三大有机物鉴定实验

色溶 注 的液 意 变中 观 化颜 察 ？
课堂练习
1、下列关于实验一操作步骤的叙述中，正确的是（ ）
A、用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可 直接用于蛋白质的鉴定
B、脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的 脂肪滴 C、鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后， 再加入乙液
D、用ຫໍສະໝຸດ Baidu鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均 匀后，再加入含样品的试管中，且必须现混现用
（2）染色
用毛笔将最 薄的几片材料移至洁净的载玻片的 中央→滴苏丹Ⅲ溶液2-3滴于花生子叶薄片上→23min后，吸去染液→滴50%的酒精洗去浮色→吸去 多余酒精→再滴1-2滴蒸馏水→盖上盖玻片，制成临 时装片。
（3）镜检鉴定
在低倍镜下观察，找到花生子叶切片的最薄处 （最好只有1-2层细胞），移至视野的中心→换用高 倍镜观察，调焦至最清晰。可发现细胞内橘黄色的 圆形小颗粒，这就是脂肪滴（油滴）。若发现观察 物外围也有许多橘黄色小颗粒，则是脂肪跑了出来。
水浴煮沸 2分钟
再加入2mL刚 配制的斐林试 剂
（二）生物组织中脂肪的鉴定
1 实验原理
苏丹Ⅲ是可以对脂肪染色的试剂，因 此，当含有大量油滴的植物细胞用苏丹Ⅲ 染色后，在显微镜下可以看到细胞内橘黄 色的颗粒。
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实验目的
初步掌握鉴定生物组织中脂肪的基本方法
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实验材料
做脂肪的鉴定实验时，所用材料一要脂肪含量高， 二要有一定大小才能做徒手切片，花生种子符合该 实验的要求。 将花生种子经过3-4小时的浸泡使其变软，有利于 切成薄片；但浸泡时间也不宜过长，否则切片时易 碎裂，切不成薄片。 4 试剂配制
4
试剂配制 甲液（0.1g/mL的氢氧化钠溶液）
本尼迪特试剂
乙液（0.05g/mL的硫酸铜溶液）
甲、乙试剂千万要分开放，不可混 合。在实验过程中，将4-5滴乙液 滴入2mL甲液中现混现用！！！
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实验步骤
（1）制备组织样液（教师制备） （2）鉴定样液
先在试管中加入 2mL组织样液
注意观察整个实验 过程中，溶液颜色 的变化！！！
2、在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实 验中，对实验材料的选择叙述中，错误的是 （ ） A、甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等，都含有较多的 糖且近于白色，因此可以用于进行可溶性还原糖的鉴定
B、花生种子含脂肪多且子叶肥厚，是用于脂肪鉴定的 理想材料
C、大豆种子蛋白质含量高，是进行蛋白质鉴定的理想 植物组织材料 D、鸡蛋清含蛋白质多，是进行蛋白质鉴定的动物材料
3、将三个鉴定实验与其使用的试剂和结果之间用直线连 接起来。
可溶性还原糖 斐林试 剂 紫 色
脂
蛋 白
肪
质
双缩脲试剂
苏 丹 Ⅲ
橘黄色
砖红色
NH2 | 4 、实验可知，在尿素（O=C）溶液中加入双缩脲试剂，也能产 生紫色反应。依据蛋 | 白质鉴定实验原理说明之。 NH2
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实验材料
做蛋白质的鉴定实验，一般选用蛋白质含量 较高的大豆或鸡蛋白。 4 试剂配制
A液（0.1g/mL的氢氧化钠溶液）
双缩脲试剂 B液（0.01g/mL的硫酸铜溶液）
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实验步骤：
（1）制备生物组织样液（教师制备） （2）鉴定
加3-4滴双缩 脲试剂B液
先加2mL 组织样液
再加2mL 双缩脲试 剂A液
高中生物实验
实验一：生物组织中可溶性还 原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
（一）生物组织中可溶性还原糖的鉴定
1 实验原理
当质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液与质量 浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液混合后，立即生成 淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。 Cu(OH)2与葡萄糖、果糖、 麦芽糖等可溶性还原糖共热，能够生成黄红色 的Cu2O沉淀。因此，利用该反应，可证明样液中 含可溶性还原糖。
（三）生物组织中蛋白质的鉴定
1 实验原理
在碱性溶液（NaOH）中，双缩脲（H2NOC-NHCONH2）能与Cu 2+作用，形成紫色的络合物，这个 反应叫做双缩脲反应。
由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似 的肽键，因此，蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色 反应。
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实验目的 初步掌握鉴定生物组织中蛋白质的基本方法。
苏丹Ⅲ溶液：将0.1g苏丹Ⅲ干粉溶于100mL体积 分数为95%的酒精溶液中，待全部溶解后即成。
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实验步骤
（1）切片制作
①去掉花生种皮
②用左手的三个手指夹住花生的一片子叶， 使花生子叶高于手指之上（为什么？）。右 手持刀片，将子叶削去一层，形成平面。 ③刀口向内，与花生断面平行，以均匀的动作， 自左前方向右后方快速拉刀，滑行切片（注意 要整个臂部用力，而不要腕部用力。）如此连 续动作，切下一些薄片。
CH2OH-(CHOH)4-CHO+2Cu(OH)2→CH2OH(CHOH)4-COOH+Cu2O↓+2H2O
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实验目的 初步掌握鉴定生物组织中可溶性还原糖的基本 方法。
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实验材料 做可溶性还原糖的鉴定实验，还原糖的含 量、生物组织有无色素是影响实验结果及其 观察的最重要因素。 因此要选用可溶性还原糖含量高、白 色或近于白色的植物组织，其中以苹果、 梨最好，也可用白萝卜替代。