植物体内谷氨酰胺合成酶活力的测定

1.粗酶液提取：称取植物材料1g于研钵中，加3ml提取缓冲液，置冰浴上研磨匀浆，转移于离心管中，4℃下15,000g离心20min，上清液即为粗酶液。

2.反应：1.6ml反应混合液B，加入0.7ml粗酶液和0.7ml ATP溶液，混匀，于37℃下保温半小时，加入显色剂1ml，摇匀并放置片刻后，于5,000g 下离心10min，取上清液测定540nm处的吸光值，以加入1.6ml反应混合液A的为对照。

3.粗酶液中可溶性蛋白质测定：取粗酶液0.5ml，用水定容至100ml，取2ml 用考马斯亮蓝G-250测定可溶性蛋白质。

4.原始数据记载

5.结果计算：GS活力(A·mg﹣1 protein·h﹣1)＝

式中 A—540nm处的吸光值；

P—粗酶液中可溶性蛋白含量（mg/ml）；

V—反应体系中加入的粗酶液体积（ml）；

T—反应时间（h）。