伪狂犬病毒变异株的致病性、分子特征及基因缺失疫苗的研制

伪狂犬病毒变异株的致病性、分子特征及基因缺失疫苗的研制

一、伪狂犬新疫情的思考

流行路线

从2011年开始我国猪群伪狂犬病重新流行，先从华北地区开始，随后从北到南，迅速席卷全国，直到现在仍没有得到很好的控制。

流行症状

目前流行的伪狂犬病以母猪流产和仔猪神经症状及死亡为两大症状。

流行规律

一是感染后潜伏期更长；二是保育猪，甚至中大猪的临床症状更加典型，更加严重；三是种猪终生带毒，造成繁殖障碍和垂直传播；四是疫苗免疫保护期缩短。

流行趋势

农业部统计数据显示猪伪狂犬病发病率，从2011年到2014年呈上升趋势。

多个监测机构数据也显示从2011年到2014年虽然伪狂犬gB抗体阳性率一直稳定在高位，但gE抗体阳性率逐年上升，说明我国伪狂犬病出现了新的特点。

二、临床症状

临床表现

母猪流产（整个妊娠过程都有可能流产）；仔猪神经症状和死亡，有可能出现转圈现象。

剖检变化

脑膜充血、出血、水肿；扁桃体、肝脏和脾脏常见散在的白色坏死点；肺水肿，同时又小叶性肺炎；神经系统呈弥漫性非化脓性脑膜炎

三、分子生物学特征

伪狂犬只有一个血清型，不同毒株在毒力和生物学特点方面存在差异。伪狂犬有70个以上的基因，可编码70-100种病毒蛋白质。但

成熟的病毒粒子约有50种蛋白质。

决定毒力的因素

1、囊膜蛋白。已被定位测序的囊膜糖蛋白有11种，分别为：gb、gc、gd、ge、gi、gl、gh、gg、gk、gn和gm。Gb、gd、gh、gl 是感染必须的。

2、酶蛋白。胸苷激酶TK，蛋白激酶PK、核苷酸还原酶等。TK 是主要毒力基因。

3、衣壳蛋白。主要与细胞免疫有关。

那么，造成目前猪伪狂犬病新流行的原因究竟是什么呢？

多个研究机构的研究表明目前分离到的PRV流行毒株同源性相近，但是与经典毒株有一些差异，尤其是在ge蛋白上与Bartha-K61毒株基因序列存在显著差异，并且毒力更强。

四、常见疫苗

1、灭活苗

国内主要是鄂A株全病毒灭活疫苗，免疫原性好。抗原含量高。使用安全。

缺点：保护周期短，无法鉴别疫苗抗体和野毒抗体

2、自然弱毒苗

国内使用最多的就是Bartha-K61株。主要是在US区，整个gE 基因和11K及部分gI和28K片段的大缺失。

BUK株，US区绝大部分gE基因缺失。

3、基因工程疫苗

HB-98，定向敲除TK、gG基因。

HB-2000，定向缺失TK/gE/gI基因。

SA-215，基因工程切除gE 、gI和TK基因。

4、亚单位疫苗

gB、gC、gD基因克隆到表达载体上，表达后辅以佐剂。

安全性高。避免有害免疫原。可鉴定。

费用昂贵，免疫原性差。

5、核酸疫苗

将伪狂犬毒力基因克隆到表达质粒上，直接注射。

6、基因工程活载体疫苗

将伪狂犬毒力基因或者弱毒株克隆到载体病毒上，腺病毒、猪痘病毒等。

五、伪狂犬防控建议

1、生物安全

①是做好引种检测，杜绝引入带毒后备猪；

②是严格控制车辆、物品和人员的进出与消毒；

③是做好防鸟、灭鼠工作；

④是定期的血清学监测以了解免疫和感染动态。

2、科学的防疫程序

猪伪狂犬病野毒阴性场

种猪：一年普免3次，每次间隔4个月，按照一次活疫苗加灭活苗加强的程序循环执行；

后备：配种前8周免疫1次活疫苗，配种前4周加强免疫1次；

仔猪：3日龄滴鼻免疫活疫苗，45日龄肌注活疫苗，80日龄肌注灭活苗，130日龄肌注活疫苗；

猪伪狂犬病野毒阳性稳定场

种猪：一年普免3次活疫苗，每次间隔4个月；

后备：配种前8周免疫1次活疫苗，配种前4周加强免疫1次；

仔猪：2日龄滴鼻免疫活疫苗，35日龄肌注活疫苗，100日龄肌注活疫苗；

猪伪狂犬病野毒阳性不稳定场（发病猪场）

1、加强抗体检测

2、坚决淘汰gE抗体阳性公猪。母猪一年普免4次活疫苗，每次间隔3个月

3、用gE抗体阴性后备母猪逐步替换母猪群，后备母猪配种前补免一次疫苗

4、仔猪：1日龄肌注活疫苗2头份，35日龄肌注活疫苗，75日龄肌注活疫苗，120日龄肌注活疫苗；