输血必不可少的试验,完整的操作规程应包括:?查阅受血者以前的血型检查记录,如与这次检查结果有所不同,应及时分析原因;?对收到的受血者血样应作ABO正反定型,Rh血型和其他血型检查以及血型抗体检测和鉴定;?选择预先进行血型检查的合格供血者作交叉配血试验。
一、配血要求1( 受血者配血试验的血样(血型复查)必须是输血前三天之内的;2(核对病人资料:核对输血申请单、受血者血样、病历三者,其内容包括:患者姓名、性别、年龄、科室床号、住院号、血型(原始血常规血型和血型复查中血型)、用血品种、用血量等,必须正确无误;3(核对血液:血液完整性、血液标签、血液质量;4(核对取血凭证:按临床(取血凭证)实际用血品种、量进行配发血;5(配血前,先复查受血者和供血者ABO血型(正、反定型)、Rh(D)血型和抗筛,并报告其结果;6(在电子病历或急诊医生工作站中,检查临床输血五项的执行情况;7(输注全血、浓缩红细胞、洗涤红细胞、浓缩白细胞等患者应进行交叉配血试验,其方法:采用盐水配血试验、凝聚胺法。
二、盐水配血试验标准操作程序【方法原理】本法是目前最常用的配血方法,可以发现临床上最重要的ABO不配合性。
当受血者血清(浆)和供血者红细胞经混合并离心后,如有ABO不配合问题,就会很快显示出来。
【标本采集和处理】1(标本采集:常规静脉采血3ml于EDTA.K2。
2(标本采取时间:要求受检者血样一定要在输血前48h(抗筛是48h)内采集,血样必须是新近的,无溶血现象。
【试剂】1(抗A抗B血型定型试剂(单克隆抗体长春博德)2(Anti-D (IgM) Biotest。
交叉配血标准操作规程
![交叉配血标准操作规程](https://img.taocdn.com/s3/m/dcdd04056fdb6f1aff00bed5b9f3f90f77c64d57.png)
交叉配血标准操作规程(一)检验目的检测供血者与受血者之间的输血相容性,包括主侧配血与次侧配血,确保输血安全。
(二)检验原理1.凝聚胺法利用多聚季胺盐类——凝聚胺携带很多正电荷,中和红细胞表面的负电荷,使红细胞之间距离减少,引起正常红细胞可逆性凝集。
无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集,当加入中和液后,则凝集消散,而抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集,则不能消散,以此来判断供、受者间血液的相容性。
2.微柱凝胶法微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂,红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后,在离心力的作用下不断向管底沉降,并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集,凝胶颗粒具有分子筛的作用,可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒,使其悬浮在凝胶上端,未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。
3.玻璃珠微柱法微柱卡的每一个微管中装填有直径均一的玻璃微珠和抗人球蛋白试剂(抗-IgG和抗补体C3),红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后,在离心力的作用下不断向管底沉降,并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集,玻璃微珠具有分子筛的作用,可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠,使其悬浮在玻璃微珠层的上端,未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。
(三)适用范围适用于手工凝聚胺法、全自动微柱凝胶法、全自动玻璃珠微柱法交叉配血试验。
(四)设备性能参数各种交叉配血检测系统性能指标参见相应检测系统说明书。
(五)器材与试剂1.器材KA-2200血清学专用离心机、B600-A型低速离心机、WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro Au-toVuelnnova全自动血型及配血系统、阅片灯箱、光学显微镜、塑料软试管、塑料硬质试管(100m m×l2mm和75m m ×l2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。
2024聚凝胺法交叉配血试验操作规程
![2024聚凝胺法交叉配血试验操作规程](https://img.taocdn.com/s3/m/ba5de07b5b8102d276a20029bd64783e09127dd2.png)
2024聚凝胺法交叉配血试验操作规程1.原理聚凝胺试验(POlybrene)使用低离子介质(IoWionicmedium,LIM)加速IgG 型抗体与红细胞之间的反应速度。
聚凝胺作为一种碱性分子可以和红细胞表面的酸性糖分子结合,在离心力的作用下聚凝胺使红细胞相互靠近,使得已经结合在红细胞表面的IgG抗体分子可以在不同的红细胞之间搭桥。
然后加入重悬液,使得聚凝胺的作用被消除。
被聚凝胺凝集起来的红细胞,此时会渐渐散开,但已经被IgG抗体分子搭桥连接起来的红细胞不会散开,以此检测血清或血浆中存在的血型抗体。
本试验具有敏感性高及快速等优点,已应用于血型检查、抗体筛选和鉴定交叉配血试验。
聚凝胺试剂目前国内市场有售。
2.试剂与器材2.1低离子介质(LIM)。
2.2Polybrene试剂。
2.32%~5%已知抗原的红细胞生理盐水悬液2.4重悬液。
3操作1.1主侧配血向试管中加入患者血清2滴和献血者2%~5%红细胞悬液1滴。
次侧配血:向试管中加入献血者血清2滴和患者2%~5%红细胞悬液1滴。
1.2立即以1000Xg离心,观察结果。
如果阴性则继续试验;如果阳性,需分析原因排除干扰后继续后续试验。
1.3加0.6mlLIM试齐I」,室温放置1分钟。
1.4加入2滴polybrene试剂,立即以IOoOxg离心1分钟,弃去试管中液体,轻摇试管,肉眼判断红细胞凝集情况。
如果有凝集出现则继续操作。
如果没有凝集出现则该试验无效。
1.5加人1滴重悬液,轻摇试管,肉眼观察结果。
4.结果判定1分钟内凝集消失为聚凝胺试验阴性,1分钟内凝集不消失为聚凝胺试验阳性。
5.注意事项5.1通常情况下,使用LISS和LIM试剂作为缩短抗原-抗体的反应时间是同时有效的。
5.2加人重悬液后,应尽快观察结果,以免弱反应消失。
5.3肝素会中和聚凝胺的作用,应避免用肝素抗凝的血样。
5.4聚凝胺方法不适合Kell系统抗体的检测,所以对阴性结果需进行抗球蛋白试验,以免漏检。
交叉配血操作规程(凝聚胺法)
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交叉配血操纵规程(凝集胺法)之袁州冬雪创作一.目标规范交叉配血试验操纵;包管临床用血的平安性和有效性.二.适用范围适用于临床配血标本.三.职责血库技术人员负责交叉配血试验四.所需资料和设备资料:凝集胺试剂盒、患者血标本、生理盐水、小试管、滴管、献血者标本.设备:普通离心机、血型血清学专用离心机、37℃恒温水浴箱、显微镜五.操纵步调1.凝集胺法(1)以生理盐水配制供、受者3%~5%红细胞悬液.(2)取试管3支,标识表记标帜主、侧和自身对照主侧加受血者血浆(血清)2滴,献血者3%~5%的红细胞悬液1滴;次侧加献血者血浆(血清)2滴,受血者3%~5%的红细胞悬液1滴;自身对照管加患者血浆(血清)2滴和患者3%~5%的红细胞悬液1滴混匀.(3)以1000r/分钟离心1分钟,观察盐水介质实验成果.(4)每管各加低离子介质(LIM)溶液0.7ml,混合平均,室温孵育1min.(5)每管各加2滴凝集胺溶液,混匀后静置15s.(6)1000r/分钟离心1分钟,倾去上清液,不要沥干.(7)轻轻摇动试管,目测红细胞有无凝固,如无凝固,必须重复步调(3)-(6)(8)加入2滴重悬液,并轻轻混合,观察成果.(9)成果断定如凝离合开,则为凝集胺引起的非特异性凝固,判为阴性成果,配血相合;如凝集不散开,则为抗原抗体连系的特异性反应,判为阳性成果,配血不相合,如肉眼观察凝固强度弱,可进一步在显微镜下观察有无凝固.成果断定要求在1min内完成,最长不要超出3min,因为弱凝固的阳性成果,超出1min可以变成阴性.六.注意事项1.配血技术①惯例配血技术:选择的技术不但要能检查出不配合的IgM抗体,还必须能检查出尽量多的不配合的IgG抗体,最大限度地减少抗体的漏检.今朝认为盐水法交叉配血是输血前检查必不成少的试验,首先采取盐水法停止交叉配血,再采取可以检出IgG类抗体的方法停止交叉配血;②特殊配血技术,如:预温配血技术:主要用于处理无临床意义的冷抗体引起的交叉配血不配合.2.主侧交叉配血不相合的原因①患者或供者ABO血型定型不正确,或二者的ABO血型不配合;②患者血清中存在同种抗体,与供者红细胞上的相应抗原起反应;③患者血清中存在自身抗体,与供者红细胞中的相应抗原起反应;④供者红细胞上已经包被了抗体,导致抗球蛋白阳性;⑤患者血清不正常,如白蛋白/球蛋白比例不正常引起缗钱状假凝固,血清中存在高分子聚合物的血浆扩容剂引起假阳性(用盐水添加试验来处理);⑥试验系统被污染.3.次侧交叉配血不相合的原因①供者血清中存在针对患者红细胞抗原的抗体;②患者与供者的ABO血型不相合;③患者红细胞已经包被了抗体,直接抗球蛋白试验阳性.。
交叉配血试验操作规程
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交叉配血试验操作规程实验目的:确定供血者与受血者之间的血型是否相容,以保证安全有效地进行输血。
实验材料与试剂:1.供血者和受血者的全血样本。
2.ABO血型试剂盒,包括抗A、抗B、抗Rh(D)血清。
实验步骤:1.准备工作:a.标记试管,分别标明供血者和受血者的编号。
b.使用洁净试管架,确保试管没有交叉污染。
c.佩戴防护手套和口罩,以防止交叉污染和呼吸道感染。
2.预处理全血样本:a.使用无菌注射器,各取一定量供血者和受血者全血样本,将样本分别转移至标记好的试管中。
b. 转移后,每个试管中的全血样本约为1ml。
3.加入抗A血清:a.取一滴抗A血清,滴于供血者全血样本所在的试管中。
b.缓慢地旋转试管,以使抗A血清与供血者全血充分混合。
c.观察试管中的反应,如果出现凝集现象,则表示供血者为A型血。
4.加入抗B血清:a.与步骤3相同,取一滴抗B血清加入供血者全血样本所在的试管中。
b.缓慢地旋转试管,以使抗B血清与供血者全血充分混合。
c.观察试管中的反应,如果出现凝集现象,则表示供血者为B型血。
5.加入抗Rh(D)血清:a.与步骤3相同,取一滴抗Rh(D)血清加入供血者全血样本所在的试管中。
b.缓慢地旋转试管,以使抗Rh(D)血清与供血者全血充分混合。
c.观察试管中的反应,如果出现凝集现象,则表示供血者为Rh(D)阳性。
6.重复步骤3-5,对受血者的全血样本进行相同的处理。
观察试管中的反应,得出受血者的血型。
7.判读血型相容性:a.对比供血者和受血者的血型结果,判断是否相容。
如供血者为A型血,受血者为B型血,则血型不相容。
b.如果供血者和受血者的血型相同或相容,则可以进行输血。
8.清洗试管和工作台:a.使用适当的消毒剂清洗使用过的试管。
b.使用消毒剂擦拭工作台面,确保无交叉污染。
注意事项:1.操作过程中要避免交叉污染,使用无菌操作技术。
2.试剂和样本的使用要按照规定的剂量和比例。
3.所有试验应在合适的温度下进行,通常为25-30摄氏度。
S013交叉配血试验标准化操作规程(盐水法)
![S013交叉配血试验标准化操作规程(盐水法)](https://img.taocdn.com/s3/m/b9562521a517866fb84ae45c3b3567ec102ddc9e.png)
S013交叉配血试验标准化操作规程(盐水法).docS013交叉配血试验标准化操作规程(盐水法)1. 引言本文档旨在提供交叉配血试验(盐水法)的标准化操作规程,确保试验的准确性和一致性,保障患者输血安全。
2. 目的规范交叉配血试验的操作方法。
确保试验结果的准确性和可靠性。
为临床输血提供科学依据。
3. 适用范围本规程适用于医疗机构中进行交叉配血试验的所有工作人员。
4. 术语和定义交叉配血试验:指在输血前,对献血者和受血者的血液进行相容性测试的过程。
盐水法:一种常用的交叉配血试验方法,通过盐水介质检测红细胞凝集反应。
5. 试验原理简述盐水法交叉配血试验的基本原理,包括红细胞凝集反应和抗体检测等。
6. 试验材料和设备6.1 试验材料新鲜抗凝血(EDTA或肝素)生理盐水标准血清学试剂6.2 试验设备离心机显微镜试管和试管架移液器和吸头7. 操作步骤7.1 样本准备收集献血者和受血者的血液样本。
离心分离血浆和红细胞。
7.2 盐水介质制备按照标准比例制备生理盐水介质。
7.3 主侧试验将受血者血清与献血者红细胞混合。
离心观察是否有凝集反应。
7.4 次侧试验将献血者血清与受血者红细胞混合。
离心观察是否有凝集反应。
7.5 结果判断根据凝集反应的有无和强度判断试验结果。
8. 结果记录和报告详细记录试验过程和结果。
按照规定格式编写试验报告。
9. 安全和质量控制9.1 安全措施遵守实验室安全规程。
采取必要的个人防护措施。
9.2 质量控制定期进行试验方法的验证和评估。
记录和分析试验误差。
10. 附录10.1 试验操作流程图提供交叉配血试验操作的流程图。
10.2 试验记录表格提供试验记录的示例表格。
10.3 试验报告模板提供试验报告的示例模板。
11. 结论本规程为交叉配血试验(盐水法)提供了一套标准化的操作流程,有助于提高试验的准确性和一致性,确保患者输血安全。
交叉配血操作规程
![交叉配血操作规程](https://img.taocdn.com/s3/m/100df6aa80c758f5f61fb7360b4c2e3f56272548.png)
交叉配血操作规程交叉配血是一种常见的医学操作,主要用于确定血液供应者与受血者之间的血型是否相容。
在进行交叉配血之前,需要先进行ABO血型鉴定和RH因子检测,从而确定受血者与供血者的血型。
交叉配血的操作规程如下:1.准备工作:在进行交叉配血之前,需要准备好一系列的试剂和设备。
试剂包括正反A、B血清和RH血清,设备包括血凝管、离心机等。
2.受血者样本采集:首先,采集受血者的静脉全血样本。
采血时要注意操作的无菌性,避免交叉感染的发生。
采集的样本应放入无抗凝剂的血凝管中,用枝式滴管将血样加入试管中。
3.室温离心法:将采集到的受血者全血样本离心5分钟。
离心后,血液分为细胞层、凝集层和血浆。
血浆层较为清亮,可由离心机中小孔取出,放入另一无菌试管中。
4.ABO血型鉴定:取一定量的受血者血浆,分别加入正反A血清和B血清。
轻轻摇晃试管,观察是否出现凝集现象。
若加A血清后出现凝集,说明受血者为A血型;若加B血清后出现凝集,说明受血者为B血型;若两者都出现凝集,说明受血者为AB血型;若都不出现凝集,说明受血者为O血型。
5.RH因子检测:取一定量的受血者血浆,加入RH血清中。
轻轻摇晃试管,观察是否出现凝集现象。
若加RH血清后出现凝集,说明受血者为RH阳性;若不出现凝集,说明受血者为RH阴性。
6.供血者样本采集:按照相同的方法采集供血者的全血样本,并离心分离血浆。
7.交叉配血操作:将供血者的血浆少量加入受血者的血浆中,轻轻摇晃试管。
观察是否出现凝集现象。
若出现凝集,说明供血者的血浆中存在对受血者的免疫反应,不适合进行输血操作。
若不出现凝集,说明供血者与受血者的血型相容。
8.结果判断与报告:根据交叉配血的结果,判断供血者与受血者之间的血型是否相容。
将结果记录在交叉配血报告中,并进行签字确认。
医院交叉配血试验标准操作规程
![医院交叉配血试验标准操作规程](https://img.taocdn.com/s3/m/1ea13cff0875f46527d3240c844769eae009a319.png)
交叉配血试验标准操作规程1、目的为规范交叉配血试验的技术操作,保证临床输血安全有效,依据《输血实验室管理程序》4.1.7(2)条款的要求制定本规程。
2、适用范围适用于医疗机构输血科(血库)进行交叉配血试验。
3、职责医疗机构输血科(血库)技术人员负责交叉配血试验。
4、原理使受血者血清(血浆)和红细胞分别与献血者红细胞和血清(血浆)反应,采用盐水介质法、凝聚胺法、抗球蛋白法及微柱凝胶法等检测供、受者之间是否存在相应的红细胞血型抗原抗体反应,判定受血者与献血者血液之间红细胞血型免疫的相容性。
5、所需设备和试剂5.1设备普通离心机,血型血清学专用离心机,电热恒温水浴箱,普通显微镜。
5.2试剂凝聚胺试剂盒,抗球蛋白试剂。
6、检测环境条件6.1室温应控制在18~27℃,湿度应保持30%~70%。
7、步骤与方法7.1受血者、献血者血标本处理7.1.1将受血者血标本离心分离血清(血浆)及红细胞,取2支试管,分别标记受血者的唯一性标识,吸取离心后血标本血清(血浆)到一支已标识的试管内;吸取红细胞30μl 到另一支已标识的试管内,加生理盐水1ml稀释成3%的红细胞悬液。
7.1.2受血者ABO和RhD血型鉴定,执行《试管法鉴定ABO和RhD血型标准操作规程》。
7.1.3受血者红细胞不规则抗体筛选及鉴定,执行《红细胞不规则抗体筛选及鉴定标准操作规程>。
7.1.4根据受血者ABO和RhD血型鉴定结果选择ABO和RhD相容血液成分,剪取献血者血袋上一段留样管,取1支试管标记献血者唯一性标识,将剪下的血标本盛入标识的试管中,离心分离血清(血浆)及红细胞;另取2支试管分别标记献血者唯一性标识,吸取献血者血标本血清(血浆)到一支已标识的试管内;吸取献血者血标本红细胞3μl到另一支已标识的试管内,加生理盐水1ml稀释成3%的红细胞悬液。
7.1.5复检献血者ABO和RhD血型。
7.2盐水介质法交叉配血试验7.2.1取试管2支,分别标记为“主侧”、“次侧”,主侧加受血者血清(血浆)2滴、献血者3%红细胞悬液1滴,混匀;次侧加献血者血清(血浆)2。
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交叉配血操作规程
[原理]
凝聚胺试验是利用低离子溶液促进红细胞抗原与血清(浆)中的抗体反应,再利用凝聚胺引起红细胞间非免疫性的凝集,让已有抗体(IgG)反应的红细胞间的距离缩短。
距离缩短后更能引起已反应的抗体和别的红细胞产生反应形成免疫性的凝集。
而由凝聚胺所引起的非免疫性红细胞凝集反应可被后来加入的复悬液所中和而散开,如有免疫反应,凝集就不会散开,为阳性反应。
如没有免疫反应,凝集就会散开,为阴性反应。
交叉配血试验是在盐水介质的基础上加入凝聚胺,检测供患之间是否相合,患者血清(浆)中是否含有具临床意义的红细胞异体抗体。
[试剂组成]
1.洁净试管,离心机,显微镜。
2.0.85% 氯化钠溶液:准确称取氯化钠(AR)8.5 g,用蒸馏水溶解并定容至 1000 ml。
试剂启用后,有效期为:二周。
3.凝聚胺试剂
①低离子介质溶液:含葡萄糖,乙二胺四醋酸-2 钠及稳定剂。
②凝聚胺溶液:含凝聚胺,氯化钠及稳定剂。
③复悬液:含柠檬酸钠,葡萄糖及稳定剂。
④阳性对照血清:含抗D 血清,氯化钠及稳定剂。
4.抗人IgG 血清。
[试剂保存和稳定性]
1.凝聚胺试剂须保存在2-25℃。
2.有效期内可使用。
3.抗人IgG 血清低温冰箱保存。
复溶后放2—4℃冰箱保存。
[标本收集和准备]
1.抽取受血者静脉血3-4ml(操作中小心防止红细胞破损),放入一已贴标签干燥洁净的试管中为血清管(也可用EDTA-K2 抗凝血液),并将注射器中余下的少量血液配成2%红细胞生理盐水悬液,放入另一已贴标签干燥洁净的试管中为红细胞悬液管。
以上标本有效期为三天;若受血者抽取标本后,输用过血液或血液制品,且输用时间超过12 小时的,必须重新采集标本。
2. 2% 红细胞悬液:用生理盐水洗涤红细胞3 次。
根据下表进行红细胞悬液的配制。
悬液浓度(%)压积红细胞(滴)盐水(滴)
----------------------------------------------------------------
2 1 2ml(40)
5 1 0.8ml(16)
----------------------------------------------------------------
[操作步骤]
1.取出3 支试管分别标记主,次及对照测试:
主测管:加入病人血清(浆)2 滴,再加入供血者3-5%红细胞悬液1 滴,次测管:加入供血者血清(浆)2 滴,再加入病人3-5%红细胞悬液1 滴,对照管:加入2 滴*4 阳性对照血清,再加入供血者3-5%红细胞悬液1 滴。
2.各加入①低离子介质溶液0.6ml,轻轻混匀,于室温下静置1 分钟。
3.再滴入2 滴②凝聚胺溶液,轻轻混匀,于室温下静置15 秒。
4.3400rpm 离心1 分钟,然后把上清液倒掉,管底保留大约0.1ml 的液体。
5.目测红细胞有无变成凝块,如果没有凝块,则必须重做,(请看注意事项6)。
重做后仍然没有凝集现象出现,可能试剂失效。
6.各滴入2 滴③复悬液,并轻轻混匀,观察结果。
若为凝聚胺引起的非免疫性凝集,应该在1 分钟内散开;若是异体抗体所引起的免疫性凝集,则不会散开。
7.倒在玻片上用显微镜观察有无凝集。
如有凝集反应,表示不合,此供血者的血液不适合病人使用;如无凝集反应,表示供血者的血液适合病人输注。
[结果判断]
1.ABO 同型配血,主侧和次侧均无溶血及凝集表示无输血禁忌,可以输血。
2.如急需输血但一时无同型血液,作异型配血时(指O 型血输给A,B 或AB 型,或A,B 型血输给AB 型时),主侧无溶血及凝集,但次侧必然有凝集或溶血。
[质量控制与附注]
1.试剂超过有效期或有污染现象出现,即不可使用,必须更换。
2.检验人员必须熟悉操作步骤,尤其是凝聚胺所引起的凝集反应,更要特别注意。
3.中国人极少有Anti-K 抗体,但其他人种比例较高,尤其是白种人,所以,当病人是其他人种时,为求安全起见,加做辅助性抗球蛋白试验。
4.加做辅助性抗球蛋白试验是为了增加检测Anti-K 抗体的敏感度,对检测其他的抗体无帮助。
所以,除非想进一步检测Anti-K 抗体,否则不须做到辅助性抗球蛋白试验。
5.在冬天气温极低的情况下,操作交叉配血试验,某些病人血清(浆)中可能含有寒冷凝集素等因子而导致假阳性的结果出现。
若有此怀疑,请再滴入2 滴*3 复悬液,将试管立即置入37 C 水浴中轻轻混匀,并在一分钟内观察结果。
6.如果不凝集,可能是标本中含有肝素。
如洗肾病人的标本或其他干扰存在,此时需多加2-4 滴*2 凝聚胺溶液以中和肝素或干扰因子。
7.0.85% 氯化钠溶液启用时,及时贴上启用时间;超期的溶液要及时更换。
使用过程中,怀疑污染到溶液时或配血结果可疑时,必须更新该溶液。
8.受血者标本有效期为三天;若受血者抽取标本后,输用过血液或血液制品,且输用时间超过12 小时的,必须重新采集标本。
2%红细胞悬液要求准确,必要时用生理盐水洗涤红细胞后重新配制。
9.进行交叉配血前逐项核对输血申请单、受血者和供血者血样,复查受血者和供血者ABO 血型(正、反定型),并常规检查患者Rh(D)血型,正确无误时可进行交叉配血。
10.操作过程中,①必须先排好试管,并做好标记;②每进行一步操作,必须进行一次核对。
11.结果判断必须先肉眼观察,再进行显微镜观察。
注意观察弱凝集和排除非特异性凝集。
12.交叉配血试验中发现有不配合时,首先应考虑受血者和供血者的ABO 血型和Rh(D)血型定型是否错误,必要时进行抗体筛检。
其次,应注意有无特异性同种抗体,特异性未知的同种抗体存在,或者患者的血清在室温37℃或抗球蛋白血清中凝集所有的其他红细胞,造成交叉配血的困难,应进一步作有关试验进行鉴定。
13.两人值班时,交叉配血试验由两人互相核对;一人值班时,操作完毕后自己复核,并填写配血试验结果。
(按“交叉配血核对制度”进行)。
14.各供血者间需进行交叉配血;已经输注的血液不足24 小时的,供血者间也需进行交叉配血。
15.交叉配血后的所标本加盖后,冰箱保存不少于7 天。