实训项目十三气相色谱法测定蔬菜中有机磷农药的残留量

实训项目十三气相色谱法测定蔬菜中有机磷农药的残留量

一、实验目的

1．了解火焰光度检测器特点及应用。

2．学习蔬菜中有机磷农药残留量的气相色谱测定方法。

二、实验原理

有机磷农药是一种高效广谱型杀虫剂，能大大降低了病虫害对蔬菜的危害，但农药残留问题比较突出。有机磷农药导致的急性中毒事件也屡见不鲜，加强蔬菜中有机磷农药的残留监测，对于保障人民群众的食品安全意义重大。

含有机磷的样品在富氢焰上燃烧时，产生激发态的HPO*分子，当它回到基态时会发射出波长为526nm的特征光。这种特征光经滤光片选择后，由光电倍增管接收，转换成电信号而被检出。试样的峰面积或峰高与标准品的峰面积或峰高进行比较定量。

三、主要仪器与试剂

1．仪器

气相色谱仪（配有火焰光度检测器FPD）；电动振荡器；微量注射器（10μL）；具塞锥形瓶。

2．试剂

二氯甲烷（分析纯）；无水硫酸钠（分析纯）；活性炭（用3mol/L盐酸浸泡过夜，抽滤，洗至中性，在120℃下烘干备用）；甲胺磷、对硫磷和乐果标准储备液（纯度均≥99％，100μg/mL）。

四、操作步骤

1．农药标准系列溶液配制

临用前用微量移液器准确量取甲胺磷、对硫磷和乐果标准储备液20、40、60、80、100μL，分别于10mL容量瓶中，用二氯甲烷稀释定容至刻度，即成0.2、0.4、0.6、0.8、1.0μg/L的混合标准系列溶液，4℃冰箱贮藏。

2．样品前处理

将蔬菜洗净、晾干，取可食部分剪碎混匀。称取样品10.00 g，置于具塞锥形瓶内，加入无水硫酸钠30～80g（根据蔬菜含水量而定）混匀脱水，直至水分完全脱除（剧烈振摇后应有固体硫酸钠存在）。加入0.2~1.0g活性炭脱色，加入

70mL二氯甲烷，在振荡器中振荡30min，经滤纸过滤。量取35mL 滤液，在通风柜中室温下自然挥发至近干，残渣用二氯甲烷少量多次研洗，移入10mL 具塞刻度试管中，并定容至2mL，备用。

3．仪器操作

打开气相色谱仪，连接工作站，设置好色谱条件：

色谱柱：OV-1701（30 m×0. 32 mm× 0.25μm）；升温程序：60℃（保持1 min）一升温至210℃（升温速度30℃/min，保持10min）一升到240 ℃（升温速度10 ℃/min，保持6min）。检测器温度为260 ℃，进样口温度为250℃，不分流。载气为氮气（纯度99.999 %），压力0.41 MPa，流速1.20 mL/min，氢气压力0.39MPa，空气压力0.41 MPa。

4．标准曲线制备

取10μL微量进样器，准确吸取2.0μL甲胺磷、对硫磷和乐果的混合标准系列溶液，按规范进样，启动色谱工作站，绘制色谱图，得到不同浓度有机磷标准溶液的峰面积，分别绘制有机磷农药浓度—峰面积标准曲线。

5．样品分析

取10μL微量进样器，准确吸取 2.0μL待测样品提取液，在相同条件下进样，得到试样的色谱图，在色谱峰峰面积标准曲线上查得相应组分的含量。

五、数据记录与处理

测定结果计算：

X一试样中有机磷农药的含量，mg/Kg；

一进样体积中有机磷农药的质量，由标准曲线中查得，ng；

m一与进样体积（μL)相当的试样质量，g。

六、注意事项

1．FPD在富氢焰下工作，不点火不开氢气，要注意观察避免火焰熄灭。

2．要保持FPD燃烧室的清洁，避免收到溶剂污染。

七、问题与讨论

1. 火焰光度检测器的检测原理是什么？

2. 使用火焰光度检测器应注意哪些问题。