酶联免疫反应常用底物

酶联免疫反应常用底物

辣根过氧化物酶HRP底物

辣根过氧化物酶（Horseradish Peroxidase, HRP）具有分子量小，标记方法简单，性质稳定等优点，是临床检验试剂中常用的酶。该产品广泛用于各类生化检测项目及免疫类（ELISA）试剂盒。中华试剂网辣根过氧化物酶的底物种类丰富，可满足不同的实验需求。

■ HRP的发色底物

辣根过氧化物酶发色底物为过氧化物和供氢体（DH2），其真正底物是H2O2，但人们习惯把供氢体称为底物或统称供氢体底物。在ELISA中常用的供氢体有以下几种：

1、OPD是ELISA技术中应用较多的供氢体，酶作用后显黄色（最大吸收波长为492 nm），其灵敏度高，测定方便。

2、TMB是近年来常用的一种供氢底物，经酶作用后显天蓝色，目测对比度鲜明，加酸终止酶反应后变黄色（最大吸收波长为450 nm），易比色定量测定。

3、DBA供氢底物，其反应产物为不能溶解的棕色吩嗪衍生物，可用不同光镜观察。此种多聚物能被还原和

5-

氨基水杨酸5-Aminosalicylic acid, %

棕色、可

溶性89-57-6

g

100

g

500

g

2,2'-二氮-双

(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)铵盐Azinobis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic

acid-2NH4-salt

绿色、可

溶性

30931-67-01 g

3-氨基-9-乙基

咔唑3-Amino-9-ethylcarbazole, AEC

红色、可

溶性

132-32-1

5 g

25

g

4-氯-1萘酚Chloro-1-naphthol

蓝色、可

溶性604-44-4

25

g

※小贴士：氧化物、硫化物、氟化物及叠氮化物等可抑制HRP的活性，故勿用这类试剂作为防腐剂。■ HRP的发光底物

鲁米诺（3-氨基邻苯二甲酰肼，Luminol）或其衍生物如异鲁米诺（4-氨基邻苯二甲酰肼，Isoluminol），是一类重要的发光试剂。用HRP标记抗体，进行免疫反应后，利用鲁米诺作为发光底物，在HRP和起动发光试剂(NaOH+H2O2)作用下，鲁米诺发光，发光强度依赖于酶免疫反应物中酶的浓度。反应过程如下图所示：

产品编号中文名称英文名称CAS纯度包装

328061

鲁米诺

Luminol

521-31-3

98%

5 g 25 g

分子式：C 8H 7N 3O 2 分子量：

熔点：194-195℃

储存条件： 2-8°C

产品编号

中文名称

英文名称

CAS 号

纯度

包装

A5300 异鲁米诺

Isoluminol

3682-14-2

98%

1 g

10 g

分子式：C 8H 7N 3O 2 分子量：

熔点：194-195℃

储存条件： 2-8°C

■ 配套产品

中文名称

英文名称

CAS 号

纯度

包装

4-碘苯酚

4-Iodophenol

540-38-5

99%

5 g

25 g 100 g 四苯基硼酸钠

Sodium tetraphenylborate

143-66-8

%(ACS)

25 g

100 g 500 g 牛血清白蛋白

Bovine serum albumin [ Fraction

V], BSA

9048-46-8

——

5 g

25 g 100 g 十二烷基硫酸钠

Dodecyl sulfate sodium salt, SDS 151-21-3

99%

100 g

500 g 脱氧胆酸钠

Sodium deoxycholate

302-95-4

98%

25 g

100 g 500 g

苯甲基磺酰氟化物

Phenylmethylsulfonyl

fluoride, PMSF 329-98-699%

25 g

100 g

亮抑酶肽Leupeptin%

10 mg

50 mg

三（羟甲基）氨基甲烷盐酸盐Tris(hydroxymethyl)aminomethane

hydrochloride, Tris-HCl

1185-53-199%

25 g

100 g

500 g

吐温80Polysorbate 809005-65-6——

250 mL

1 L

碱性磷酸酶底物

碱性磷酸酶(Alkaline phospharase, AP)是一种能够在碱性情况下将对应底物去磷酸化的酶，广泛分布于人体的各脏器器官中，以肝脏、骨骼、小肠中存在的量最多。其含量的变化能引起肝炎、肝癌等疾病，是目前免疫诊断试剂产品最常用的标记酶之一。

PNPP（p-Nitrophenyl phosphate disodium salt）是常用的碱性磷酸酶底物，当碱性磷酸酶与PNPP反应后，形成黄色水溶性反应产物，其在&lambda＝405 nm有光吸收。其反应灵敏，颜色鲜明，在诊断试剂盒生产中得到广泛应用。

产品编号中文名称英文名称CAS包装

254303

4-硝基苯磷酸二钠盐六水合

物p-Nitrophenyl phosphate disodium

hexahydrate, 98%

333338-18-4

1 g

5 g

25 g

分子式：C6H4NNa2O6P · 6H2O

分子量：

熔点：>300 °C

储存条件：2-8°C

BCIP和NBT是碱性磷酸酶最佳的发色底物组合之一，产物为深蓝色。在碱性磷酸酯酶的催化下，BCIP会被水解产生强反应性的产物，该产物会和NBT发生反应，形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的NBT-formazan，从而达到标记作用。