肠道菌群粪便涂片

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肠道菌群分析
的临床意义及分析方法 孙怡群
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微生态学
• 微生态学是二十一世纪新生命科学分支 之一,这门新学科使医学从治疗医学和 预防医学迈向保健医学的新阶段。
• 微生态学,促进了医学革命。正如一个 国际学者所说:“没有任何生理指标, 可以脱离与正常微生物群的关连”。
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近20年重大发现之一
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Ⅱ度菌群失调
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Ⅱ度菌群失调
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• Ⅲ度菌群失调:是一类严重失调,又 称为菌群交替症或二重感染。原有的肠 道菌很少,而少见的细菌成为优势菌。 菌群中各种细菌比例发生非常明显变化。
• 菌群失调的另一特殊表现 形式,发生定位转移
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Ⅲ度菌群失调
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Ⅲ度菌群失调
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Ⅲ度菌群失调
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五、粪便直接涂片报告方式1
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粪便直接涂片报告方式 1
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粪便直接涂片报告方式 1
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抗生素应用
• 微生态失调的主要原因是抗生素的不合 理应用。 →
• 强调促菌的积极作用。促菌是促进正常 有益菌、排斥、抑制、消灭有害菌,达 到微生态平衡。
• 抗菌则是杀灭致病菌的同时也杀灭了有 益菌,破坏了正常的微生态平衡。
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1.有益菌: 或称共生菌,双歧菌、
乳杆菌、优杆菌等
2.中间菌:如肠球菌、大肠杆菌、
• 人体内存在着一个微生态平衡与失调的 动态关系。
• 医学任务就是如何认识平衡与失调的本 质。
• 保持微生态平衡、矫正微生态失调,达 到治病、防病和保健的目的。
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正常微生物群
• 人的消化、吸收、营养、免疫都离不开 这些正常的生理性细菌,人体内的细菌 99%都是好菌,不但不会致病,而且会 引起人体产生免疫力。“坏菌”仅占少 数。如果正常菌减少,“坏菌”增多, 就会引起各种各样的疾病,这就是微生 态失调。
拟杆菌 有益,也有害
3.有害菌:如绿脓杆菌、葡萄球菌、
梭状芽孢杆菌
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一、粪涂片法Baidu Nhomakorabea临床意义
• 肠道菌群的种类
正常健康人的粪便其细菌总数约为1010个 /g左右,按细菌种的分类可达几百种,但临床 常见的主要菌种约数十种。
正常健康人的粪便中占绝大多数是专性厌 氧菌(简称厌氧菌)约占总数的99%,占少 数的是兼性厌氧菌、专性需氧菌及微需氧菌。
准值时可通过纸片分割视野的方法,五
个小孔上下左右中直径0.2-0.3cm进行
计数换算出百分率。这样比较客观。一
般计数1000个细菌换算出百分率以求得
各年龄组正常肠道菌群各类细菌的百分
率。
(评估见表3)
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胎便
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12h婴儿便
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母乳喂养1-2d后通常可行成一个典型的 肠菌群,开始以革兰阴性球/杆菌多见
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三、显微镜油镜检查方法
1.观察涂片和染色情况
2.总览细菌总数 可通过“比例概数法”进行判断(见表
1)
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3.观察革兰阳性、阴性杆菌 及球菌的比例改变(5级变化表2)
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计数方法是:
选定有代表性的视野部分区域作细菌分
类计数,缩小视野数200个以上的细菌
以求得其比例。对于初学者或为求得标
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肠道菌群中的主要厌氧菌
• 有芽孢杆菌一个种 G+ 梭状芽孢杆菌属 产气荚膜梭菌 破伤风梭菌
艰难梭菌 肉毒梭菌
无芽孢杆菌
G+ 双歧杆菌属 分叉杆菌 青春 长 婴儿双歧杆菌
丙酸杆菌属
痤疮丙酸杆菌
优杆菌属
迟缓优杆菌
乳杆菌属
嗜酸乳杆菌 保加利亚乳杆菌
放线菌属
衣氏放线菌
G- 拟杆菌属
脆弱拟杆菌 多形拟杆菌
梭杆菌属
核梭杆菌 坏死梭杆菌
普氏菌属
产黑色素普氏菌
卟啉单胞菌属 牙龈卟啉单胞菌
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粪涂片法的临床意义
• 正常微生物的平衡与失调要通过现代化 技术检测才能确定,如对正常微生物群 要进行定性、定量和定位检测,这些技 术比较复杂。 而此时一张大便涂片往往起到关键作用, 有时竟可以挽救病人的生命!
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二、粪便直接涂片法的 优缺点
• 设备简单,仅需一台显微镜、载玻片和 革兰染液;
• 操作方法简单; • 花费时间短(一般15min即可得出结果) • 形象直观,直接了解粪便菌群的“像”,
熟练者对菌群失调有较高的准确性。
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粪便直接涂片法的 优 缺点
• 检验者必须有一定的经验,否则易判断 错误;
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什么会使微生态失调呢?
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抗生素应用
• 抗生素的发现,给人类的生活带来 了巨大的变化,许多危重病人从死亡线 上被抢救回来。然而,随着抗生素的广 泛使用,也给人类带来了新的问题, (除抗生素本身毒副作用外)就是普遍 存在的抗生素引起的肠道菌群失调。
• 其他因素引起的如激素、同位素、 放射线和免疫抑制剂的大量应用,也可 造成导致菌群失调。
• 主要是定性检查,要求对菌群失调进行 分度,初学者往往难以区分,致确定分 度较困难。
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解决办法
• 按照图谱介绍方法,使操作标准化,以 图谱的菌群图片作对照,指导判断;
• 多看正常人的和菌群失调病人的粪便涂 片,经过一段时间就能掌握自如。
• 总之粪便涂片能快速诊断菌群失调,为 早期治疗提供线索。
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菌群失调的分度标准
• Ⅰ度菌群失调:是一类较轻的失调,诱 因去除后即可恢复正常,革兰阳性、阴 性菌比例轻度变化。
• Ⅱ度菌群失调:是一类中度的失调,呈 现为慢性病程,菌群比例明显改变。
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Ⅰ度菌群失调
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Ⅰ度菌群失调
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Ⅰ度菌群失调
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Ⅱ度菌群失调
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Ⅱ度菌群失调
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2d婴儿大便
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3d婴儿大便
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5d 婴儿大便
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5d婴儿大便,革兰阳性杆菌可见明显的分叉,革 兰阴性杆菌有浓染(似拟杆菌,也开始有少量的
革兰阴性球杆菌和革兰阳性球菌
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3个月幼儿正常粪便涂片
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6个半月母乳喂养幼儿正常粪便涂片
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健康青年之粪便涂片
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健康壮年之粪便涂片
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63岁正常女性粪便涂片
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71岁男性老年人粪便涂片
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76岁男性高血压脑病痴呆,卧床2年,营养良 好,饮食规律(属无明显异常改变的老年肠道菌群像)
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四、菌群失调的分度标准
• 肠道菌群的数量与各种菌种的比例发生 较大幅度的变化,超出正常范围并由此 产生的一系列临床表现,称为:肠道菌 群失调症。根据菌群失调的严重程度可 分为三度。
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