香菇多糖的复合酶法提取

香菇多糖的提取方法：
热水浸提法 稀酸(碱)浸提 法 微波法提取香菇多糖 超声波提取法 深层发酵培养提取法 酶解法
酶解法：
酶解法就是指在浸提的过程 中加入相应的酶来水解纤维素、 果胶、蛋白质分子等，以使多糖 从细胞中分离出来。
酶法提取较其他方法的优点
1.其作用条件温和。 2.通过酶法破壁去除杂质可以明显提高
酶提取多糖清液。
香菇的复合酶法提取
分离纯化
1.分离提取
用0.5%NaOH初步提取，之后取清液，用透析袋透去 除杂离子，透析后去除杂蛋白，用活性炭脱色1 h，加 入95%乙醇，使溶液中乙醇的浓度达到75%进行醇沉．醇 沉过程中要将其保存在4℃冰箱中，保持24 h，离心15 min，取沉淀，置于真空干燥箱中干燥，即可得到香菇 粗多糖。
香菇的复合酶法提取
原料的准备和处理
香菇→烘干( 50℃) →粉碎→过筛→多 糖提取原材料。
香菇的复合酶法提取
主要实验试剂及仪器
真空干燥箱，离心机，恒温振 荡器，紫外可见分光光度计，傅里 叶变换红外光谱仪，纤维素酶，木 瓜蛋白酶
香菇的复合酶法提取
1
称取80目的香菇粉2g，放入到250mL的三角瓶中， 加蒸馏水35mL混合均匀后置于40℃水浴锅中，水浴 30min，调节pH值。
Thanks
感谢下 载
提取率，缩短提取时间。 3.可减少能源消耗。 4.有效的保存多糖的生物活性。
复合酶提取香菇多糖：
复合酶
纤维素酶+木 纤维素酶+中 木瓜蛋白酶+ 中性蛋白酶+ 瓜蛋白酶 性蛋白酶 纤维素酶 纤维素酶
多糖得率（%）12.90
7.02
9.46
6.34
香菇多糖的制备工艺
一.原料准备 二.提取 三.分离纯化
3.酶解时间对多糖得率的影响
由图可知,香菇多糖的提取率随酶促反应时 间的延长增加。
酶法提取的应用前景：
酶法提取由于反应特异性强、条件温和易获得、提取时间短、提取率高、 绿色节能等已引起广泛的关注，具有较大的应用潜力，且随着对酶法技术的 不断研究，酶法与其他技术如超声波、超高压、微波等技术的联用也将成为 另一个热点研究方向。
香菇多糖的复合酶法 提取
• 香菇多糖是香菇中分离出的一种重要的具
有生理活性的物质。
➢香菇多糖的作用：
香菇多糖具有抗病毒、 抗肿瘤，调节免疫力、 降血糖、抗氧化等功 能。有关香菇多糖的 研究，特别是结构方 面的研究已引起国内 外学者的高度关注， 并有望成为多糖领域 的研究热点。
与其他抗肿瘤药物相 比，香菇多糖几乎无 任何副作用，对胃癌、 鼻咽癌、直肠癌、乳 腺癌和慢性粒细胞白 血病等有抑制和防止 术后微转移的作用， 是目前已知最强的免 疫增强剂之一。
实 验
2
称取木瓜蛋白酶和纤维素酶按一定比例混
Байду номын сангаас
方
合，加入5mL蒸馏水溶解。
法
3
香菇溶液放在水浴中预热至酶解温度，将酶液加入
与
到香菇溶液中，在恒温振荡器上提取。
步
4
反应结束，将三角瓶放到沸水锅中，
10min沸水浴灭酶。
骤
5
灭酶结束，冷却至室温，将酶提取液放入到离心 管中，调至4000 r/min离心，取上清液，即得到
2.纯化
将香菇粗多糖水溶解后用色谱仪分离， 干燥获得纯香菇多糖。
影响香菇多糖得率的因素：
1.复合酶的浓度对多糖得率的影响
随着复合酶浓度的增加，多糖提取率也逐渐增加，酶浓 度大于0.4%后提取增加率趋于平缓，因此，最佳复合酶 的浓度为0.4%。
2.料液比对多糖得率的影响
当料液比在1∶15～l∶25之间多糖提取率增长较快， 继续提高料液比多糖提取率仍有升高，但提高速率 减小．因此最佳料液比为1∶20．