结核菌素试验课件

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一、结核菌素(Tuberculin)
(一)定义:由人工培养的结核杆菌的培养滤液 制成的一种生物制品,其有效成份为结核蛋白。
(二)使用:≥3月的婴幼儿接种卡介苗前筛选。 测试卡介苗接种后是否有效,于接种后12周进行, 阳性者表示接种成功。(其他略)
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六、观察
1.时间:72小时。 2.方法:一看、二摸、三量。看局部有无红晕 、双圈、水泡等。对衣袖较紧者,撸起袖子时要稍等 片刻再观察,否则会误为阴性。用手指上下、左右轻 轻来回触摸,不能挤捏,容易造成疼痛和假阳性。触 摸后用尺测量硬结边缘,根据手臂的纵横径垂直交叉 各测量一次,以毫米为单位记录,如10×12mm。 3.计算记录硬结平均直径:横径+纵径/2。
(二)部位:左前臂掌侧中间。如有疤痕、血管 瘤等无法注射时,可换臂,但需注明。
(三)剂量:0.1ml/人次。 (四)观察:72小时。
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三、反应机制
结素反应属于细胞介导的迟发型(Ⅳ)变态反应, 是由结核蛋白与携带免疫信息的小淋巴细胞(致敏T 淋巴细胞)接触后产生的变态反应。结核蛋白在生产 提取过程中发生部分变性,抗原成份已不完整,是半 抗原,其本身不能使动物致敏,只有加上腊质丁 (Wax D)才能使动物致敏,而腊质丁正是结核菌外 壳的组成成份。故只有当机体受到结核菌或卡介苗感 染后方能形成致敏T淋巴细胞而对结素产生反应,而 非感染者不对结素产生反应。
2.纯蛋白衍化物(Pure Protein Derivatine PPD ):用化学方法从结核菌培养液中提取出较纯结核蛋白 而制成的一种固体状结素。其纯度高,特异性强,可以 标准化,因此逐步取代了旧结素。
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二、皮试
(一)方法;皮内注射法(Mantoux法)Hale Waihona Puke Baidu最大 优点是剂量和结果都较准确。
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四、禁忌症
1.发热(T>37.5℃) 2.各种传染病及恢复期。 3.各种器质性疾病如心脏、血管系统、肾脏、肝脏 和胃肠等疾病急性期。 4.身体极度虚弱者。 5.患有局部或全身性皮肤病。 6.防御机制不健全者,如免疫缺陷,丙种球蛋白缺 乏者。 7.其他预防接种不到二周者。 8.本人或家属有过敏史或变态反应史。 9.神经及精神不正常,易出现晕厥、休克、癫痫等 情况者。
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结素反应共有二个阶段,第一个阶段是特异性阶 段。当结素进入致敏机体后,与循环中的致敏T淋巴细 胞接触,刺激T淋巴细胞释放大量免疫活性物质——淋 巴因子,如巨噬细胞游走抑制因子、转移因子、皮肤 反应因子、趋化因子、巨噬细胞凝集因子、淋巴毒素 等。第二个阶段是非特异性阶段。释放出的这些活性 物质可以促使巨噬细胞向有反应原的地方游走、聚集、 发育、繁殖,可以使局部血管扩张,通透性增加,导 致局部充血、渗出,
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4.结果标准: 我国现将结素试验反应结果分为三类: 阴性:无硬结或硬结平均直径<5mm; 阳性:硬结平均直径5-19mm; 强阳性:硬结平均直径≥15mm(成年人为20mm), 或有双圈、水泡、溃疡、皮疹等。如无20 mm,但有双 圈、水泡、溃疡、皮疹等也为强阳性。
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五、操作
1.试验前先核对药名、剂量、有效期及婴幼 儿,如有沉淀、安瓿破损及过期者不得使用。
2.用75%酒精消毒皮肤。 3.应用一次性注射器,刻度和针孔斜面一致 向上与皮肤平行刺入皮内,缓慢准确地注射0.1ml (含5U PPD)呈直径约为6-10mm大小白色隆起, 不要揉搓,会自行消退,不要用酒精棉球(签) 按压针眼。
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更多的细胞从血管向外浸润,在24小时后局部出 现红晕和硬结,48—72小时达到高峰,形成肉眼可见 的局部皮肤反应,反应强烈者可出现水泡、溃疡,严 重者可见前臂肿胀,疼痛、发热、周身不适等。
红晕是局部血管扩张所致,对判断机体致敏无意 义,而硬结是水肿加巨噬细胞浸润所致,是判断机体 致敏的依据。
(三)品种:OT、PPD(TB-PPD、BCG-PPD等)。 ( 四 ) 规 格 : 1ml/ 支 、 10 人 份 , 每 毫 升 含 PPD 1μg,相当于50个国际结素单位。
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1.旧结素(Old Tuberculin OT):以Koch最初方 法制成的结素。由于其制作简易,性质稳定,所以在较 长时间内一直使用。缺点是含杂质多,不易标准化,不 同生产单位或同一单位生产的各批效价不一。
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4.干扰因素: a、光线:直接日光照射10分钟,结素效价减少80% 。1955年WHO曾做过这样的研究,用光照射过的结素为 接种卡介苗的学生做测定,同时设对照组。结果发现光 照组90%以上反应减弱,较对照组相差最大达8mm。 b、温度:保存温度偏高可使结核蛋白变性而降低 效价,时间长了则结素会完全失效。 c、技术:注射剂量不足,未摇均匀,注射较深、 验看不仔细不熟练等。
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结素试验结果定性与定量之间的关系:
“-”
—— 硬结平均直径<5mm或无硬
结;
“+”
—— 硬结平均直径5-9mm;
“++” —— 硬结平均直径10-14mm;
“+++” —— 硬结平均直径15-19mm;
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