微生物对不含氮有机物和含氮化合物的转化作用

思考题
纤维素培养基中加滤纸的作用是什么？ 土壤中主要的蛋白质分解细菌有那几种？ 硝化细菌培养基中为什么不加有机成分？
硝化细菌从那里获得碳素营养？ 进行反硝化作用的必要条件是什么？
实验二十二
结束
实验程序8
（硝化作用）
材料： 1. 100mL三角瓶，内装硝化细菌培养液30mL， 硝化作用培养基。 2. 格利斯（Griess）试剂Ⅰ、Ⅱ，二苯胺试剂， 土壤等。
方法： 1.取菜园土1g左右接种于盛有铵盐培养液的三角 瓶中。 2.放入28~300C培养7~14d。
实验程序9
（硝化作用）
检查结果： 取培养液两滴于比色碟中，加格利斯试剂Ⅰ及Ⅱ各 1滴，如出现绛红色，则证明硝化作用第一阶段正 在进行，即有HNO2产生。另取培养液2滴于比色 碟中，加二苯胺试剂1~2滴，观察有无蓝色出现， 如有蓝色出现，说明硝化作用第二阶段也正在进行， 即有硝酸存在。以上结果表明硝化作用的两个阶段 都在进行中，若只有红色出现，说明只有硝化作用 第一阶段存在，若有蓝色出现，则说明硝化作用已 彻底完成。
实验程序5
（蛋白质的氨化作用）
材料： 1.牛肉膏蛋白胨培养液一管（5mL）。 2.石蕊试纸（红色）、土壤样品、比色碟、奈氏 （Nessler）试剂。
方法： 1.放1小匙土粒于牛肉膏蛋白胨培养液的试管中。 2.在管口内壁悬挂湿红色石蕊试纸1条（见图），然后 塞好棉塞，放入28~300C的温箱中培养2—3d。
实验程序10（反硝化作用）
材料： 1.内有杜氏小管的反硝化作用培养基。 2.格利斯试剂Ⅰ及Ⅱ，水稻土、比色碟等。
方法： 取反硝化作用培养基1管，放入土壤少许，塞上 棉塞，于28—300C培养1周。
检查结果： 1.分子态氮：在培养过程中如有氮气产生，则培养液 表面有气泡层，或小支管中有气体聚集。 2.取培养液两滴于比色碟中，加格利斯试剂Ⅰ及Ⅱ各1 滴，如出现红色则证明有反硝化作用产生的亚硝酸。
（中温性纤维素分解微生物对纤维素的分解）
材料： ⒈维素分解细菌琼脂培养基和深层培养液。 ⒉菜园土、镊子、无菌培养皿、直径9cm的无菌 滤纸、尼龙绳、橡皮圈、染色液等。
好气性纤维素分解菌对纤维素的分解 厌气性纤维素分解菌对纤维素的分解
实验程序2
（好气性纤维素分解菌对纤维素的分解）
方法：土粒法 ⒈ 取已融化的纤维素分解细菌琼脂培养基1管,倒入无菌 培养皿中，制成平板。 ⒉ 用镊子取无菌滤纸1张，放入已凝固的琼脂平板上，使 之紧贴，以使滤纸表面湿润。 ⒊ 用镊子取肥沃菜园土10余粒，均匀放在滤纸表面，进 行接种（见图）。 ⒋ 放入28～300C条件下培养7—10d。 ⒌ 结果检查：先观察土粒周围有无黄色、桔黄色、棕色 等色斑出现。土粒周围滤纸有无破碎变薄现象。而后挑取 少许菌体进行涂片、固定、染色，干燥后，油镜观察并绘 图。
实验二十二
微生物对不含氮有机物和 含氮化合物的转化作用
微生物对不含氮有机物和 含氮化合物的转化作用
目的要求 实验程序 思考题
目的要求
了解几种物质的转化作用及其检 查方法
实验程序
中温性纤维素分解微生物对纤维素的 分解（好气性、厌气性）
蛋白质的氨化作用 硝化作用 反硝化作用
实验程序1
实验程序3
（好气性纤维素分解菌对纤维素的分 解）
实验程序4
（厌气性纤维素分解菌对纤维素的分解）
以接种匙取水稻土少量,接种在装有滤纸条纤维素深层培 养液中,套上试管套,再用尼龙纸及橡皮筋将管口扎紧.
放入35~370C条件下培养10~15d。 取出试管，观察培养液中滤纸条有无被分解而透空的地
方，如有空洞或滤纸边缘有破碎现象，表示厌氧纤维素 分解细菌已大量繁殖，否则继续培养。 用接种环自发酵液滤纸破碎处取菌液一环在载玻片上涂 片、固定、染色、镜检并绘图表示观察到的细菌形态。
实验程序6
（蛋白质的氨化作用）
实验程序7Fra Baidu bibliotek
（蛋白质的氨化作用）
检查结果： 1.观察试纸颜色有无变化，培养液是否浑浊或产 膜。如试纸变蓝，说明有氨生成；如培养液浑浊 或产膜，则说明有大量氨化细菌聚集。 2.取培养液两滴于比色碟中，加入奈氏试剂1滴， 如有棕色或黄棕褐色出现，也说明有氨生成。 3.取培养液1环,制成涂片、染色，油镜下观察氨 化细菌的形态，并绘图。