抗核抗体测定

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抗非组蛋白抗体:抗nRNP/抗U1RNP、抗Scl-70、
ANA谱
抗SSA、抗Sm、抗SSB、抗Jo-1、抗Rib抗体、 AnuA、抗DNP、抗D’E多肽抗体、抗DM53抗体
抗RANA抗体、抗着丝点、抗Ku抗体等
抗核仁抗体:抗PM-Scl抗体、抗Th/To抗体、 抗U3-RNP、抗4-6-S-RNA抗体等
的RNA和多肽组成。
有特异诊断价值的有以下七种: ①抗nRNP(nuclear RNP,nRNP)抗体; ②抗Sm抗体; ③抗SSA抗体; ④抗SSB抗体; ⑤抗Scl-70抗体; ⑥抗Jo-1抗体; ⑦抗核糖体抗体 。
抗Sm抗体:SLE标记性抗体(20%~40%) 抗U1-RNP抗体:MCTD 95%~100%(高滴度)
抗DNA抗体
①抗天然DNA (native DNA,nDNA) 抗体,又称抗双 链DNA (double stranded DNA,dsDNA) 抗体。 对SLE有高特异性; SLE诊断标准之一。 缓解期降低 药物疗效
70%~90%SLE
活动期增高 ②抗变性DNA (denatured DNA,dDNA) 抗体,又称抗单链 DNA (single stranded DNA,ssDNA)抗体。
抗dsDNA和抗Sm阴性的SLE阳性 率为60%~80%,特异性>97%。
(二)ANA的检测方法
1.荧光免疫法
形成胞核基质—ANA—抗人Ig ·FITC

将患者血清先进行稀释,可以做定量试验,在1:80 稀释仍呈阳性时,对SLE的诊断有较大的参考价值。
间接法: 第一步:荧光素标记抗抗体 第二步:已知Ag固定+待测Ab——洗涤 再加入抗Ab* ——洗涤——镜检。 Ag Ab(?) 抗- Ab*
抗核抗体的测定
(antinuclear antibody,ANA)又称抗核酸抗 原抗体,是一组将自身真核细胞的各种成分脱 氧核糖核蛋白(DNP)、DNA、可提取的核抗 原(ENA)和RNA等作为靶抗原的自身抗体的 总称,能与所有动物的细胞核发生反应,主要 存在于血清中,也可存在于胸水、关节滑膜液 和尿液中。 在某些因素作用下改变细胞核某些成分性质, 激发机体产生许多抗不同核成分的抗体;
相关疾病
SLE、慢活肝炎 SLE、RA、PSS、慢性 肝病 MCTD、SLE、PSS、SS 、PM PSS、雷诺现象、SLE PSS、CREST综合征
周边型
可见于胶原病、PBC、CAH等患者
2. ELISA法
用ELISA间接法检测抗dsDNA抗体、 抗组蛋白抗体和抗核小体抗体。
3. 免疫印记法
THANK
特点: 1.制备一种荧光抗体,可检测多种Ag或Ab。 2.既可检测Ag,又可检测Ab。 3.灵敏度高,但易产生非特异性荧光
抗核抗体核型与相关疾病
核型
核膜型 均质型 斑点型 核仁型 着丝点型
荧光图形
核周环状荧光 核呈均质荧光 核内颗粒状荧光 核仁有荧光 核浆细小相同颗 粒荧光
抗体
抗dsDNA 抗DNA、AHA 、 AnuA 抗ENA 抗核仁抗体 抗着丝点

抗核抗体在多种自身免疫病中均呈不同程度的 阳性率
如系统性红斑狼疮(SLE,95%~100%)、 类风湿性关节炎(RA,10%~20%)、 混合性结缔组织病(MCTD,80%~100%)、 干燥综合症(SS,10%~40%)、 全身性硬皮病(85%~90%)、 狼疮性肝炎(95%~100%)、 原发性胆汁性肝硬化(95%~100%)等,



ANA主要是IgG,也有IgM、IgA、IgD和 IgE; ANA无器官特异性和种属特异性; ANA主要存在于血清中; 将检出ANA作为AID存在的依据。
(一)ANA的类型和临床意义
抗DNA抗体:抗dsDNA/抗nDNA、抗ssDNA/抗dDNA等 抗组蛋白抗体(AHA):抗H1、抗H2A、抗H2B、 抗H3、抗H4抗体等
YOU!

抗SSA抗体:SS 40%~95%,其它CTD 抗SSB抗体: SS 40%~90%,其它CTD 抗Scl-70抗体:PSS25%~70%, 标记性抗体 抗Jo-1抗体:PM/DM 25%,标记性抗体 抗rRNP(Rib)抗体: SLE特异性抗体 (10%~20%)
抗DNP抗体
抗DNP抗体(抗核蛋白抗体):核蛋白(DNP) 抗原由DNA和蛋白质组成。DNP抗原有不溶性 和可溶性两种,可分别产生相应的抗体。
抗组蛋白抗体
抗组蛋白抗体(anti-histonic antibody,AHA): 由H1、H2A、H2B、H3和H4五个亚单位,各自都 有特异性抗体;
检 出 百 分 率
100 90 70 50 AHABiblioteka BaiduAHA AHA 抗 dsDNA
药物诱导 性狼疮只 能检出此
SLE
抗ENA抗体
可提取性核抗原 (extractable nuclear antigen,ENA) 是盐水或磷酸盐缓冲液可提取性核抗原的总称,是非 组蛋白的核蛋白,属酸性核蛋白抗原,由许多小分子量
检出 百分 率
100 80 60 40 20
SLE 非活动期
SLE 活动期
RA滑 膜液中
抗 DNP 抗 DNP
抗 DNP 抗 DNP
抗不溶性DNP抗体
抗可溶性DNP抗体
抗核小体抗体
抗核小体抗体(anti-nucleosome antibody,AnuA) 是细胞核染色质的基本单位; 细胞凋亡而致核小体大量蓄积, 诱导B细胞产生的AnuA是SLE 特异性的标志抗体。
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