正常皮肤中单核巨噬细胞和树枝状细胞的分布规律_郭英军
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[关键词 ] 皮肤免疫系统 ;单核 2巨噬细胞 ;郎格汉斯细胞 ;树枝状细胞 ; CD68
The d istr ibution pa ttern of m onocytes/macrophages and dendr itic cells in nor2 ma l human derm is
GUO Y ing2J un, ZHAO Yu2M ing, WAN G Ya2Kun, CHEN Hong2D uo. D epa rtm en t of D erm a tology, the F irst Hospita l of Ch ina M ed ica l U n iversity, S henyang 110001, Ch ina
与 CD1a阳性细胞不同 ,主要位于表皮的中 、下部 ; 此外尚有一部分角质形成细胞呈 CD68 阳性 ,染色 形式为细胞核和细胞浆染色 ,见图 2。
真皮浅层仅见少数散在 LC,真皮内 CD68阳性 细胞分布于 : ( 1)沿表皮的真皮浅层排列 1 至数层 CD68阳性的细胞 ; ( 2 )真皮乳头层较致密的 CD68 阳性细胞 ; (3)血管周围较多的 CD68 阳性细胞 ,附 属器内及附属器周围的 CD68阳性细胞 ; (4)真皮深 层粗大胶原纤维间的散在分布的 CD68阳性细胞 。 213 真皮横断切片的染色结果 ( 1) CD1a阳性细 胞在真皮浅层少见 ,个别切片可见一些 CD1a阳性 细胞 ,多位于皮肤附属器 (毛囊 )和血管周围 ,但其 间的真皮纤维中 CD1a阳性细胞少见 ,见图 3。 ( 2) CD68阳 性 细 胞 : ①在 真 皮 浅 层 呈 网 状 分 布 , 在 6μm 厚的真皮横切片中 ,其密度为 361 ～562 个细 胞 /mm2 ,在多数解剖部位间真皮内 CD68 阳性细胞 密度相近 ,变化范围较 CD1a阳性细胞少 ,见图 4和 表 1。真皮内 CD68阳性细胞分为 3种 :树枝状及非 树 枝状 ,其中树枝状 CD 68阳性细胞又分为深染及
来自百度文库
念是目前所认识的真皮免疫系统的主要结构基础 : 围绕真皮小血管分布的淋巴细胞 、单核 2巨噬细胞 、 树枝状细胞 [ 2 ] 。然而 ,在多数情况下 ,微生物或抗 原物质侵入人体时 ,首先穿透表皮进入真皮浅层 。 在生物体的长期进化过程中 ,作为皮肤免疫系统的 重要组成部分 ,真皮免疫系统的结构应当针对来自 表皮方向的侵袭 。因此 ,真皮免疫系统的防御应当 是具有方向性的 ,我们发现单核 2巨噬细胞在真皮浅 层形成多层较致密的网 , 其密度远高于表皮内的 LC,构成真皮免疫防御的一道重要防线 ,并据此提 出了真皮单核 2巨噬细胞的网状分布的形式和防御 方向性的概念 。
·566·
中国免疫学杂志 2006年第 22卷
1 材料与方法
111 正常皮肤 脑外伤死亡男性患者 8例 ,平均年 龄 34 ±611岁 ,每例均取其面部 、躯干 、四肢近端 、四 肢远端 、手掌和足跖 6 个部位皮肤 。皮肤标本分为 数块 :分离真皮和表皮 ,表皮行免疫组化染色后 ,铺 片观察 ;真皮组织 OCT包埋后行横向 (水平 )切片检 查 ; OCT复合物包埋真表皮进行纵 (垂直 )切片观察 。 112 试剂 CD68和 CD1a单克隆抗体均购自 Dako 公司 , 1∶100倍稀释 。 113 方法 11311 真表皮分离术 取正常皮肤 ,去除皮下组 织 ,剪成 015～1 cm 小块 ,在 015 mol/L 的 EDTA 溶 液中 37℃水浴 1小时 ,解剖显微镜下用镊子分离真 表皮 。表皮丙酮固定 ,真皮 OCT包埋 。 - 70℃冻存 待用 。 11312 ABC过氧化酶技术 ①将速冻组织块在 25℃恒冷切片机上连续切片 ,厚 6 μm ,贴于明胶载 玻片上 ,丙酮固定 ; ②加 1 ∶100 倍稀释的 CD68 或 CD1a单克隆抗体于切片和表皮铺片上 , 37℃湿盒内 孵育 60 分钟 ; ③加生物素化的马抗鼠 IgG血清 , 37℃孵育 30 分钟 ; ④浸于 013% H2 O2 2PB S中 20 分 钟 ,阻断内源性过氧化物酶 ; ⑤滴加 ABC复合物 ,孵 育 30分钟 ; ⑥加底物 32氨基 292乙基卡巴唑 (AEC) 室温显色 ; ⑦苏木素复染 ,甘油明胶封片 。 114 观察指标 观察单核 2巨噬细胞和 LC在真皮 内分布部位的深浅 ,染色强弱 ,细胞的树枝状分枝的 长短等 。 115 计数与统计处理 以测微尺标定目镜方格在 不同放大倍数下的大小 ,计数方格内的阳性细胞数 , 计算 出 单 位 面 积 内 细 胞 的 密 度 。统 计 分 析 采 用 SPSS统计软件的 t检验 。
2 结果
211 表皮铺片内 CD1a和 CD68阳性细胞的密度 面 、躯干及四肢表皮内的 CD1a阳性细胞密度较高 , 为 530 ±216 和 809 ±204 个 /mm2 ,这些部位 CD68 阳性细胞的密度与 CD1a阳性细胞密度相近 ,为 524
±148和 650 ±249个 /mm2 ;在手掌和足跖的表皮内 LC密度为 184 ±92 和 252 ±104 个 /mm2 , CD68 阳 性细胞密度则相对较高 , 为 234 ±112 和 310 ±97 个 /mm2 ,见表 1。 212 皮肤纵切片内 CD1a阳性细胞和 CD68阳性细 胞的分布 CD1a 阳性细胞多位于表皮中部 ,见图 1。表皮内的 CD68阳性细胞一部分为树枝状 ,分布
①本课题为辽宁省教育厅资助项目 ( 051464) 作者简介 :郭英军 (1970年 - ) ,女 ,博士 ,主要从事免疫皮肤病学的
研究 ,现工作单位是中国医科大学附属第二医院 ; 通讯作者 :赵玉铭 (1959年 - ) ,男 ,副教授 ,硕士生导师 ,主要从事免
疫皮肤病学的研究 , E2mail: ymzhao_sy@ yahoo. com。
表 1 表皮铺片和真皮水平切片的阳性细胞密度 (细胞 / mm2 )
Tab11 D en sity of positive cell in ep iderma l sheets and hor izona l derma l section s( cell/mm2 )
Trank Palm So le Prox limb D ist limb Face
中的作用 。方法 :正常皮肤 8例 ,取面部 、躯干 、四肢近端 、四肢远端 、手掌和足跖 6 个部位皮肤 ,进行纵行与水平切片 。CD1a 和 CD68单克隆抗体染色 ,观察朗格汉斯细胞 (LC)和单核 2巨噬细胞的分布形态和密度 。结果 :真皮浅层 CD68阳性细胞呈网 状分布 ,其密度为 361～562个 /mm2。真皮内血管周围及附属器周围亦见 CD68 阳性细胞 。真皮深层 CD68 阳性细胞多为树 枝状 ,散在分布于粗大的胶原纤维之间 。不同解剖部位真皮浅层 CD68阳性细胞密度分别为 :四肢远端 562个 /mm2 ,腹部 517 个 /mm2 ,面部 509个 /mm2 ,手掌 507个 /mm2 ,四肢近端 472个 /mm2 ,足跖 361个 /mm2。真皮浅层 CD68阳性细胞在手掌和足 跖部位高于相应部位的表皮内 CD1a和 CD68细胞 。结论 :在真皮浅层形成数层单核 2巨噬细胞网 ,此网在接近真表皮交界处 较致密 。真皮内单核 2巨噬细胞的这种分布形式说明这些细胞在真皮内有明确的方向性 ,其防御的方向是穿透表皮进入真皮 的入侵物 。
郭英军等 正常皮肤中单核巨噬细胞和树枝状细胞的分布规律 第 6期
·565·
正常皮肤中单核巨噬细胞和树枝状细胞的分布规律 ①
郭英军 赵玉铭 王雅坤 陈洪铎 (中国医科大学附属第一医院 ,沈阳 110001)
中国图书分类号 R751 文献标识码 A 文章编号 10002484X( 2006) 0620565204 [摘 要 ] 目的 :观察正常真皮内的单核 2巨噬细胞和树枝状细胞的分布 、排列规律 ,探讨单核 2巨噬细胞在皮肤免疫防御
[ Key words] Skin immune system; Monocyte /macrophage; Langerhans cells; Dendritic cells; CD68
近年来人们对于真皮在皮肤免疫中的作用 ,有 了较深入的认识 。真皮不仅仅是由胶原纤维和基质 构成的结缔组织 ,而且是含有多种细胞成分 ,如单 核 2巨噬细胞 、真皮树枝状细胞 、肥大细胞 、淋巴细 胞 、粒细胞以及血管内皮细胞等 ,构成具有重要功能 的真皮免疫系统 [ 1 ] 。真皮微血管单位 (DMU )的概
[ Abstract] O bjective: To observe the distribution, morphology and density of monocytes/macrophages and dendritic cells in the normal human derm is. M ethods:Normal skin from 6 locations such as the face, trunk, p roximal limbs, distal limbs, and palm s and soles of 8 subjects were collected for the study. The horizontal and longitudinal sections of the skin were stained with an ABC immu2 noperoxidase p rocedure w ith anti2CD1a and anti2CD68 monoclonal antibodies. Results: In the superficial derm is CD68 positive mono2 cytes/macrophages form a dense network w ith a density in a 62m icron section ranging from 361 /mm2 to 562 /mm2. These network of CD68 positive cells continued on to surround the blood vessels and skin appendages. Lower densities of CD68 positive dendritic cells were found in the deep ( reticular) derm is, dispersed between collagen bundles. The CD68 positive cells were detected w ithin the su2 perficial derm is w ith variable densities: distal limbs 562 /mm2 , trunk 517 /mm2 , face 509 /mm2 , palm s 507 /mm2 , p roximal limbs, 472 /mm2 , and soles 361 /mm2. Conclusion: There exists in the superficial derm is a relatively dense network of CD68 positive mono2 cytes/macrophages. Such a distribution m ight indicate the clear polarity of the dermal monocytes/macrophages, w ith their direction of defense towards to the dermal2ep idermal junction.
The d istr ibution pa ttern of m onocytes/macrophages and dendr itic cells in nor2 ma l human derm is
GUO Y ing2J un, ZHAO Yu2M ing, WAN G Ya2Kun, CHEN Hong2D uo. D epa rtm en t of D erm a tology, the F irst Hospita l of Ch ina M ed ica l U n iversity, S henyang 110001, Ch ina
与 CD1a阳性细胞不同 ,主要位于表皮的中 、下部 ; 此外尚有一部分角质形成细胞呈 CD68 阳性 ,染色 形式为细胞核和细胞浆染色 ,见图 2。
真皮浅层仅见少数散在 LC,真皮内 CD68阳性 细胞分布于 : ( 1)沿表皮的真皮浅层排列 1 至数层 CD68阳性的细胞 ; ( 2 )真皮乳头层较致密的 CD68 阳性细胞 ; (3)血管周围较多的 CD68 阳性细胞 ,附 属器内及附属器周围的 CD68阳性细胞 ; (4)真皮深 层粗大胶原纤维间的散在分布的 CD68阳性细胞 。 213 真皮横断切片的染色结果 ( 1) CD1a阳性细 胞在真皮浅层少见 ,个别切片可见一些 CD1a阳性 细胞 ,多位于皮肤附属器 (毛囊 )和血管周围 ,但其 间的真皮纤维中 CD1a阳性细胞少见 ,见图 3。 ( 2) CD68阳 性 细 胞 : ①在 真 皮 浅 层 呈 网 状 分 布 , 在 6μm 厚的真皮横切片中 ,其密度为 361 ～562 个细 胞 /mm2 ,在多数解剖部位间真皮内 CD68 阳性细胞 密度相近 ,变化范围较 CD1a阳性细胞少 ,见图 4和 表 1。真皮内 CD68阳性细胞分为 3种 :树枝状及非 树 枝状 ,其中树枝状 CD 68阳性细胞又分为深染及
来自百度文库
念是目前所认识的真皮免疫系统的主要结构基础 : 围绕真皮小血管分布的淋巴细胞 、单核 2巨噬细胞 、 树枝状细胞 [ 2 ] 。然而 ,在多数情况下 ,微生物或抗 原物质侵入人体时 ,首先穿透表皮进入真皮浅层 。 在生物体的长期进化过程中 ,作为皮肤免疫系统的 重要组成部分 ,真皮免疫系统的结构应当针对来自 表皮方向的侵袭 。因此 ,真皮免疫系统的防御应当 是具有方向性的 ,我们发现单核 2巨噬细胞在真皮浅 层形成多层较致密的网 , 其密度远高于表皮内的 LC,构成真皮免疫防御的一道重要防线 ,并据此提 出了真皮单核 2巨噬细胞的网状分布的形式和防御 方向性的概念 。
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中国免疫学杂志 2006年第 22卷
1 材料与方法
111 正常皮肤 脑外伤死亡男性患者 8例 ,平均年 龄 34 ±611岁 ,每例均取其面部 、躯干 、四肢近端 、四 肢远端 、手掌和足跖 6 个部位皮肤 。皮肤标本分为 数块 :分离真皮和表皮 ,表皮行免疫组化染色后 ,铺 片观察 ;真皮组织 OCT包埋后行横向 (水平 )切片检 查 ; OCT复合物包埋真表皮进行纵 (垂直 )切片观察 。 112 试剂 CD68和 CD1a单克隆抗体均购自 Dako 公司 , 1∶100倍稀释 。 113 方法 11311 真表皮分离术 取正常皮肤 ,去除皮下组 织 ,剪成 015～1 cm 小块 ,在 015 mol/L 的 EDTA 溶 液中 37℃水浴 1小时 ,解剖显微镜下用镊子分离真 表皮 。表皮丙酮固定 ,真皮 OCT包埋 。 - 70℃冻存 待用 。 11312 ABC过氧化酶技术 ①将速冻组织块在 25℃恒冷切片机上连续切片 ,厚 6 μm ,贴于明胶载 玻片上 ,丙酮固定 ; ②加 1 ∶100 倍稀释的 CD68 或 CD1a单克隆抗体于切片和表皮铺片上 , 37℃湿盒内 孵育 60 分钟 ; ③加生物素化的马抗鼠 IgG血清 , 37℃孵育 30 分钟 ; ④浸于 013% H2 O2 2PB S中 20 分 钟 ,阻断内源性过氧化物酶 ; ⑤滴加 ABC复合物 ,孵 育 30分钟 ; ⑥加底物 32氨基 292乙基卡巴唑 (AEC) 室温显色 ; ⑦苏木素复染 ,甘油明胶封片 。 114 观察指标 观察单核 2巨噬细胞和 LC在真皮 内分布部位的深浅 ,染色强弱 ,细胞的树枝状分枝的 长短等 。 115 计数与统计处理 以测微尺标定目镜方格在 不同放大倍数下的大小 ,计数方格内的阳性细胞数 , 计算 出 单 位 面 积 内 细 胞 的 密 度 。统 计 分 析 采 用 SPSS统计软件的 t检验 。
2 结果
211 表皮铺片内 CD1a和 CD68阳性细胞的密度 面 、躯干及四肢表皮内的 CD1a阳性细胞密度较高 , 为 530 ±216 和 809 ±204 个 /mm2 ,这些部位 CD68 阳性细胞的密度与 CD1a阳性细胞密度相近 ,为 524
±148和 650 ±249个 /mm2 ;在手掌和足跖的表皮内 LC密度为 184 ±92 和 252 ±104 个 /mm2 , CD68 阳 性细胞密度则相对较高 , 为 234 ±112 和 310 ±97 个 /mm2 ,见表 1。 212 皮肤纵切片内 CD1a阳性细胞和 CD68阳性细 胞的分布 CD1a 阳性细胞多位于表皮中部 ,见图 1。表皮内的 CD68阳性细胞一部分为树枝状 ,分布
①本课题为辽宁省教育厅资助项目 ( 051464) 作者简介 :郭英军 (1970年 - ) ,女 ,博士 ,主要从事免疫皮肤病学的
研究 ,现工作单位是中国医科大学附属第二医院 ; 通讯作者 :赵玉铭 (1959年 - ) ,男 ,副教授 ,硕士生导师 ,主要从事免
疫皮肤病学的研究 , E2mail: ymzhao_sy@ yahoo. com。
表 1 表皮铺片和真皮水平切片的阳性细胞密度 (细胞 / mm2 )
Tab11 D en sity of positive cell in ep iderma l sheets and hor izona l derma l section s( cell/mm2 )
Trank Palm So le Prox limb D ist limb Face
中的作用 。方法 :正常皮肤 8例 ,取面部 、躯干 、四肢近端 、四肢远端 、手掌和足跖 6 个部位皮肤 ,进行纵行与水平切片 。CD1a 和 CD68单克隆抗体染色 ,观察朗格汉斯细胞 (LC)和单核 2巨噬细胞的分布形态和密度 。结果 :真皮浅层 CD68阳性细胞呈网 状分布 ,其密度为 361～562个 /mm2。真皮内血管周围及附属器周围亦见 CD68 阳性细胞 。真皮深层 CD68 阳性细胞多为树 枝状 ,散在分布于粗大的胶原纤维之间 。不同解剖部位真皮浅层 CD68阳性细胞密度分别为 :四肢远端 562个 /mm2 ,腹部 517 个 /mm2 ,面部 509个 /mm2 ,手掌 507个 /mm2 ,四肢近端 472个 /mm2 ,足跖 361个 /mm2。真皮浅层 CD68阳性细胞在手掌和足 跖部位高于相应部位的表皮内 CD1a和 CD68细胞 。结论 :在真皮浅层形成数层单核 2巨噬细胞网 ,此网在接近真表皮交界处 较致密 。真皮内单核 2巨噬细胞的这种分布形式说明这些细胞在真皮内有明确的方向性 ,其防御的方向是穿透表皮进入真皮 的入侵物 。
郭英军等 正常皮肤中单核巨噬细胞和树枝状细胞的分布规律 第 6期
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正常皮肤中单核巨噬细胞和树枝状细胞的分布规律 ①
郭英军 赵玉铭 王雅坤 陈洪铎 (中国医科大学附属第一医院 ,沈阳 110001)
中国图书分类号 R751 文献标识码 A 文章编号 10002484X( 2006) 0620565204 [摘 要 ] 目的 :观察正常真皮内的单核 2巨噬细胞和树枝状细胞的分布 、排列规律 ,探讨单核 2巨噬细胞在皮肤免疫防御
[ Key words] Skin immune system; Monocyte /macrophage; Langerhans cells; Dendritic cells; CD68
近年来人们对于真皮在皮肤免疫中的作用 ,有 了较深入的认识 。真皮不仅仅是由胶原纤维和基质 构成的结缔组织 ,而且是含有多种细胞成分 ,如单 核 2巨噬细胞 、真皮树枝状细胞 、肥大细胞 、淋巴细 胞 、粒细胞以及血管内皮细胞等 ,构成具有重要功能 的真皮免疫系统 [ 1 ] 。真皮微血管单位 (DMU )的概
[ Abstract] O bjective: To observe the distribution, morphology and density of monocytes/macrophages and dendritic cells in the normal human derm is. M ethods:Normal skin from 6 locations such as the face, trunk, p roximal limbs, distal limbs, and palm s and soles of 8 subjects were collected for the study. The horizontal and longitudinal sections of the skin were stained with an ABC immu2 noperoxidase p rocedure w ith anti2CD1a and anti2CD68 monoclonal antibodies. Results: In the superficial derm is CD68 positive mono2 cytes/macrophages form a dense network w ith a density in a 62m icron section ranging from 361 /mm2 to 562 /mm2. These network of CD68 positive cells continued on to surround the blood vessels and skin appendages. Lower densities of CD68 positive dendritic cells were found in the deep ( reticular) derm is, dispersed between collagen bundles. The CD68 positive cells were detected w ithin the su2 perficial derm is w ith variable densities: distal limbs 562 /mm2 , trunk 517 /mm2 , face 509 /mm2 , palm s 507 /mm2 , p roximal limbs, 472 /mm2 , and soles 361 /mm2. Conclusion: There exists in the superficial derm is a relatively dense network of CD68 positive mono2 cytes/macrophages. Such a distribution m ight indicate the clear polarity of the dermal monocytes/macrophages, w ith their direction of defense towards to the dermal2ep idermal junction.