草乌4种不同炮制方法对比

草乌的4种不同炮制方法对比
【摘要】目的比较蒙药草乌经不同方法炮制后其总生物碱和酯型碱的含量。

方法采用高效液相色谱法，以总生物碱和酯型生物碱含量变化为指标，比较草乌不同炮制方法的优劣。

结果草乌经不同方法炮制后其酯型生物碱的含量均有不同程度的降低。

结论经多指标简易试验评分法得出最佳炮制工艺为：烘制法。

【关键词】高效液相色谱法；草乌的炮制工艺；总生物碱；酯型生物碱
草乌（aconiti kusnezoffii）为毛茛科植物北乌头（aconitum kusnezoffii reichb）的干燥块根。

味辛，性热，苦，有大毒。

具有祛风除湿，温经止痛的功效。

草乌的有效成分是总生物碱，其毒性成分是双酯型生物碱，临床使用时须经炮制使剧毒的双酯型生物碱水解成单酯型生物碱[1-2]。

现从草乌的炮制工艺中选出传统诃子制的工艺[3]，烘制的最优工艺[3]，奶制的最优工艺，炮制同一批草乌，比较炮制后总生物碱和酯型碱的含量。

1资料与方法
1.1辅料伊利纯牛奶（内蒙古呼和浩特市金川开发区金四路8号生产）
1.2药品与试剂
1.2.1药品
1.2.1.1标准品乌头碱、次乌头碱、新乌头碱（批号分别为110720-200410、110798-200404、110799–200404，中国药品生物
制品检验所）。

1.2.1.2生草乌市售（批号为2010038），包头市奇力康医药专供，经内蒙古医科大学乔俊缠教授鉴定为aconitum kusnezoffii reichb。

1.2.1.3诃子市售（批号为20100318），质量标准符合《中国药典》[4]2010版一部。

1.2.1.4诃子汤按照文献[3]中的方法自制。

1.2.2试剂乙腈：色谱纯，天津市大茂化工制剂厂；20101029；四氢呋喃：色谱纯，天津市大茂化工制剂厂；20100621；异丙醇：分析纯，天津市巴斯夫化工有限公司；20100507；乙酸乙酯：分析纯，天津市河东红岩试剂厂；20100324；冰乙酸：分析纯，天津市大茂化工制剂厂；20060316；无水乙醇：分析纯，天津市化学试剂三厂；20090410；乙醚：分析纯，北京化工厂；20081018；氨水：分析纯，天津市大茂化工制剂厂；20101202；三氯甲烷：分析纯，天津市化学试剂三厂；20100820。

1.3实验仪器电子计重秤acs-h1（凯丰集团有限公司），电热恒温干燥箱model skg-02（黄石恒丰医疗器械有限公司），电子天平al204（梅特勒-托利多仪器上海有限公司），高校中药粉碎机hx-100型（浙江省永康市溪岸五金药用具厂），旋转蒸发器re-52c（巩义市英峪予华仪器厂），数控超声波清洗器kq-250de（昆山市超声仪器有限公司），高效液相色谱仪（黄石恒丰医疗器械有限公司）。

1.4方法
1.4.1草乌炮制方法
1.4.1.1生草乌将草乌除去杂质，备用。

1.4.1.2诃子制按文献[3]的方法：将草乌除去杂质后，在诃子汤中浸泡3天（10kg草乌，3kg诃子煎汤30l），当到口尝微有麻舌感时取出晾干。

1.4.1.3烘制按文献[3]的方法：将草乌水润至无干心，切成2-4mm 的厚片，在110℃下烘制4h。

1.4.1.4纯奶制将草乌水润至无干心，用纯牛奶浸泡2天，每天搅动一次。

1.4.2对照品溶液与供试品溶液的制备
1.4.
2.1对照品溶液的制备精密称取乌头碱、次乌头碱和新乌头碱对照品各约5mg，置5ml量瓶中，加异丙醇-氯仿（1：1，v/v）溶解并稀释至刻度摇匀。

置冰箱4℃冷藏，备用。

1.4.
2.2供试品溶液的制备酯型生物碱：取本品粉末（过三号筛）2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加氨试液3ml，精密加入乙酸乙酯-异丙醇（1：1，v/v）溶液50ml，称定重量，超声处理（功率300w，频率40khz；水温在25℃以下）30分钟，放冷，再称定重量，用上述溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，减压回收溶剂至干（40℃以下），残渣精密加入异醇-三氯甲烷（1：1，v/v）3ml溶解，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，即得。

1.4.3酯型生物碱的测定按照2010版《中国药典》[5]第一部草乌项下高效液相色谱法测定酯型生物碱的含量。

高效液相色谱图
（见图1）。

1.4.4总生物碱的测定按照2010版《中国药典》[4]第一部制川乌项下滴定法测定总生物碱的含量。

取草乌粗粉约10g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加乙醚-三氯甲烷（3：1，v/v）50ml与氨试液
4ml，密塞，摇匀，放置过夜，滤过，药渣加乙醚-三氯甲烷（3：1，v/v）50ml，连续振摇1小时，滤过，药渣在用乙醚-三氯甲烷（3：1，v/v）洗涤3-4次，每次15ml，滤过，洗液与滤液合并，低温蒸干。

残渣加乙醚-三氯甲烷（3：1，v/v）5ml使溶解并蒸干，再加乙醇5ml使溶解，精密加入硫酸滴定液（0.01mol/l）15ml、水15ml 与甲基红指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.02mol/l）滴定至黄色。

3结论
从草乌炮制品指标测定结果可以看到，除诃子制之外，烘制和纯奶制得到的草乌炮制品中酯型碱含量均有降低，烘制法炮制得到的草乌中酯型碱含量降低程度最大（90.6%）。

在总生物碱方面，诃子制、烘制和纯奶制的作用相近。

草乌炮制品多指标试验评分结果显示，分数顺序：烘制（13.6865）>纯奶制（12.8416）>诃子制（9.8843）。

即在三种炮制方法中，烘制的效果最佳。

参考文献
[1]刘斌，李飞，钟桢传，等.正交设计法优选草乌炮制工艺[j].中国中药杂志，1994，19（4）：220.
[2]吕颖，王栋，林燕，等.蒙药材草乌及其炮制品中几种双酯型
生物碱的含量比较[j].时珍国医国药，2010，21（5）：1086. [3]韩志强，那生桑.蒙药草乌炮制方法的研究[j].世界科学技术-中国医药现代化专题讨论，2008，10（1）：150-154.
[4]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典一部[m].北京：化学工业出版社，2005：27.
[5]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典一部[m].北京：化学工业出版社，2010：220-221.
[6]倪永兴，丁俊.多指标试验简易化公式评分探讨[j].数理医药学杂志，1994，7（4）：307-308.。