(优选)乙肝丙肝核酸检测的新平台临床
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注：1 IU/mL= 1 copy/mL
内容
• HBV核酸检测的现状与需要 • HCV核酸检测的现状与需要
• 罗氏的CAP/CTM能带来什么益处
• 总结
COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan 系统
全世界第一台用于体外诊断的全自动荧光定量分子诊断系统 真正实现 “样品进，结果出” 全球安装超过 2,000台，国内安装超过 40台
[package insert] GlaxoSmithKline, Research Triangle park, NC 3. HEPSERA™ (Adefovir dipivoxil) [package insert] Gilead
Sciences. Foster City, CA
4. Pegasys (Peginterferon alfa-2a) [package insert]. Hoffmann-La Roche Inc. Nutley, NJ 5.
HCV病毒检测阴性
治疗到24周 HCV RNA检测
HCV病毒检测 阴性
停药
继续治疗至24周
HCV病毒检测 阳性
继续治疗至48周
HCV RNA下降<2log 考虑停药
国产试剂现状
• 目前使用的国产试剂能解决的问题，不能解决的问题： • HCV试剂盒说明：500～5×107 IU/mL • 较可信的测试范围：104～5×107 IU/mL
Tenofovir
替诺福韦
INTRON® A EPIVIR-HBV® HEPSERA™ BARACLUDE™ PEGASYS®
TYZEKA™ VIREAD (HIV)
FDA 批准日期
1991 1998 2002 2005
2005 2006 Phase 3
关键的 HBV-DNA测试
N/A 杂交研究解决方案 1 Amplicor Monitor 2 Cobas Amplicor 3
HBV-DNA定量测试用于药品FDA注册试验
通用名
商品名
Interferon alfa-2b
α-2b 干扰素
Lamivudine
拉米夫定
Adefovir dipivoxil
阿德福韦酯
Entecavir
恩替卡韦
Peginterferon alfa-2a
聚乙二醇干扰素α-2a
Telbivudine
替比夫定
37°C孵育
室温
80°C孵育
CAP机械臂介绍
• 取SPU枪头 • 样本管/反应管管盖抓手 • 样本初始体积感应器 • 取试剂钢针
样本管/反应管结 构
COBAS TaqMan/COBAS TaqMan 48分析仪简介
• 检测通量可达4*24测试 • 独立的24孔热循环仪
• TaqMan 48有2个模块，TaqMan 96有4个模块 • 最多可同时进行4个不同的分析检测 • 操作简单，核酸扩增和检测全部自动完成 • 实时定量PCR检测技术，卓越的检测性能，灵敏 度高和特异性好，动态范围宽
国产试剂现状
• 目前使用的国产试剂能解决的问题，不能解决的问题： • HBV试剂盒说明：500～5×107 IU/mL • 较可信的测试范围：104～5×107 IU/mL • 对部分发生HBV病毒突变的病人无法准确检测
注：1 IU/mL= 1 copy/mL
内容
• HBV核酸检测的现状与需要
• HCV核酸检测的现状与需要
Cobas Amplicor 4 Cobas Amplicor 5 Cobas TaqMan 6
INTRON® A (Interferon alfa-2b) [package insert]. Schering-Plough Corp. Kenilworth, NJ 2. EPIVIR-HBV® (Lamivudine)
• 罗氏的CAP/CTM能带来什么益处 • 总结
HCV DNA监测在抗病毒治疗中的临床应用
• HCV病毒感染是可治愈的疾病 • HCV RNA检测可以有效指导临床用药 • 治疗的终点是核酸检测为阴性（核酸检测可以直接指导停
药时机）
慢性HCV治疗方案
用药
12周早期病毒学反应
HCV RNA下降>2log
Leabharlann Baidu
TYZEKA™ (Telbivudine) [Package Insert]. Novartis Pharmaceuticals Corp. E Hanover, NJ 6. Marcellin P et al. Hep DART
供了指导 • 对用药耐药性的监测（拉米夫定－YMDD，…） • 肝移植HBV复发风险的降低（术前，术后） • ……
HBV DNA监测的临床应用
HBV治疗路线图
Keeffe E. Clin Gastro Hepatology 2007;5:890-897. 侯金林等，慢性乙型肝炎抗病毒治疗方案优化，中国肝脏病杂志
（优选）乙肝丙肝核酸检测的 新平台临床
目前乙肝和丙肝临床治疗过程中遇到的主要问题
• 治疗终点无法准确判定
• 有些病人经一段时间治疗后DNA/RNA检测结果忽阴忽阳，但 临床症状依然明显
• 不能及时预测耐药（病毒学突破）
• 核苷（酸）类似物治疗后病毒DNA/RNA快速下降至检测限以 下，不久却发现病毒出现反跳
• 基于MGP磁珠分离技术，确保高质量的核 酸提取纯化
• 最多72个样品可以同时上机，运行中可连 续装载上架，提高工作效率 • 包括耗材、样品、试剂均可以连续上 样
COBAS AmpliPrep仪器
MGP 磁珠分离技术
1.裂解、稳定和去蛋白
2.核酸捕获
3.冲洗
4.洗脱
DNA 或者 RNA
病毒或细胞
COBAS AmpliPrep / COBAS TaqMan48®系统
COBAS AmpliPrep / COBAS TaqMan 96®系统 （无连接系统）
COBAS AmpliPrep / COBAS TaqMan 96®系统（带 连接系统）
COBAS AmpliPrep仪器简介
• 全自动系统，自动进行核酸提取纯化和 PCR反应体系配制
• 疗效的准确监测？？？
• 治疗后12或24周病毒DNA/RNA下降幅度直接决定预后
问题的根源在哪里？
内容
• HBV核酸检测的现状与需要
• HCV核酸检测的现状与需要 • 罗氏的CAP/CTM能带来什么益处 • 总结
HBV DNA监测在抗病毒治疗中的临床应用
• HBV DNA是监测抗病毒治疗响应和时间的关键标志物 • HBV 治疗的路线图理念，为HBV DNA监测用于临床实践提
内容
• HBV核酸检测的现状与需要 • HCV核酸检测的现状与需要
• 罗氏的CAP/CTM能带来什么益处
• 总结
COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan 系统
全世界第一台用于体外诊断的全自动荧光定量分子诊断系统 真正实现 “样品进，结果出” 全球安装超过 2,000台，国内安装超过 40台
[package insert] GlaxoSmithKline, Research Triangle park, NC 3. HEPSERA™ (Adefovir dipivoxil) [package insert] Gilead
Sciences. Foster City, CA
4. Pegasys (Peginterferon alfa-2a) [package insert]. Hoffmann-La Roche Inc. Nutley, NJ 5.
HCV病毒检测阴性
治疗到24周 HCV RNA检测
HCV病毒检测 阴性
停药
继续治疗至24周
HCV病毒检测 阳性
继续治疗至48周
HCV RNA下降<2log 考虑停药
国产试剂现状
• 目前使用的国产试剂能解决的问题，不能解决的问题： • HCV试剂盒说明：500～5×107 IU/mL • 较可信的测试范围：104～5×107 IU/mL
Tenofovir
替诺福韦
INTRON® A EPIVIR-HBV® HEPSERA™ BARACLUDE™ PEGASYS®
TYZEKA™ VIREAD (HIV)
FDA 批准日期
1991 1998 2002 2005
2005 2006 Phase 3
关键的 HBV-DNA测试
N/A 杂交研究解决方案 1 Amplicor Monitor 2 Cobas Amplicor 3
HBV-DNA定量测试用于药品FDA注册试验
通用名
商品名
Interferon alfa-2b
α-2b 干扰素
Lamivudine
拉米夫定
Adefovir dipivoxil
阿德福韦酯
Entecavir
恩替卡韦
Peginterferon alfa-2a
聚乙二醇干扰素α-2a
Telbivudine
替比夫定
37°C孵育
室温
80°C孵育
CAP机械臂介绍
• 取SPU枪头 • 样本管/反应管管盖抓手 • 样本初始体积感应器 • 取试剂钢针
样本管/反应管结 构
COBAS TaqMan/COBAS TaqMan 48分析仪简介
• 检测通量可达4*24测试 • 独立的24孔热循环仪
• TaqMan 48有2个模块，TaqMan 96有4个模块 • 最多可同时进行4个不同的分析检测 • 操作简单，核酸扩增和检测全部自动完成 • 实时定量PCR检测技术，卓越的检测性能，灵敏 度高和特异性好，动态范围宽
国产试剂现状
• 目前使用的国产试剂能解决的问题，不能解决的问题： • HBV试剂盒说明：500～5×107 IU/mL • 较可信的测试范围：104～5×107 IU/mL • 对部分发生HBV病毒突变的病人无法准确检测
注：1 IU/mL= 1 copy/mL
内容
• HBV核酸检测的现状与需要
• HCV核酸检测的现状与需要
Cobas Amplicor 4 Cobas Amplicor 5 Cobas TaqMan 6
INTRON® A (Interferon alfa-2b) [package insert]. Schering-Plough Corp. Kenilworth, NJ 2. EPIVIR-HBV® (Lamivudine)
• 罗氏的CAP/CTM能带来什么益处 • 总结
HCV DNA监测在抗病毒治疗中的临床应用
• HCV病毒感染是可治愈的疾病 • HCV RNA检测可以有效指导临床用药 • 治疗的终点是核酸检测为阴性（核酸检测可以直接指导停
药时机）
慢性HCV治疗方案
用药
12周早期病毒学反应
HCV RNA下降>2log
Leabharlann Baidu
TYZEKA™ (Telbivudine) [Package Insert]. Novartis Pharmaceuticals Corp. E Hanover, NJ 6. Marcellin P et al. Hep DART
供了指导 • 对用药耐药性的监测（拉米夫定－YMDD，…） • 肝移植HBV复发风险的降低（术前，术后） • ……
HBV DNA监测的临床应用
HBV治疗路线图
Keeffe E. Clin Gastro Hepatology 2007;5:890-897. 侯金林等，慢性乙型肝炎抗病毒治疗方案优化，中国肝脏病杂志
（优选）乙肝丙肝核酸检测的 新平台临床
目前乙肝和丙肝临床治疗过程中遇到的主要问题
• 治疗终点无法准确判定
• 有些病人经一段时间治疗后DNA/RNA检测结果忽阴忽阳，但 临床症状依然明显
• 不能及时预测耐药（病毒学突破）
• 核苷（酸）类似物治疗后病毒DNA/RNA快速下降至检测限以 下，不久却发现病毒出现反跳
• 基于MGP磁珠分离技术，确保高质量的核 酸提取纯化
• 最多72个样品可以同时上机，运行中可连 续装载上架，提高工作效率 • 包括耗材、样品、试剂均可以连续上 样
COBAS AmpliPrep仪器
MGP 磁珠分离技术
1.裂解、稳定和去蛋白
2.核酸捕获
3.冲洗
4.洗脱
DNA 或者 RNA
病毒或细胞
COBAS AmpliPrep / COBAS TaqMan48®系统
COBAS AmpliPrep / COBAS TaqMan 96®系统 （无连接系统）
COBAS AmpliPrep / COBAS TaqMan 96®系统（带 连接系统）
COBAS AmpliPrep仪器简介
• 全自动系统，自动进行核酸提取纯化和 PCR反应体系配制
• 疗效的准确监测？？？
• 治疗后12或24周病毒DNA/RNA下降幅度直接决定预后
问题的根源在哪里？
内容
• HBV核酸检测的现状与需要
• HCV核酸检测的现状与需要 • 罗氏的CAP/CTM能带来什么益处 • 总结
HBV DNA监测在抗病毒治疗中的临床应用
• HBV DNA是监测抗病毒治疗响应和时间的关键标志物 • HBV 治疗的路线图理念，为HBV DNA监测用于临床实践提