实验报告_不同因素对酶的影响

word 格式整理版 实验报告

课程名称： 指导老师：

成绩： 实验名称： 实验类型： 分离鉴定实验 同组学生姓名：

一、实验目的和要求（必填）

二、实验内容和原理（必填） 三、主要仪器设备（必填）

四、操作方法和实验步骤 五、实验数据记录和处理

六、实验结果与分析（必填） 七、讨论、心得

Ⅰ.酶的基本性质——底物专一性

一、实验目的和要求

1. 了解酶的专一性。

2. 掌握验证酶的专一性的基本原理及方法。

3. 学会排除干扰因素，设计酶学实验。二、实验基本原理 酶是一种具有催化功能的蛋白质。酶蛋白结构决定了酶的功能——酶的高效性，酶催化的

反应（酶促反应）要比相应的没有催化剂的反应快103-1017 倍。 酶催化作用的一个重要特点是具有高度的底物专一性，即一种酶只能对某一种底物或一类底物起催化作用，对其他底物无催化反应。根据各种酶对底物的选择程度不同，它们的专一性可以分为下列几种：

1.相对专一性 一种酶能够催化一类具有相同化学键或基团的物质进行某种类型的反应。

2.绝对专一性： 有些酶对底物的要求非常严格只作用于一种底物，而不作用于任何其他物质。如脲酶只能催化尿素进行水解而生成二氧化碳和氨。如麦芽糖酶只作用于麦芽糖而不作用其它双糖，淀粉酶只作用于淀粉，而不作用于纤维素。

3.立体异构专一性 有些酶只有作用于底物的立体异构物中的一种，而对另一种则全无作用。如酵母中的糖酶类只作用于D-型糖而不能作用于L-型的糖。 本实验以唾液淀粉酶、蔗糖酶对淀粉、蔗糖水解反应的催化作用来观察酶的专一性。采用Benedict 试剂检测反应产物。

Benedict 试剂是碱性硫酸铜溶液，具有一定的氧化能力，能与还原性糖的半缩醛羟基发生

氧化还原反应，生成砖红色氧化亚铜沉淀。 Na 2CO 3+ 2H 2O 2NaOH + H 2CO 3 CuSO 4+ 2NaOH Cu(OH)2+ Na 2SO 4 还原糖(—CHO or —C=O)+ 2Cu(OH)2 Cu 2O (砖红色或黄色) + 2H 2O + 糖的氧化产物

在分子结构上，淀粉几乎没有，而蔗糖、棉子糖全无半缩醛基，它们均无还原性，因此它们与Benedict 试剂无呈色反应。 淀粉被淀粉酶水解，产物为葡萄糖；蔗糖和棉子糖被蔗糖酶水解，其产物为果糖和葡萄糖，它们都为具有自由半缩醛羟基的还原糖，与Benedict 试剂共热，即产生红棕色Cu2O 沉淀。本实验以此颜色反应观察淀粉酶、蔗糖酶对淀粉和蔗糖的水解作用。

三、实验材料与试剂

1、实验材料⑴ 蔗糖酶(样品Ⅳ）；⑵ 新鲜唾液（含唾液淀粉酶）；

2、实验试剂⑴ 蔗糖酶液 蔗糖酶液(样品Ⅳ）加蒸馏水适当稀释，备用；⑵ 唾液淀粉酶液（学生自制） 取0.5mL 唾液至25ml 量筒中，用蒸馏水（稀释）到25ml ，用棉花过滤备用。唾液稀倍数因人而异，可稀释50～专业：

姓名： 学号： 日期： 地点：

装

订 线

生物化学实验（甲） 酶的基本性质实验——底物专一性剂、激活剂和抑制、最适温度

400倍，甚至更高；⑶ 5%蔗糖（A.R.）溶液；⑷ 0.5%淀粉溶液（含0.3%NaCl）；⑸ Benedict 试剂；四、实验器材与仪器

1.漏斗，

2.脱脂棉花；

3.恒温水浴（37℃，100℃）；

4.量筒；

5.试管；

6.烧杯；

7.吸量管。

五、实验操作方法和步骤

㈠检查试剂取3支试管，按下表操作：

注：1、检查目的：试剂是否有干扰因素存在。2、也可对蔗糖酶液、唾液淀粉酶液进行检查是否也有干扰因素存在，请自己设计。㈡淀粉酶的专一性

取三支试管，按下表操作：

注：可增加一组唾液淀粉酶液经100℃加热3min处理后的样品对照组。㈢蔗糖酶的专一性取三支试管，按下表操作：

注：可增加一组蔗糖酶液经100℃加热3min处理后的样品对照组。

六、结果分析讨论

各试管观察结果依次是：

（一）：1号蓝绿色，2号蓝色， 3号蓝色

Benedict试剂是碱性硫酸铜溶液，具有一定的氧化能力，能与还原性糖的半缩醛羟基发生氧化还原反应，生成砖红色氧化亚铜沉淀。3只试管都为蓝色说明几只试管中都没有果糖和葡萄糖，说明在不加酶时，淀粉和蔗糖不易水解。试剂无干扰因素的存在。（1号试管是蓝绿色可能是因为有少部分的淀粉水解）

（二）：1号土黄色，2号黄绿色，3号蓝色

加入唾液淀粉酶，1号试管底物是淀粉，所以很容易水解成葡萄糖，与Benedict试剂共热，即产生红棕色Cu2O沉淀。所以1号颜色变化比较大。（2号可能是因为蔗糖在37℃恒温水浴中也有少部分水解，所以颜色变化，但变化不明显。）总的来看可以看出唾液淀粉酶只对淀粉有催化活性，不能催化蔗糖水解，具有对淀粉的底物专一性。3号是对照。

（三）：1号蓝色， 2号红棕色，3号蓝色

加入蔗糖酶，2号试管底物是蔗糖，所以很容易水解成果糖和葡萄糖，与Benedict试剂共热，即产生红棕色Cu2O沉淀。所以2号颜色变化比较大。（1号可能是因为淀粉在37℃恒温水浴中也有部分水解，所以有颜色变化，但变化不明显。）从这三支试管看出蔗糖酶只对蔗糖的水解有催化作用，对淀粉无催化作用，具有对蔗糖的底物专一性。3号是对照。

七、思考题1．观察酶专一性实验为什么要设计这3组实验？每组各有何意义？蒸馏水有何用？第一组作为整个实验的空白对照组，检测 Benedict 试剂对实验结果的颜色有何影响，排除干扰因素的存在。第二组作为检测淀粉酶的专一性实验组，第三组作为检测蔗糖酶的专一性的实验组。蒸馏水作为每一个组中的空白对照，与组内其余两组进行对照。

2．将酶液煮沸10min后，重做二、三的操作，观察有何结果？

各试管都为蓝色，因为酶在煮沸过程中已经变性，失去催化活性，故不能催化各自对应底物的水解反应。

3．在此实验中，为什么要用0.5%淀粉(0.3%NaCl)溶液？0.3%NaCl的作用是什么？

0.3%NaCl 中的Cl-是作为激活剂激活唾液淀粉酶的活性，使实验结果不至于因为唾液淀粉酶的活性不足而导致不同。

八、注意事项1.试管要干净，所有试剂加量准确，加好试剂后要摇匀。2.使用试剂时不要人为造成试剂间的互相污染；试剂用好瓶盖要立即盖好，防止试剂间的互相污染。以免实验结果的错误。

Ⅱ. 影响酶活性的因素——激活剂和抑制剂

一、实验目的和要求

1. 了解激活剂和抑制剂对酶促反应速度的影响。

2. 学习检定激活剂和抑制剂影响酶促反应速度的原理和方法。二、实验基本原理

在酶促反应过程中，酶的活性常受某些物质的影响，有些物质能使酶的活性增加，称为激活剂；某些物质它们并不引起酶蛋白变性，但能使酶分子上的某些必需基团（主要是指酶活性中心上的一些基团）发生变化，因而引起酶活力下降，甚至丧失，致使酶反应速度降低，称为酶的抑制剂。

酶的激活剂种类： 1、一些简单的无机离子，如Mg2+、Cl-等； 2、一些中等大小的有机分子，如抗坏血酸等也是激活剂，它们对某些含巯基的酶具有激活作用； 3、有些酶的催化作用易受某