反复自然流产患者主动免疫治疗后血清HLA抗体的变化及意义

反复自然流产患者主动免疫治疗后血清HLA抗体
的变化及意义
王立萍,孙福廷,阎东河,李新菊,李廷孝,赵月凯(潍坊市人民医院输血科,261041)摘要:目的探讨反复自然流产(R S A)患者主动免疫治疗后血清中抗人类白细胞抗原抗体(HLA抗体)变化及抗体产生与治疗效果的关系。

方法采用酶联免疫法(EL IS A法)检测RSA患者主动免疫治疗前后血清中的H LA抗体,采用统计分析方法分析抗体产生率及抗体产生与治疗效果的关系。

结果180例接受主动免疫治疗并再次妊娠的RSA患者中,治疗后再次成功妊娠141例(成功率78133%),失败39例(21167%)。

其中产生H LA抗体的83例中,妊娠成功者63例,失败者20例,成功率75190%;未产生HLA抗体的97例中,妊娠成功者78例,失败者19例,成功率为80141%。

两者比较P>0105,无统计学意义。

结论主动免疫治疗可使大多数RSA患者再次妊娠成功,并能刺激机体产生HLA抗体,但不能以产生HLA抗体作为评价和预测治疗效果的指标。

关键词:反复自然流产;主动免疫治疗;HLA抗体
中图分类号:R714121文献标识码:A文章编号:1006-9534(2009)10-0081-02
The change s o f HLA an ti b od ies in the seru m s o f recu rren t spontaneous abortion pa tients a ft e r active m i m uno t he rapy and the significance o f the change s.WAN G Li-p i ng,SU N Fu-ti ng,LI X in-ju,et al.(D epart m ent of B lood T ansfusion, W ei fang P eop le's H osp ital,W ei fang,261041)
Abstrac:t O b j ective:To i nvesti ga te the changes o f the an tibodies aga i nst hu m an leukocy te antigen(HLA anti bod ies)i n seru m o f t he R ecurrent spontaneous abortion(RSA)pati ents a fter acti ve i m muno therapy and i nvesti gate t he relati onship bet w een t he anti body producti on and the treat m ent e ffect.M ethods:T he enzy m e-li nked i m m unosorbent assay(EL ISA)was used to detect t he HLA an t-i bod i es i n se ru m of t he RSA pa ti ents before and a fter the ac tive i m muno t herapy.A nd then the m ethods o f sta ti sti ca l analysis w ere used to ana l y ze the antibody producti on rate and assay the re l a tionsh i p bet ween the anti body production and the treat m ent effect.R esults: In the180cases of the RSA patien ts w ho had accepted the acti ve i m m unotherapy,there w ere141cases that had been s uccessfull y treated(the success rate w as78133%),and39cases o f fa ilure(21167%).In all o f the83cases that had produced HLA anti bod-ies,t here were63cases o f successf u l pregnancy,and20cases o f fa ilure.T he success rate was75190%.A nd i n a ll of the97cases tha t had not produced HLA an tibod i es,there we re78cases of successf u l pregnancy,and19cases of fa il ure.The success ra te w as 80141%.T here w as no t ma rked difference(P>0105)bet w een t he t w o g roups.Conc l usi ons:A ctive i m m unothe rapy cou l d sti m u-late t he body to produce HLA antibodies,but HLA anti body was not an i nd i cato r t hat could be used to evalua te and f o recast the trea-t m ent effec t.
Key words:R ecurrent spontaneous abo rti on;HLA anti bodies;A ctive i m muno t herapy
医学上定义反复自然流产(RSA)为连续两次以上,在同一妊周内发生了胎停育,进而出现流产的现象。

严格说来反复自然流产并不是一种疾病的名称,而是很多种疾病的一种共同表现。

临床统计大约有43种左右的疾病能够引起流产。

其中免疫因素占40%~60%。

免疫因素包括自身免疫和同种免疫。

由同种免疫因素引起的RSA用免疫学方法治疗可获得满意的治疗效果,但其治疗机理仍不十分清楚。

目前很多学者认为是主动免疫治疗后产生了HLA抗体使再次妊娠获得成功。

笔者通过分析180例R S A患者主动免疫治疗后HLA抗体的产生与治疗效果的情况认为HLA抗体的产生与否不是再次妊娠获得成功的关键。

资料与方法
1.样本来源选择自1999年5月~2008年9月在我院门诊就诊的RSA接受主动免疫治疗且再次妊娠的患者180例,连续自然流产\2次,排除夫妻双方及胚胎染色体异常、子宫解剖结构异常、内分泌异常、生殖道感染、自身免疫病等病因引起的流产。

提供。

3.治疗方法首先确定丈夫无传染性疾病(经血传播的乙型肝炎、丙型肝炎、艾滋病、梅毒等疾病),若丈夫有某种传染病,选用无关健康的第3者。

抽取供者静脉血20m,l常规分离淋巴细胞,生理盐水洗涤3次,配成淋巴细胞悬液112 m,l含淋巴细胞约2-6@106个。

于患者前臂内侧分6点皮下注射,每点012m l。

4.治疗方案孕前法:每间隔三周治疗一次,四次为一疗程,治疗第二次后计划妊娠,一疗程结束后三个月内未孕者,孕后再追加治疗1-2次。

孕后法:孕早期(最好孕周<5周)每间隔一周治疗一次,连续治疗2-4次。

5.HLA抗体检测抽取患者外周血2m,l分离血清,用EL ISA法进行测定。

按试剂盒说明书操作。

6.统计学分析采用V2检验。

结果
11180例RSA患者依据上述治疗方案接受免疫治疗后,再次妊娠成功141例,再次流产39例,成功率78133%,与文
21180例接受治疗并再次妊娠的患者中,治疗后有83例产生HLA抗体(抗体产生率46111%),再次妊娠成功63例,成功率75190%;未产生抗体的97例中,成功78例,成功率80141%,两者比较V2=11463@10-8,P>0105,无统计学意义。

HLA抗体产生对疗效无显著影响(见表1)。

表1180名RS A患者免疫治疗后产生HLA抗体及妊娠情况
HLA抗体妊娠结局
成功失败
阳性6320
阴性7819
合计14139
讨论
自1981年T aytor和Beer等创立了R S A淋巴细胞主动免疫疗法,经过近30年的临床验证,治疗效果已是毋庸置疑,但其治疗机理仍不十分清楚。

因主动免疫治疗是用他人淋巴细胞对患者进行皮下注射,所用淋巴细胞上富含人类白细胞抗原,因此能刺激机体产生HLA抗体,是否产生抗体与接触抗原量、免疫次数等因素相关。

有学者认为是主动免疫治疗后产生的HLA抗体使再次妊娠获得成功,因此主张主动免疫治疗必须同时检测HLA抗体,治疗至产生HLA抗体后方可计划妊娠[1]。

笔者对我院十几年来采用前述治疗方案治疗的R S A 患者情况分析后认为这一做法缺乏科学理论依据。

十几年来,在我院门诊就诊并接受前述治疗方案治疗的R S A患者,再次妊娠的180例中,再次妊娠成功141例,成功率78133%,与文献报道一致[2,3]。

治疗后产生HLA抗体的83例中,再次妊娠成功63例,成功率75190%;未产生H LA 抗体的97例中,成功78例,成功率80141%,两者比较P> 0105,两成功率比较无显著性差异。

因此认为产生HLA抗体不是主动免疫治疗成功的必备条件。

说明前述治疗方案科学有效,而且病人痛苦小,经济负担轻,值得读者借鉴。

近年来,有关RSA发病机理及主动免疫治疗的治疗机理的研究越来越多。

研究表明,TH
1
型细胞因子可能通过增强NK细胞杀伤活性,对着床、滋养细胞生长、胚胎发育和胎儿生存有不利的影响,而TH
2
型细胞因子则可抑制TH
1
型免疫应答,防止其对滋养细胞和胎儿的继发损伤,使妊娠得以
成功进行。

有研究表明,习惯性流产的发生在于TH
1
和TH
2细胞之间的平衡,和TH
1
与TH
2
型细胞因子含量的比例,这个比例过高或过低都会导致病理性妊娠。

已有研究证实主
动免疫治疗能上调血清中TGF-B1(属TH
2
型细胞因子)水平,发挥免疫抑制功效,诱导母体对胚胎的免疫耐受,保护胚胎免受母体的排斥,导致妊娠成功[4]。

另据研究表明所有的滋养层细胞均不表达经典的H LA -Ñ类和HLA-Ò类移植抗原,而选择性表达H LA-G抗原。

目前已确定,HLA-G可以与多种NK细胞受体结合,调节NK细胞活性。

HLA-G还通过诱导凋亡清除同种异型母
体CD
8
+T细胞,并抑制母体CD
4
+T淋巴细胞对胚胎细胞的反应,通过这两条途径来诱导T淋巴细胞对胎儿的耐受,维持正常妊娠过程。

HLA-G的表达降低甚至不表达,都会产生妊娠过程的不正常状态[5]。

主动免疫治疗是否会影响HLA-G在滋养层细胞的表达还有待进一步研究。

总之,主动免疫治疗是一种治疗RSA的有效方法,值得加以推广。

但其治疗机理尚待进一步研究。

目前很多学者认同主动免疫治疗通过多种途径诱导机体免疫耐受的观点,但究竟是产生了何种免疫抑制因素尚不十分清楚。

参考文献
[1]罗晓红,等.反复自然流产患者免疫治疗前后封闭抗体的变化及
其意义[J].中国卫生检验杂志,2007,10(17):1897-1898. [2]辛力.免疫学因素与反复自然流产关系的研究进展[J].中国优
生与遗传杂志,2003,11(4):143-144.
[3]李尚为,黄仲英,马黔红,等.原因不明性反复自然流产患者免疫
治疗结局的探讨[J].实用妇产科杂志,2001,(02):105-106. [4]孙福廷,等.原因不明习惯性流产免疫治疗前后血清TGF-B1变
化研究[J].中国优生与遗传杂志,2006,14(7):24.
[5]王春昊,赵建伟.免疫学因素与反复自然流产相关性研究[J].中
国社区医生,2005,4(7):16-18.
收稿日期:2009-09-03
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