大肠杆菌BL21和DH5α感受态制备
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大肠杆菌BL21和DH5α感受态制备
实验结果：大肠杆菌BL21和DH5α感受态制备
1. 将大肠杆菌菌液涂布到平板，37℃过夜
2. 挑单菌落，到4mL LB培养基中37℃振荡培养过夜，以1：50的比例转接到LB培养基2-3h，至OD600为0.4左右
3. 取菌液50mL,冰上放置30min，于4℃，5000rpm，5min去上清
4. 加10mL冰上预冷的0.1mol/L CaCl2重悬浮细胞（或者1mL冰上预冷的0.2mol/L CaCL2 及1mL冰上预冷的30%灭菌甘油重悬）100uL/管
分装，冻存备用
5. 第二天用质粒转染涂板检验
实验结果：
用RANKL质粒转化，AMP筛选
BL21 DH5α