侵袭性真菌感染诊断与治疗

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3、Chamilos G et al. Haematological. 2006;91:986-989.
检出率(%)
实体器官移植易导致患者发生侵袭性真菌感染
一项对243例实体器官移植患者的尸检研究结果
一项自1985年至1994年进行的对243例实体器官移植后死亡患者的尸检研究,目 的在于分析实体器官移植患者真菌感染的流行病学。
血液恶性肿 瘤
(n =3,640) (n =1,010)
骨髓移植 (n =377)
HIV (n =263)
新生儿监护 病房
(n =54)
实体器官移 植
(n=886)
实体肿瘤 (n =863)
外科 (非移植)
合计
(n =1,906) (n =6031)
81.7 42.6 31.6 32.7 96.3 57.2 89.2 91.2
、Blumberg HM et al. Clin Infect Dis. 2001;33:177-186.
曲霉菌:宿主因素
侵袭性曲霉感染多伴发器官功能衰竭
100% 90% 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% 0%
发生侵袭性曲霉感染(n=37) 未发生侵袭性曲霉感染(n=74)
GM(半乳甘露聚糖)试验 --曲霉感染检测的影响因素
假阴性
假阳性
• 半乳甘露聚糖在血中存
在时间短,建议:
—高危人群每周至少检测 2次,动态观察
—结合影象学、培养 结果综合分析诊断
• 三唑类降低GM • 低侵袭性曲霉菌病 • 低曲菌负荷量
哌拉西林/他唑巴坦,colistin, cefazolin,
侵袭性真菌感染的诊断与治疗
山东省中医院ICU
真菌分类
•形态分类: (1)单细胞真菌,细胞呈圆形或椭圆形,不产菌丝,包括 酵母菌和类酵母样菌。 a、酵母菌是由母细胞以芽生方式繁殖,如新型隐球菌。 b、类酵母样菌以芽生方式繁殖,其不脱离母细胞的延长
• 芽体称为假菌丝,亦称假丝酵母菌即为各种念珠菌。 (2) 多细胞真菌,呈丝状,由菌丝和孢子组成,主要是霉
中性粒细胞缺乏易导致患者发生侵袭性真菌感染
尸检检出真菌感染的患者中,严重中性粒细胞减少患者占70%
无严重中性粒细胞减少者 有严重中性粒细胞减少者
(57/82)
(25/82)
30%
70%
一项三级肿瘤监护中心1989年至2003年期间1017例血液肿瘤患者的尸检结果,其中314例患者发生生侵袭性真菌感染。上 图为1999年至2003年的数据。
• 侵袭性曲霉感染
• 隐球菌乳胶凝集
19
真菌标本的镜检
• 是最简单也是最有用的实验室诊断方法。 • 优点在于简便、快速,阳性结果可确定真菌感染,阴性结果亦
不能排除诊断。
• 对于浅表和皮下真菌感染最有帮助。 • 在无菌体液的直接镜检中发现真菌成分常可确立深部真菌病的
诊断。
• 找到真菌丝有重要意义,特异性高于培养
• 隐球菌细胞壁为alpha-葡聚糖,故为阴性
•阳性结果只能代表存在侵袭性真菌感染,不 能确定种类
G试验
假阳性:
•手术中使用纱布、棉拭子等 •抗肿瘤准备:如蘑菇多糖、裂菌多糖(Kimura 1995) •免疫准备:白蛋白、球蛋白(Usami 2002, Ohata 2003) • 抗生素(amoxicillin-clavulanate) (Mennink-Kersten
Pfaller MA et al. Crit Rev Microbiol. 2010;36(1):1-53.
侵袭性真菌感染的诊断
IFI的四个组成部分
宿主因素
临床特征
微生物 检查
组织病理 学
现代诊断观念倡导分级诊断
拟诊
临床诊 断
确诊
侵袭性真菌感染的诊断
高危因素
侵袭性真菌感染的高危人群
侵袭性真菌感染高危因素
1.6
0.0
2.6
0.8
0.7
1.6
* 其它酵母包括6例马拉色菌属 ,26例肺孢子菌,12例红酵母,21例啤酒酵母和6例毛孢子菌 * 其它霉菌包括2例支顶孢菌,9例交链孢霉,3例双极孢菌,53例镰刀霉,10例拟青霉菌,13例赛多孢子菌,6例足分枝霉菌和1例
白色簇孢霉
院内真菌感染的病原体以念珠菌居多,各临床科室发病率有所不同
种属 念珠菌属 镰刀菌属 隐球菌属 曲霉菌属 青霉/拟青霉 接合菌纲
G+GM小结
GM
G

+

+
+

+
+
+
+


半乳甘露聚糖的动力学特点
G G
G G
G
G
G G G
G
G
G
G
G
G
G
G
GM 阳性
G
75
4.0
2.1
0.0
48.7
0.0
6.4
1.6
1.0
4.5
1.2
3.3
2.7
3.4
0.0
1.0
1.2
0.8
1.4
8.3
33.8 50.7
4.9
1.1
5.2
6.4
1.1
1.9
26.0
4.9
1.9
1.7
0.0
3.4
12.3
0.6
1.4
1.6
7.6
6.4
1.5
0.0
4.7
1.3
1.5
2.7
1.9
1.2
0.5
侵袭性真菌感染的诊断
2.临床特征
急性播散性念珠菌病
累及主要器官并引起功能障碍的临床表现
器官 肾脏 脑 眼 心脏 骨骼
皮肤 肝脏 脾脏 肺 骨骼肌
临床表现 症状性念珠菌尿 大脑功能性障碍,脑部大面积损伤引起的神经系统体征,脑膜炎 眼内炎,特征性视网膜棉絮样损伤,视力丧失或改变 心内膜炎、心肌炎并发心律失常导致的心力衰竭 骨髓炎伴有特征性严重疼痛,椎骨破坏并引起神经系统并发症,骨质破坏 及关节炎 红色结节性皮肤损害 腹痛,胆管阻塞,多发性脓肿 CT扫描可见的脓肿形成 肺炎 肌炎伴特征性严重肌肉疼痛
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真菌的细胞壁结构 Β-1-5)呋喃半乳糖残基
GM试验 半乳甘露聚糖
G试验
麦角固醇
Kartsonis NA. Presented at the 12th European Congress of Clinical Microbiology and Infectious Diseases. April 24-27, 2002. Milan, Italy.
G试验:侵袭性真菌感染 • EORTC/MSG:163 proven or probable IFI &170 control • Fungitell cut-off:60ng/ml • Sensitivity69.9%, specificity87.1%,PPv83.3%,NPV75.1%
菌属
念珠菌属 曲霉菌 镰刀菌属
León C et al. Crit Care Med. 2006;34(3):730–737.
侵袭性真菌感染的诊断 3.微生物学及病理学
真菌感染的实验室检查
• 真菌涂片
• KOH湿片、六胺银染色、墨汁染色、革兰染色
• 真菌培养 • G试验
• 侵袭性真菌感染(除外隐球菌、接合菌纲真菌)
• GM试验
ertapenem, SMZco, cefotaxime, ampicillin-sulbactam, cefepime
与其它细菌或真菌成分有交叉反应如青 霉、新型隐球菌、组织胞浆菌
肠道中定植的曲霉释放GM进入血液循环
含有谷物的食物中存在GM抗原,通过受 损肠黏膜进入血循环导致抗原血症,化 疗后出现严重黏膜炎的更易发生
毛霉属 根霉属 隐球菌 其他 总和
Proven IF
107 10 3
2 1 12 7 142
probable
4 12 —
— — — 5 21
平均pg/ml
775 1103 1652
Little Little Little
敏感性
82.6% 80% 100%
Ostrosky-Zeichner et al,CID 2005,41:654
83.8% 73.0%
43.2% 20.5%
16/37 15/74
31/37 54/74
100.0% 91.7%
37/37 66/74
急性肾功能衰竭
急性心脏功能衰竭
急性呼吸功能衰竭
一项自1997年7月至1999年12月进行的回顾性队列研究,其中37例患者确诊/拟诊为侵袭性曲霉感染。
Vandewoude KH et al. J of Hospi Infect. 2004;56;269–276.
隐球菌属
克柔念珠菌
光滑念珠菌
其它念珠菌
毛孢子菌属
热带念珠菌
酵酵母母属属
近平滑念珠菌
红红酵酵母母属属
季也蒙念珠菌
葡萄牙念珠菌
~60%
院内深部真菌感染常见的病原体
念珠菌属 隐球菌属 其它酵母菌* 曲霉菌属 接合菌 其它霉菌* 地方性真菌
2004-2008年间美国IFD病原体在各临床科室的分布(%)
普通病房
Walayama M et al. Kansenshogaku Zasshi. 2000;74(4):378-86.
念珠菌:宿主因素 使用中心静脉导管患者念珠菌感染的机会增加
一项自1993年至1995年美国6所外科ICU参与的研究,结果显示:念 珠菌血流感染患者多数接受了中心静脉插管
100% 80%
临床特征 高危因素床旁评分值可早期提示侵袭性念珠菌感染
床旁评分值*>2.5†时,提示开始早期抗真菌治疗将使此
类患者受益
高危因素
系数‡
P值
多部位念珠菌定植
1.112
0.003
外科手术后入住ICU
0.997
0.002
重症脓毒血症
2. 038
0.000
全肠外营养
0.908
0.020
*床旁评分值(Candida Score)=0.908(全肠外营养)+ 0.997(外科手术) + 1.112(多部位念珠菌定植)+ 2.038(重症脓毒血症) †床旁评分值为2.528时,结果的敏感性与假阳性率都较好;因此,确定2.5为临界值。 ‡所有变量,如存在计为1;不存在则计为0。所有P值均<0.05。
98%
93%
使用导管 未使用导管

60% 40%
P=0.04
P=0.01
20% 0%
41/42
2%
1/42
39/42
7%
3/42
中心静脉导管
三腔中心静脉导管
一项自1993年10月至1995年11月美国6所外科ICU参与的回顾性队列研究,共入选4276例患者,其中42例患者发生念珠 菌血流感染;对42例患者进行研究,目的在于分析念珠菌感染的高危因素。
• 菌如曲霉、毛霉菌 (3)双相型真菌,即同一真菌在不同环境条件下,生长成 酵母状或菌丝状,此两种形态可随条件改变而互变,如组织 胞浆菌、皮炎芽生菌、球孢子菌、副球孢子菌、马尔尼菲青
• 霉菌等。 (4)细菌样真菌,如放线菌、诺卡菌属
重要医学酵母菌分类
条件致病酵母菌
念珠菌属
非念珠菌属
白念珠菌
非白念珠菌
儿童和新生儿:FP83%(双歧杆菌交叉 反应)
多粘菌素,头孢唑啉,头孢他啶,头孢噻肟,厄他培南,氨苄西林舒巴坦,头孢吡肟
G试验(1,3-β-D-葡聚糖 )检测范围
•不仅可检测念珠菌感染
• 曲霉、肺孢子菌、镰刀菌、毛孢子菌、支顶孢霉
和很多霉菌均存在1,3-β-D葡聚糖( Miyazaki, J Clin Micro 33:3115, ‘95)
念珠菌感染*1
• 严重粒细胞缺乏 • 免疫功能低下 • 移植 • 入住ICU • 住院时间延长 • 糖尿病 • 肾功能衰竭 • 血液透析 • 使用广谱抗生素 • 中心静脉插管
曲霉感染*2
• 严重粒细胞缺乏 • 免疫功能低下 • 实体器官移植 • 入住ICU • 血液肿瘤 • 骨髓移植 • 长期应用激素治疗 • 慢性阻塞性肺病(COPD)
• 有菌部位则只有发现大量真菌菌丝方可作出诊断,通过直接镜
检一般可以区分念珠菌、隐球菌、毛霉(接合菌)等菌的感染。
The lancet, 2003, 3: 230-240
真菌培养
• 无菌部位标本 • 培养阳性:诊断价值! • 血、组织、无菌体液 • 外周血培养近平滑念珠菌阳性--评估导管! • 分析是否存在环境污染?实验室与临床沟通 • 菌量多少?
2006)
• 铜绿假单胞菌感染 (Mennink-Kersten 2008) •血透使用纤维素膜(Miyazaki 1995, Yoshioka 1989)
评价:
•高特异性,连续2次或以上阳性,提高敏感性 •IFI诊断比出现临床症状早10天,比HRCT早9天 •敏感性和感染严重程度相关(真菌负荷量) •动态观察感染程度和治疗疗效 •儿童BG水平高于成人。
*念珠菌感染高危因素还包括:胃肠外营养、使用免疫抑制剂、肿瘤和化疗、急性重症胰腺炎、多部位念珠菌定植、外科 手术等;曲霉感染高危因素还包括:实体器官肿瘤、HIV感染、重度烧伤、免疫抑制剂治疗、营养不良等。
1、Sotrosky-Zeichner L et al. Crit Care Med. 2006;34:857-863. 2、Meersseman W et al. Clin Infect Dis. 2007;45:205-16.
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