精子计数方法等

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(1)精子质量、数量观察

染毒90d后,小鼠颈椎脱臼处死,立即取左侧附睾尾称重后置于37 ℃ 5 mL生理盐水中,将附睾尾纵向剪碎,用4 层擦镜纸过滤,取滤液1 mL,另加37℃生理盐水9 mL混匀成精子悬液,进行以下检查:①精子计数:用0.2 mL毛细吸管吸悬液,采用血细胞计数板进行精子计数,换算成每克附睾精子数;

②精子活力:取精子悬液滴于载玻片上,高倍镜下随机观察5 个视野,记录各级活动精子的数量,求其百分率;

③精子畸形率:取精于悬液涂片。甲醇固定5min、干燥,用1%伊红染色1 h,再用水轻冲、干燥。用盲法在高倍镜下观察500个精子的形态。以计算精子畸形率。

精子图片集见另一文件夹

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