T0000-12-202 苦味质检测操作标准书

关键点提示
先加 HCl 溶液，后加待检样品，顺序不能颠倒。
2.1 一定要混合均匀，达到乳状。 2.2 如无法立即混匀，可将分液漏斗静置 1min 左右，再次摇动。 2.3 如在 5min 内无法摇匀至乳状，此样品废弃， 重新进行检测。
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题目：苦味质检测操作标准书
1. 目的 啤酒中所含的苦味物质对啤酒的口味影响很大，对同一品种的口味一致性起着决定性作
用。因此，苦味质分析结果的准确性对生产过程控制与工艺调整具有指导性的意义。
2. 范围： 本操作标准适用于检测麦汁、冷贮酒、清酒及成品酒的苦味质。
3. 相关文件和参考资料
3.1《分光光度计操作标准书》 3.2《振荡器操作标准书》 3.3《离心机操作标准书》 3.4《恒温水浴操作标准书》 3.5《控制样管理规定》 3.6《控制图管理规定》 4. 原理：
苦味质检测操作标准书
式中：A275——样品吸光度 B275——比色皿差值 50——换算系数 n——稀释倍数（麦汁×2，冷贮酒、清酒、成品酒×1）
8.3 检测结果保留一位小数。 8.4 将控制样的苦味质结果绘制控制图进行分析，见《控制图管理规定》。
9. 异常结果排查：
检测结果
控制图（数值、移动范围）
是
2
用途 振荡 读数 离心 振荡器转速校准 离心 萃取 吸取盐酸溶液 吸取麦汁样品、蒸馏水 吸取啤酒样品 吸取异辛烷 配置盐酸溶液 存放盐酸溶液 回收、存放异辛烷 样品除气 麦汁、冷贮酒样品过滤 麦汁、冷贮酒样品过滤 麦汁、冷贮酒样品过滤 比色
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7.2.2 比色皿
7.2.2.1 使用石英比色皿，在两个比色皿中加入纯异辛烷，在波长 275nm 检测吸光度。
7.2.2.2 标准：吸光度在±0.002 范围内。
7.2.2.3 每次检测前对比色皿进行校准，如超出标准应及时进行清洗（见 11.3）或更换。
7.2.3 振荡器
7.2.3.1 用秒表计时，记录振荡器 30s 旋转的次数，然后乘以 2 得到转速 rpm。
管放入离心机内进行离心，3500r/min，保持 10min。
4.4 如样品无法对称放置，可在离心管内加入同 质量的蒸馏水用于平衡。
5.1 做参比的异辛烷应与检测使用的异辛烷是
5.用 10mm 石英比色皿，于 275nm 波长下，以异辛烷作参 同一瓶，避免因异辛烷的差异影响结果准确
比，测定离心后上层清液的吸光度。
润滑效果为宜，过多的凡士林会影响检测结果）。
7.1.1.4 重新安装后左右旋转旋塞，检查密封性、润滑性，直至达到使用要求。
7.1.1.5 分液漏斗必须配套使用，顶部磨口塞、底部旋塞与分液漏斗不能混用。
7.1.2 振荡器：接通电源，开机检查固定架的牢固性。
7.2 仪器校准
7.2.1 分光光度计：见《分光光度计操作标准书》。
性。
5.2 比色操作时需盖上比色皿的盖子。
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7.4 流程图： 苦味质操作步骤
样品准备
移取 1mL 盐酸和 10mL 样品（麦汁样品：5mL 蒸馏水+5mL 麦汁）至分液漏斗内，摇动均匀。
准确吸取 20mL 异辛烷，把移液管垂直于液面， 距液面 10mm 左右进行添加，盖塞。
使用干燥的离心管
转速达到 3500r/min 后开始计时。离心管 应对称放置于离心 机内。可使用同质量
的蒸馏水衡重。
结果是否正常？
是
否
报告结果
异常结果排查
8. 数据处理： 8.1 记录分光光度计读数的结果。 8.2 计算
苦味质（EBC）=（A275－B275）×50×n
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6.2.1 盐酸溶液（3mol/L）：取 27 毫升浓盐酸，用蒸馏水定容至 100mL，存放于试剂瓶中，保 质期为 3 个月。 6.2.2 异辛烷（C8H18）：分析纯 6.2.2.1 标准：以重蒸水做空白在波长 275nm 检测吸光度，吸光度小于 0.005。 6.2.2.2 对于外购的异辛烷，根据生产批号进行校准，符合 6.2.2.1 标准方可使用，否则可按照 6.2.2.4 方法对异辛烷进行处理直至符合检测要求。 6.2.2.3 将检测过程中使用的异辛烷的废液及萃取苦味物质后的异辛烷上清液回收至试剂瓶 中，密封存放，按照 6.2.2.4 方法进行处理，符合 6.2.2.1 标准方可使用，否则需再次处理直至 符合检测要求。 6.2.2.4 异辛烷的处理方法：将异辛烷全部倒入试剂瓶中，根据异辛烷数量加入 4-5%（g/100mL） 的活性炭后具塞，摇匀，静置。每天振摇 3-4 次，2-3 天后用双层中速滤纸过滤，滤液应符合 6.2.2.1 标准方可使用，否则应再次进行处理直至符合检测要求。 6.3 标样/控制样： 6.3.1 标样：
无 6.3.2 控制样：
见《控制样管理规定》。 6.4 样品准备： 6.4.1 小心避免泡沫的损失，泡沫中含有不定比例的较多的苦味物质。 6.4.2 麦汁：使用双层中速滤纸过滤。 6.4.3 冷贮酒、清酒、成品酒 6.4.3.1 除气：用恒温至 20±0.5℃的样品 30-50mL 冲洗三角瓶 3 次弃去，倒入大约 100mL 样 品，将三角瓶固定在振荡器的架子上，在恒温（20±5℃）室内进行振荡，设定转速为 150±5 r/min， 振荡 5min，静置 5min。 6.4.3.2 过滤 6.4.3.2.1 清酒、成品酒：除气后直接用于检测，不需要过滤。 6.4.3.2.2 冷贮酒：用双层中速干滤纸过滤。 6.4.3.2.3 过滤时滤纸紧贴漏斗壁，滤纸边缘低于漏斗边缘，漏斗上面盖表面玻璃或平皿。 6.4. 3.2.4 过滤环境温度：20±5℃，相对湿度<80%。 6.4. 3.2.5 过滤后的样品立即检测。
用 10mm 石英比色皿，于 275nm 波长下，以异 辛烷作参比，测定离心后上层清液的吸光度。
苦味质检测操作标准书
先加 HCl 溶液，后 加待检样品，顺序
不能颠倒
一定要混合均匀， 达到乳状。
如无法立即混匀，可 将分液漏斗静置 1min 左右，再次摇 动。如在 5min 内无 法摇匀至乳状，此样 品废弃，重新检测。
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安卫因素
盐酸 1、 强腐蚀性 2、 强刺激性 3、 易挥发
异辛烷 1、易燃 2、易挥发 3、刺激性 酒精 1、易燃 2、易挥发 3、刺激性 活性炭 1、 燃烧时产生有毒
气体 2、 粉尘污染 1、 啤酒瓶爆炸伤人 2、 除气时三角瓶爆
结果是否在
标准范围
1.分光光度计使用不 正常，波长设置错误。
2.振荡器、高速离心
否
机转速设置超出范
否
围、转速显示与实际
仪器的使用
转速存在误差。
是否正常？
3.未使用正确的比色
对仪器进行必 要的清洗、校 准、维修
皿或比色皿超出标准 是
振荡过程 是否正常？
否 振荡温度、时间、转 速超出检测要求。
规范振荡操作。
炸伤人 触电
1、 配制或使用原液时在通风橱操作，并佩戴防护眼镜、耐酸碱手套、 防毒口罩；
2、 使用配制后的溶液时佩戴防护眼镜和耐酸碱手套； 3、 一旦接触皮肤或眼睛，立即用自来水冲洗； 4、 存放温度＜30℃，相对湿度＜85%； 5、 密封保存，与碱类、胺类、碱金属、易（可）燃物分开存放。 1、使用和处理时佩戴防护眼镜和手套； 2、一旦接触皮肤或眼睛，立即用自来水冲洗； 3、远离火种、热源，存放温度＜30℃； 4、密封保存，与氧化剂分开存放。 1、配制、使用时佩戴防护眼镜和手套。 2、一旦接触皮肤或眼睛，立即用自来水冲洗。 3、远离火种、热源，存放温度＜30℃。 4、密封保存，与氧化剂、酸类、碱金属、胺类等分开存放。 1、 使用时在通风橱操作，并佩戴防护眼镜、手套、防尘口罩； 2、 一旦接触皮肤或眼睛，立即用自来水冲洗； 3、 远离火种、热源； 4、 密封保存，与强氧化物、强酸分开存放。
将苦味物质用异辛烷从酸化的样品中萃取出来，在波长 275nm 下，以纯异辛烷做空白， 测量萃取液的吸光度。
பைடு நூலகம்
5. 环境/安卫因素
项目
要素内容
控制措施
废酒液 废滤纸
排入下水道，用自来水冲洗。 分类回收处置。
环境因素
废啤酒瓶、瓶盖、易 分类回收处置。
拉罐
废盐酸
回收、中和、稀释后排放，用自来水冲洗
异辛烷
使用活性炭吸附回收。
500-1000mL 容量瓶 500-1000mL 试剂瓶 1000-5000mL 棕色试剂瓶
500mL 三角瓶 250-500mL 三角瓶
漏斗 中速滤纸 10mm 石英比色皿
6.2 试剂：
最小分度值 1rpm 0.001
100rpm 0.01s
数量 1 1 1 1
1（单一样品） 1（单一样品）
1 2 1 1 1 1 1 1（单一样品） 1（单一样品） 1（单一样品）
是
混合 是否均匀？
否 未混合均匀达到乳状
规范操作过程。
是
离心 是否正常？
1.离心时间、转速超
否
出检测要求。
2.上清液混浊。
规范离心操作。
是
苦味质操作 步骤
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10. 结束/清理： 10.1 吸管 10.1.1 可使用少量清洗剂进行刷洗，自来水、蒸馏水冲洗干净，室温下放置备用。 10.1.2 异辛烷吸管在正常使用时不需要刷洗，如管壁内附有水珠、杂质时可使用少量清洗剂 进行刷洗，自来水、蒸馏水冲洗干净，控干，室温下放置备用。 10.1.3 如吸管内壁附有难以清理的杂质，可用少量铬酸洗液浸泡后再刷洗。 10.2 分液漏斗的刷洗：可使用少量清洗剂进行刷洗，自来水、蒸馏水冲洗干净，控干，室温 下放置备用，刷洗时旋转底部磨口塞，与分液漏斗一起刷洗。 10.3 比色皿：正常使用时不需要刷洗，如比色皿内壁附有水珠、杂质时，可按照维护操作 11.2 进行擦洗。 10.4 清洁振荡器，离心机。 10.5 清洁分光光度计：见《分光光度计操作标准书》。 11. 维护： 11.1 仪器维护：见《分光光度计操作标准书》。 11.2 比色皿，用脱脂棉蘸无水酒精擦洗，擦洗时注意不要在比色皿壁上留下划痕，用蒸馏水 清洗干净后，放在防尘盒中。 12. 测量/过程研究：
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批准：董建军
编号：T/0000-12-202
审核： 皮向荣
编写：闫鹏
青岛啤酒股份有限公司
Tsingtao Brewery Co.,Ltd 技术标准
路径：技术标准/检验标准/苦味质检测操作标准书
发布日期：2005.06.01 修订状态：4 修订日期：2008.01.28
用手拿住漏斗的柄部旋转摇动，至溶液混合均匀 成乳状，并粘漏斗壁为止。
将分液漏斗放到振荡器的架子上进行振荡， 设定转速为 150±5 r/min，15 分钟。
停止振荡，静置分层 5min 左右。
从漏斗下部旋塞处放掉下层水相，将上层乳状溶 液从漏斗的上口处倒入离心管中，盖塞。
将离心管放入离心机内进行离心， 3500 转/分钟，保持 10 分钟。
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7. 操作： 7.1 设备安装：
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7.1.1 球形分液漏斗
7.1.1.1 将分液漏斗插在漏斗架上，将下部的旋塞关闭。
7.1.1.2 检查底部旋塞的密封性、润滑性。
7.1.1.3 如发现滴漏或旋转不流畅时，将旋塞拔出刷洗干净，擦干后涂抹少量凡士林（以达到
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3.将分液漏斗放到振荡器的架子上进行振荡，设定转速为
150±5 r/min，15 分钟后，停止振荡，静置分层 5min 左右。
4.1 应使用干燥的离心管。 4.从漏斗下部的旋塞处放掉下层水相，将上层乳状溶液从 4.2 转速达到 3500r/min 后开始计时。
漏斗的上口处倒入离心管中并盖好离心管的盖子。将离心 4.3 离心管应对称放置于离心机内。
1、 佩戴防护眼镜和手套。 2、 建议选择聚乙烯三角瓶用于样品的除气。
正确使用各种电器，安全用电。
6. 准备：
6.1 仪器和设备：
名称 回旋式振荡器 紫外分光光度计 离心机（水平转头）
秒表 50mL 具塞离心管 125mL 具塞球形分液漏斗
1mL 刻度液管 5mL 单标线（大肚）吸管 10mL 单标线（大肚）吸管 20mL 单标线（大肚）吸管
7.2.3.2 每次使用振荡器前进行转速校准。
7.3 操作程序与关键点提示
操作程序 1.吸取 3mol/L 的 HCl 溶液 1mL 加入分液漏斗内，准确吸 取排气后的 10mL 待检样品（麦汁样品：5mL 蒸馏水+5mL 麦汁），加入到分液漏斗内，摇动均匀。
2.准确吸取 20mL 异辛烷，把移液管垂直于液面，距液面 10mm 左右进行添加，加完异辛烷后将分液漏斗的上口塞 好，用手拿住漏斗的柄部旋转摇动，至溶液混合均匀成乳 状，并粘漏斗壁为止。