FS-2荧光分光光度计波长扫描模式使用指南

测试模式
波长扫描
波长扫描模式是用来测试发射，激发和同步波谱
波长扫描的测试流程：
1，在FluoroMaster Plus文件夹里点击“Wave Scan”来打开波长扫描软件
2，检查发射光栅运行完毕
3，在工具栏里点击新建“”，将出现下面的窗口，输入文件名并点击保存
4，创建新的实验对话框将显示如下。

输入一个标题,客户和用户ID,然后单击OK。

▶信息窗口:
输入简短的信息关于这个实验或样品。

▶Title:
输入标题的实验。

▶Customer:
客户的输入信息
▶User ID:
应该设置用户ID来执行测量。

5，将会显示下面的窗口
6，设置测量条件
▶点击打开后加载之前使用的测试条件方案
▶保存当前测量设置,可以另存为
▶使用当前测量设置作为默认的设置,保存所有参数为默认方法
7，点击开始
在测试期间如果荧光强度超过65000会出现警告：
这种情况下，在工具栏，有一个图标，点击后可以阻止高荧光强度对PMT的伤害
8，测试完成后将会显示下面的信息，并且点击“OK”
9，光谱结果和数据都将会显示
10，点击可以打印出数据
测试设置
在波扫描模式下,发射,兴奋,和同步光谱测量数据是可用的。

1．发射光谱的测量
测量发射光谱,在扫描模式下选择“Emission”
A．General
a) Data Mode（数据模式）
按以下设置数据模式：
- Fluorescence:
测量荧光频谱，当样品接触到激发光束的时候光谱被测量出来
- Luminescence:
测量发光光谱如生物发光,化学发光。

样品没有接触激发光束时发光光谱被测量。

- Phosphorescence:
磷光光谱测量。

当磷光模式被选中时,接触时间(s)选项卡和磷光延迟(ms)选项
就被创建了。

- Light Exposure Time(s)
计算样品接触到激发光的时间
- Phosphorescence Delay(ms) :
在激发快门关闭之后测试开始之前来延迟时间。

在点击Start键,样品接触
激发光的设置在发射开始波长和激发快门关闭。

然后,在延迟的测量为设置时间,磷光强度测量。

然后,测量磷光下一个波长以相同的顺序。

b) Auto Zero
在起始波长处设置荧光强度为“0”
c) Corrected Spectra
修正谱函数是用来补偿光谱的失真,可能是由于不同的反射,吸光系数、灵敏度等系统的每个组件作为PMT、光栅、镜子、透镜等。

d) Start Delay (s)
设置延迟时间测试样品(单位:秒)。

e) Repeat Number
设置重复数字测量。

f) Repeat Interval Time (m)
设置重复测量之间的间隔时间当重复号码设置超过2(单位:分钟)。

g) PMT Voltage (Volt)
输入PMT电压从100到1000伏特。

更高的PMT电压设置可以提高强度,但它可能减少PMT寿命。

如果强度超过65000项,PMT可能损坏或PMT寿命可能减少。

选择合适的PMT电压。

h) Scan Speed (nm/min)
选择扫描速度:1、10、60、300、600、1200、2400、6000 纳米/分钟,自动或用户定义的模式。

随着扫描速度下降,信噪比率上升,但这需要更多的时间来测量。

平均数量和发射间隔(nm)决心自动根据设置扫描速度。

如果扫描速度设置“自动”,发射间隔设置1海里。

如果扫描种子设置“用户定义”,发射间
隔和平均数量根据需要设置。

i) Integration Time (ms)
进入PMT积分时间:0.02到1250ms。

积分时间设置的越长强度越高,但它会降低PMT寿命。

如果强度超过65000项,PMT可能损坏或PMT寿命可能减少。

输入适当的PMT积分时间。

*扫描速度和积分时间组合
●如果在“扫描速度”中选择“自动”,扫描时间间隔设置为1纳米。

●如果在“扫描速度”中选择“用户定义”,积分时间、平均数字,扫描时间
间隔可以根据需要设置。

●小积分时间可能导致数据丢失，为了得到波长扫描模式和3 d扫描模式的
精确数据,集成超过20 ms是必要的。

●扫描速度取决于电脑和光谱的通信速率可以稍微有所不同。

j) Response Time (s)
确定数据处理速度得到测量光谱。

在以下值中选择响应时
间:0.02,0.1,0.2,0.5,1.0,2.0,4.0和8.0秒。

k) Average Number
在单一波长处设置平均时间。

只有扫描速度设置为“用户自定义”,平均数字
可以被设置为所需的。

平均数量的增加,信噪比率会变得很高,但扫描速度变得
缓慢。

l) EX Slit (nm)
选择狭缝宽度对励磁单色仪:0.5、1、2.5、5、10、20纳米。

随着狭缝宽度减
小,谱带宽度也减小,强度降低。

每个狭缝宽度意味着FWHM (全宽半最大)的激
发或发射光谱。

m) EM Slit (nm)同EX Slit
n) EX Filter (nm)
选择过滤器激发单色仪。

例过滤器是用来去除二阶辐射效应从激发光谱。

短
的波长截止滤波器可以选择以下之一:空气(无过滤器),320 nm、435 nm和530
nm(其他过滤器是可选的)。

o) EM Filter (nm)同EX Filter
p) Apply
在进入实验参数,点击申请制作系统被应用到输入参数和准备好开始测量。

B. Wave Setup
a) EM Zero Order
检测励磁信号在整个发射波长范围。

b) EM Wave (nm)
进入发射波长的激发测量。

可用波长范围是190到900纳米。

设置长波长比激
发波长范围来衡量。

c) EX Start (nm)
设置开始波长测量激发光谱。

范围是190到900纳米。

d) EM End (nm)
设置结束波长测量发射光谱。

范围是190到900纳米。

e) EM Interval (nm)
设置测量时间间隔的荧光发射光谱(nm)。

作为扫描速度设置“用户定义”只
有,EM间隔(nm)可以根据需要设置。

f) Set monitoring wave
设置监控波长。

在选定的波长的荧光强度显示在结果窗口。

监控波长可以通
过添加或删除插入或删除命令。

C. Display Setup
设置显示选项在光谱窗口和结果窗口,点击Display Setup。

a) Grid View b) Legend View c) Decimal Point
a在光谱窗口显示网格；b在光谱窗口显示图例；c在结果窗口设置小数点 (1 - 10)。

d) Y Axis Auto Scale e) View Label f) X Axis Display Interval (nm)
d使用光谱强度在Y轴上的自动标尺。

e显示标签标记的光谱窗口。

f设置x轴显示间隔
值从0.1到10纳米。