孔雀绿染色

孔雀绿染料降解菌的分离纯化与特性研究

为了寻找能高效降解孔雀绿染料的微生物, 从菏泽市印染厂污水处理车间的不同位置提取活性污泥,筛选出一株对孔雀绿染料有强脱色能力的菌株.。根据其形态学特征和生理生化鉴定, 将其初步鉴定为无色杆菌属（Achromobacter sp）的菌株。在振荡培养条件下对该菌株的脱色反应条件进行研究，结果表明该菌株最适脱色pH为7，最适脱色温度为30℃。对该菌株的深入研究可使其在孔雀绿等染料的生物降解及为工业化生物处理含孔雀绿染料的印染污水处理和养殖废水等实际运用中起到重要的作用。

孔雀绿属于二氨基三甲苯烷类染料，为蓝绿色有金属闪光的结晶，呈弱碱性，易溶于水，广泛用于真丝、羊毛、皮革、麻制品、陶瓷制品、棉布等的染色，并因其对鱼体寄生虫和鱼卵中霉菌等杀灭效果非常显著而在水产养殖上广泛应用。但近几年的研究表明，孔雀绿的化学官能团三苯甲烷是一种致癌物质，并能在鱼体内长时间残留，可通过食物链对哺乳动物和人类产生致畸、致癌、致突变等作用，同时含有孔雀绿的印染废水和养殖废水排放后会污染水环境。因此，对废水中的孔雀绿染料进行脱色降解处理已成为当务之急。

目前，对染料脱色降解主要是利用化学脱色剂的化学混凝法和利用活性污泥的生物脱色法。与化学方法相比，微生物处理方法是环境友好型的染料废水处理方法。

本试验以高浓度孔雀绿染料为筛选底物，从孔雀绿污染土壤中分离出一株对孔雀绿有高效脱色作用的细菌，对该菌株的脱色性能进行了研究，丰富了微生物脱色降解孔雀绿染料的机理研究，以期为工业化生物处理含孔雀绿染料的印染废水和养殖废水提供科学参考和依据。

孔雀绿，又名孔雀石绿，绿色碱性有机染料。用来染丝、棉、毛等物。商品名有草酸盐和氯化锌两种规格，以前渔业上用的常为前者。孔雀石绿为翠绿色有光泽的结晶，属三苯甲烷类染料。极易溶于水，水溶液呈兰绿色。其在水生生物体中的主要代谢产物为无色孔雀石绿，无色孔雀石绿由于其不溶于水，残留毒性比孔雀石绿更强。孔雀石绿过去常被用于制陶业、纺织业、皮革业、食品颜色剂和细胞化学染色剂，1933年起其作为驱虫剂、杀虫剂、防腐剂在水产中使用，后曾被广泛用于预防与治疗各类水产动物的水霉病、鳃霉病和小瓜虫病。从上世纪90年代开始，国内外学者陆续发现，孔雀石绿及其代谢产物无色孔雀石绿具有高毒素、高残留、高致癌和高致畸、致突变等副作用。孔雀石绿能引起鱼类的鳃和皮肤上皮细胞轻度炎症；使肾管腔有轻度扩张，肾小管壁细胞的胞核也扩大；更

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重要的是影响鱼肠中的酶，使酶的分泌量减少，从而影响鱼的摄食及生长。鉴于孔雀石绿的危害性，许多国家都将孔雀石绿列为水产养殖禁用药物。我国也于2002年5月将孔雀石绿列入《食品动物禁用的兽药及其化合物清单》中，禁止用于所有食品动物。

目前，有很多学者在孔雀绿染料降解这方面做了很大的研究。本实验参考了张丽芳教授从土壤中分离、纯化获得一株真菌毛霉对孔雀绿染料的降解研究。真菌毛霉，对孔雀绿具有较好的脱色能力，其对染料的降解过程也是先吸附然后逐渐降解。本实验，从印染厂废水处理车间附近采集土壤样本，然后富集培养、分离纯化获得高效孔雀绿降解菌株，通过形态学观察、生理生化指标测定等手段，初步鉴定该菌株是无色杆菌属(Achromobacter sp.)的菌株。

无色杆菌属(Achromobacter sp.)是已知的具有广泛降解能力的微生物，可用于多种难降解物质的降解，如石油、苯酚、氯酚、铬酸盐和苯甲酸等。对该菌株脱色孔雀绿染料反应条件的研究结果表明，该菌株的脱色耐受温度较广，可耐受20-40 ℃的范围，且脱色率较高(>60%)，30 ℃为其最适脱色温度，脱色率可达到89.9%。能耐受酸性或碱性pH，调节培养基pH趋向于中性，以利于脱色，最适脱色pH为7，脱色率可达到90%以上。对低浓度的孔雀绿脱色效果好，并可耐受并脱色降解100 mg L-1以上浓度的孔雀绿染料。今后将进一步优化试验，提高无色杆菌属脱色菌株的脱色率，研究其中起脱色降解作用的酶类及经微生物脱色降解后孔雀绿毒性的变化，为生物法处理孔雀绿污染提供理论基础料。

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