血液检测误差分析

病例--EDTA-K2依赖血小板聚集
血常规特点：
1.PLT计数假性偏低 2.有怀疑类报警血小板聚集
对策：
1.更换枸缘酸盐抗凝剂，若凝集现象消除，证明原 抗凝不良。 2.用干试管采血并且推片
更换枸缘酸盐抗凝剂后结果为220*109/L
讨论： 在EDTA 依赖性假性血小板 减少患者抽取后 1 h 的抗 凝血样本中加入 6 . 5 m g / m l 丁胺卡那霉素能有效地
Q10：某标本，XNA1机型检测，首次结果 ，PLT 23*109/L，思考下一步如何处理？
EDTA-K2依赖血小板聚集
正常
凝集
分析： 1、PLT减低；报警信息提示PLT Clumps?(血小板聚集)，报警更灵敏； 2、在WNR, WDF 、PLT直方图有聚集报警（○）； 3、PLT-F通道，散点图增加了FSCW（前向散色光分布宽度），FSCW(←)扩展是血小板聚 集的明显特征。
• Modification

WNRch
WDFch
1.Flagging of “WBC Abnormal Scattergram”, 2.masking of WBC[----] will be executed when such phenomena are detected.
Detection Area of WBC aggregation
异常值--最容易出临床差错的临检项目之一
低值PLT
PLT低值计数重复性差：无法 连续观测结果，指导临床用药
PLT
（低值PLT通道——PLT-F）
假性增高：受小RBC、碎片干
扰，误导临床手术，出血风险
特异标记线粒体
假性降低：大PLT误计为RBC 误导临床输血，增加不必要 的 经济负担和输血风险。
5倍颗粒计数
结果可直接报告 WBC分类出现了异常情 况
•提高了异常标 本的筛选效率
POSITIVE/阳性
M（Morph）细胞形态出现了异常。 C（Count） 血细胞计数出现了异常。 Func. Result 仪器故障或操作错误
• 完善实验室的 ERROR/错误 镜检规则
标本有问题 例如：凝集
5
Q2：仪器的怀疑类报警含义分别是什么？
Q:如何减少试验误差？
仪器的自动复检功能-3R
• 3R是指XN系列的三个复检方式 • 仪器可以根据规则判定结果，执行［Repeat］分析、［Rerun］ 分析、［Reflex］分析以获得第二次分析结果。
类型 Repeat 触发原因 复检内容
检测过程中，仪器 重新执行初检。 动作异常（故障）
Rerun 结果低可信度
3.样本的运送是否及
时等。
常见误差因素：
1
2 3
白细胞假性增高
红细胞凝集 细胞碎片 巨大血小板 血小板聚集
4
5
Q1:DMC含义是什么？
报警原理
数值数据
散点图 直方图 仪器状态 NEGATIVE/阴性 结果正常 D（DIFF） IPU综合分析
IP信息
Abnormal Suspect
POSITIVE NEGATIVE ERROR
滴加溶血 素后
病例--红细胞溶血不良
血常规特点：
1.DIFF通道与BASO通道WBC差值较大 2.存在“难溶红细胞”报警
对策：
1.手工计数 2.参考DIFF通道WBC总数
WBC聚集时新增WBC的切换功能
复习：Ver.00-15（WBC Abn Scg报警和WBC结果不显示[----] ）
• Target
解决方案
PLT-I PLT-O
PLT-F
• 颗粒大小
• α 颗粒（特异性蛋 白质）
血小板特殊颗粒
(α 颗粒-特异性蛋白质)
线粒体(DNA)
• 线粒体（DNA）
PLT
RBC
利用PLT-F专用试剂明显染色 的细胞与血小板特异抗原 （CD41）阳性细胞一致,下层的 红细胞碎片只有细胞膜被轻度染 色.同时再根据前向散射光所代 表的细胞大小信息，能够清晰地 区别血小板和红细胞碎片
误差的来源：
分析前
1.患者本身：饮食、 情绪、运动 2.样本采集：样本是 否需特殊处理、抗 凝剂的使用等
分析中
1.小红细胞干扰 2.巨大血小板综合症 3.某些血液病患者 4.细胞碎片 5.冷球蛋白干扰 6.新生儿
分析后
1.检验结果的审核
与发出 2.检验样本的保存 与标本的处理 3.咨询服务：加强 与临床的沟通
总结RBC干扰： 1.红细胞凝集导致红细胞假性减少 2.巨大血小板导致红细胞假性增多
PLT
Q7:为什么血小板计数差异这么大？
某病人，男性，药物过敏，体表有出血点查血常规： 嗜酸细胞>30%， PLT 263×109/L（阻抗法）。镜
下核查嗜酸细胞时发现：有大量细胞碎片，血小板
不多见
重新用计数板计数血小板为：35×109/L
RBC
Q6:血象有何特点？下一步如何处理？
病例--红细胞凝集
血常规特点：
1.RBC数减少；HCT假性减低 2.MCH、MCHC增高；
对策：
1.37°C水浴15min后 2.对于严重凝集，采用血浆置换
该标本镜检图像
该标本镜检：高倍视野 下可见大量RBC聚集
讨论：
对于冷凝集素效价较的 标本，可以采用热水浴 ３７℃，２０ｍｉｎ的 方法进行纠正；对于冷 凝集素效价较高的标本， 可先进行热水浴３７℃ ２０ｍｉｎ，然后上机 测定标本，可获得 ＷＢＣ和ＰＬＴ值；再 进行置换血浆，可获得 ＲＢＣ、红细胞比容、 血红蛋白、ＭＣＶ、Ｍ ＣＨ和ＭＣＨＣ各值
10 fl
20 fl
30 fl
40 fl
60
150
250 fl
PLT 直方图
RBC 直方图
PLT 计数通过以下方式纠正! – 计数池计数
– 显微镜浏览评估
– 光学法测定PLT计数
红细胞碎片对血小板计数的干扰结果报告
XN 以PLT-F结果为最终报告结果
Q8：某血小板减少症患者，药物治疗后复查
血小板为19×109/L（阻抗法），临床医生疑
解离凝集的血小板, 并可进行
准确计数, 同时不影响其他主 要血常规参数的测定。。
影响PLT检测的常见因素
1.小红细胞及红细胞碎片对PLT检测的干扰：仪器在35-2
50fl的范围内分析红细胞,正常红细胞主要分布在50～150fl 范围内，当RBC体积小于35fL 会干扰PLT计数；RBC碎片会 使计数假性增高。 2.EDTA诱导假性血小板减少：由标本内特殊蛋白质与EDTA 抗凝剂发生反应，产生血小板聚 3.大血小板增多至计数减少：PLT正常直径约2～4μ m，在病
Ver.00-15推荐的规则设定
条件式 ItemMask(WBC) 动作 Refex(LW_DIFF)
Ver.00-16推荐的规则设定
条件式 ItemMask(WBC)
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
动作 Refex(DIFF)
★相关资料「XN flagging algorithm」有更新。
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总结WBC误差：
白细胞聚集导致白细胞减少 红细胞溶血不良导致白细胞假性增高 有核红存在导致白细胞假性增高
镜检图片：
Q5：思考为何两个通道WBC总数相差较 大？该如何处理？
RBC溶血不良
Menu
RBC溶血不良的原因：
肝功能低下(肝硬化、肝癌晚期、胆道堵塞) 异常血红蛋白症(Hgb-S症、Hgb-C症) 高脂血症 高胆固醇制剂输液治疗过程中
难溶红细胞
电镜下 正常RBC
电镜下 难溶RBC
WBC
Q3：思考白细胞计数受哪些影响？
Q4:什么情况下外周血会出现有核红？
缺氧
• 新生儿、溶贫、呼吸衰竭
髓外造血
• 骨髓纤维化、MDS、再障
髓血屏障受损 • 造血系统恶性疾病
病例--外周血出现有核红
血常规特点：
1.WBC显示低可信度 2.显示NRBC？可疑报警（XN仪器除外）
对策：
1.手工计数100个WBC并记录见到的NRBC 2.对于XE机型，加做NRBC 3.选用XN机型，NRBC自动修正
Ref (eye)
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WBC聚集时WBC的切换功能
新分析演算软件：Ver.00-16 有WDF通道测定时，从WBC-N（WNR通道）的结果切换为WBC-D（WDF通道）
Software Version
00-15 DIFF有 DIFF无 00-16 DIFF有 WBC Abn Scg WBC Abn Scg WBC Abn Scg ------有数值显示 WBC&D ---------有数值显示 （空白） 有数值显示 Discrete DIFF无 Flag WBC Abn Scg WBC(主页) ---WBC-N ---WBC-D （空白）
In the case that the blood including Hyaluronic acid (metastatic tumor)is measured -> because of WBC aggregation in WNRch WBC become falsely low.(WBC in WDFch has not been affected.)
0.7%的灵敏度
3倍颗粒计数
低值白细胞模式检测精度较全血模式高
重现性
新鲜血液 CBC + DIFF + WPC + RET + PLT-F LW mode and WB mode
3倍计数，令LW 模式结果更准确
田中雄三(东海大学医院)：Sysmex Journal Vol.34 Suppl.2 2011
理情况下，特别是巨核系统病态造血(如MDS)，会出现大量
的大血小板、甚至巨大血小板。
影响PLT检测的常见因素
4.采样技术的影响 5.PLT卫星现象所致假性血小板减少：PLT在体外黏附与成熟
中性分叶核粒细胞周围的现象。可能与自身免疫、血小板反
应素等有关。 6.冷球蛋白血症:冷球蛋白是免疫球蛋白，在温度低于37°C时 会产生沉淀
EDTA-K2依赖血小板聚集
对策： 用其他的抗凝剂（枸掾酸钠）采血 来鉴别是否由于抗凝不良造成的。 同时比较EDTA抗凝和枸掾酸盐抗 凝结果是证明EDTA依赖性假性血 小板减少症病例的重要方法，可以 排除采血错误的原因。放置30min 后，检测
推荐抗凝方法： ①用10倍浓度的EDTA(10mg/ml以 上)采血 ②EDTA+桔橼酸(10:1) ③桔橼酸钠(3.13%、3.8%) ④肝素(65IU) ⑤MgSO4(14%) ⑥ 预稀释模式进行检测
FSC
FSC
网织血小板）
PLT-O
IPF IPF PLT-F
SFL
SFL
Q9：思考为何会出现此现象？
• 某医院做血常规时发现一例PLT仅47×109/L，半 小时后仪器再次复查PLT，为180×109/L • 因使用流水线，前一份样本符合推片规则已推片， 镜下观察该血片，可见较多成簇的血小板。
血小板聚集解离现象
图（ ）。 2、PLT-I 比PLT-F低，同时报警出现血小板直方图异常。
3、在IPF散点图绿色区域出现大量散点，同时IPF升高到22.2%， 推测有大血小板。
○
门诊病例，血小板减少
巨大血小板解决方法：
• • RET 通道: —光学法检测血小板就可避免干扰（ PLT-O） PLT-F通道： —针对血小板线粒体DNA染色，特异性更高
细胞碎片干扰
• 细胞碎片或大量小红细胞 (MCV< 60 fl) – 与血小板体积接近 – PLT 假性增高，与临床不符 – 影响 RBC 结果，与临床不符 – 异常 RBC 直方图和异常 PLT 直方图
细胞碎片和大量小红细胞
“异常
PLT 直方图” 和 “异常 RBC 直方图”
PL
PU
RL
RU
注: 当PLT 和 RBC 不能被清晰 分离时就会发生! PLT 计数可能有偏差 (高或 低)
惑为什么一直治疗无效果？
巨大血小板
• 血小板板龄越小，体积越大 • 巨大血小板与红细胞体积接近
• 单纯的体积测定 (阻抗法) 使PLT 计数偏低
PL PU
100 % 20 % 10 fl 20 fl 30 fl
巨大血小板
IPF
镜下见到多个体积大小为 2个红细胞的巨大血小板。
分析： 1、在WNR和WDF通道上，由于大血小板形成出现的异常散点
Keio University Hospital
All sample （n=100)
Low PLT samples (<50 x 109/L)
异常值--最容易出临床差错的临检项目之二
低值WBC
白血病漏诊：异常细胞检出率 低，假阴性率高，导致漏诊
WBC
（WPC、低值WBC模式）
WBC低值计数重复性差： 化疗病人需要准确的WBC数、 NEU、IG数连续观察指导用药 WBC过低分类不准确： WBC过低，计数颗粒少，分类 结果不可靠，无法指导诊疗。