脱细胞基质制备流程
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
脱细胞基质制备流程
脱细胞基质是一种制备方法,可以用于制备生物医学领域中人造细胞外基质,这种基质被广泛用于细胞培养,药物筛选和组织工程。下面我们来详细讲解脱细胞基质制备流程。
1. 采集组织
首先需要从动物或人类的生物组织中采集样本。这种组织可以是肝、肺、肾、骨等各种细胞密集的组织。组织的选择要根据使用的实验目的来确定。
2. 制备组织切片
采集到组织后需要制备组织切片。首先将组织样本放在一张清洁的滤纸上,去除组织表面的杂质和血液。然后使用切片刀将组织切成约2—3毫米的小块。小块中最好没有骨头或其他硬质材料。接着将这些小块放入一个带有透明盖的玻璃离心管中,并加入适量的生理盐水或PBS缓冲液使其浸泡,以防止细胞外基质的硬化。
3. 使用离心机离心分离细胞
接下来使用离心机离心分离细胞。使样本旋转离心,离心时需要用适当的力和速度使组织中的细胞被分离。通常,用高速离心一段时间后,将上部包含液体的管子从离心机中取出,把下部的细胞沉淀留下。细胞沉淀通常被称为细胞屑。
4. 去除细胞残渣
将细胞屑转移到新玻璃离心管中,加入一定量的溶液,其中溶液的浓度和组织的类型相关。然后使用离心机离心,去除细胞屑,留下含有细胞外基质的清液。
5. 除去细胞外基质中的细胞膜和核质
使用适当的溶液和方法,如酵素消化和超声波分离等,去除细胞外基质中的细胞膜和核质。移除细胞膜和核质的过程叫做脱细胞化。
6. 醋酸冻干
将脱细胞化后的细胞外基质置于干燥器中。在干燥期间,需要加
热一段时间并通风使其干燥。干燥后的细胞外基质成为醋酸冻干粉末,可直接用于细胞培养。
7. 研磨
对于某些需要特殊处理的实验要求,可以先将醋酸冻干的基质研
磨成不同的粒度,以便于后续使用。
总之,以上便是脱细胞基质制备流程的具体步骤。这种基质制备
的好处是可以制备生长因子、细胞外基质和细胞黏附分子的复合材料,从而将其与细胞相结合并改善组织培养的效果。这种制备方法可以广
泛应用于组织工程、细胞培养和药物筛选等领域。